首先，泛素化修饰是蛋白质稳态调控的重要方式之一，泛素-蛋白酶体系统（UPS）是真核细胞内蛋白质降解的主要方式之一。泛素连接酶E3决定了底物识别的特异性，去泛素化酶DUB特异性剪切和加工泛素链，促进泛素分子的循环利用，蛋白酶体负责细胞内大多数蛋白质的降解。但它们如何有机协作控制底物蛋白的命运一直是领域内研究的热点。“泛素化修饰调控蛋白质稳态的机制”部分包括5篇综述和2篇研究报告：针对磷酸化与泛素化修饰的相互作用，季然等总结了泛素蛋白已知的磷酸化修饰位点，梳理了泛素蛋白T12、S57、S65等位点的磷酸化修饰对其生物物理特性带来的改变；姚怡辰等综述了磷酸化和泛素化修饰在TORC1信号通路中的重要作用，为药物靶点的发现提供新思路。针对泛素连接酶的和去泛素化酶的重要作用，周璐等梳理了动植物中COP1泛素连接酶介导的信号转导与蛋白质稳态调控机制；黄彬等探索了线性泛素化连接酶LUBAC介导RabGEF1的线性泛素化修饰；张新等揭示了去泛素化酶USP10通过稳定泛素连接酶Smurf1抑制TGF-β/BMP信号通路的作用，为进一步理解泛素化修饰机制提供了认识；应淑敏等总结了过氧化物酶体的稳态维持与膜接触位点的研究进展，戴炜等综述了原核生物中Pup-蛋白酶体系统的作用机制和生物学功能，并对该系统在生物技术研发中的应用前景进行了展望。
其次，蛋白质泛素化修饰异常是肿瘤等重大疾病发生发展的重要因素，理解泛素化修饰控制和参与疾病进程的功能，对发展疾病治疗策略至关重要。“泛素化修饰与疾病治疗”部分包括4篇综述：曹心怡等探讨了SPOP对前列腺癌（PCa）分层治疗的重要意义，提出在治疗早期对PCa患者进行基因检测，根据分子分型确定不同个性化的分层治疗方案，这可能对改善PCa的预后状况产生有利影响；彭韵桦等分析了靶向蛋白质泛素化修饰在PCa治疗中的机遇与挑战；郑雅文等综述了蛋白质拟素化和去拟素化在肺癌发生发展中的作用，详细介绍了拟素化调节肺癌细胞的生长、存活和肺癌微环境以及免疫反应的功能和机制，进一步探讨了靶向拟素化对肺癌临床治疗的价值。针对神经退行性疾病，贾凤菊等以E3泛素连接酶和DUBs为切入点，综述了蛋白质泛素化和去泛素化修饰参与多巴胺能神经元损伤机制的最新研究进展。
最后，泛素化机器作为疾病药物靶点的研究受到广泛关注，发展基于泛素化机器的靶向技术，将为发展新的疾病治疗药物奠定基础。“泛素化修饰的识别和靶向技术”部分包括1篇综述和1篇研究报告：泛素链的分型检测及动态追踪一直是泛素研究技术上的难点，化学探针作为一类可用于探测活性酶的工具，近期被发展并愈来愈多的用于研究泛素化过程的微观机制，梁家伟等总结了针对泛素化与去泛素化酶的化学探针及其应用，为认识并发展泛素特异的化学探针提供了基础；刘明秋等建立了一种联合Nanoluc技术和荧光分析的PROTAC筛选策略，为PROTAC的开发应用提供新的技术策略。
以上论文选题和内容属于当前泛素化修饰研究领域的前沿进展，希望这些作者的专业视野或研究结果能够为深入理解和认识泛素化修饰在疾病发生发展中的作用和精准靶向提供新的思路和有益参考。]]> 2023/4/26 16:15:53 14true 2023/4/26 0:00:00 13true 2023/4/26 0:00:00 12true 2023/4/26 0:00:00 11true Mycobacterium tuberculosis，Mtb）的持留性和致病性直接相关，因此PPS中的PafA、Dop和蛋白酶体均是抗结核药物开发的新靶点，筛选针对PPS的小分子抑制剂将成为新型抗结核药物研发的一个新途径。此外，PafA催化的蛋白质Pup化被应用于生物技术的研发，形成了一种新的邻近标记技术——基于Pup化的邻近标记技术（pupylation-based interaction tagging，PUP-IT），应用于蛋白质相互作用的研究。本文综述了Pup-蛋白酶体系统的作用机制及其生物学功能研究的进展，并探讨了该系统在抗结核药物和生物技术研发中的应用前景。]]> 2023/4/26 0:00:00 10true 2023/4/26 0:00:00 9true 目的 验证RabGEFl（Rab guanine nucleotide exchange factor 1）为线性泛素化修饰的新底物。方法 在pEF6/Myc-His C载体中克隆人RabGEF1基因。通过免疫共沉淀（Co-IP）实验验证RabGEFl和HOIP的相互作用。利用GST-pulldown实验探索RabGEFl与HOIP相互作用结构域。通过免疫荧光实验验证RabGEFl和HOIP的相互作用与亚细胞定位。应用体内泛素化实验检测RabGEF1的线性泛素化修饰。通过NTA-His泛素化实验进一步明确RabGEF1能够发生线性泛素化修饰。将RabGEF1的泛素化蛋白质样品进行质谱分析，根据质谱结果提示的RabGEF1泛素化位点构建赖氨酸位点突变质粒，进一步在体内泛素化实验中验证RabGEF1的线性泛素化修饰位点。结果 RabGEF1与HOIP存在相互作用，且HOIP通过ZF-NEF结构域与RabGEF1发生直接相互作用。RabGEF1与HOIP共同定位于细胞质。LUBAC介导RabGEF1发生线性泛素化修饰依赖于LUBAC酶活性，RabGEF1泛素化修饰位点为K158。结论 RabGEFl为线性泛素化修饰的新底物，且K158是其发生线性泛素化修饰的位点。]]> 2023/4/26 0:00:00 8true 目的 探究生理条件下去泛素化酶USP10调控的关键信号通路及分子机制。方法 利用GEO2R和Metascape对Usp10^+/+和Usp10^-/-新生小鼠肾组织基因芯片（GSE198574）差异表达基因和通路富集分析，使用免疫印迹实验和免疫组化技术检验核心转录因子的表达情况；进一步利用免疫印迹检测该信号通路，并通过基因芯片和免疫组化分析候选分子的表达情况；使用免疫共沉淀（Co-IP）和GST-pull down实验验证USP10与候选分子的相互作用，通过泛素化实验明确USP10对底物分子的调控机制；利用免疫印迹检测细胞增殖、凋亡相关蛋白p21、Cleaved-caspase 3的表达情况，使用CCK-8和克隆形成实验分析USP10对细胞增殖的影响。结果 Usp10^-/-新生小鼠肾组织中TGF-β/BMP通路激活，USP10在小鼠体内缺失后导致Smad泛素相关因子1（Smurf1）蛋白质水平降低，Smad1/5蛋白质水平上调，却不影响它们的转录水平；机制上，USP10与Smurf1存在相互作用，并依赖其去泛素化酶活性去除Smurf1多聚泛素化。Usp10敲除后促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达上调，并抑制细胞的增殖能力。结论 USP10通过去泛素化并稳定Smurf1，抑制TGF-β/BMP信号通路，从而维持小鼠组织器官和细胞增殖稳态。]]> 2023/4/26 0:00:00 7true 2023/4/26 0:00:00 6true 2023/4/26 0:00:00 5true 2023/4/26 0:00:00 4true 2023/4/26 0:00:00 3true 2023/4/26 0:00:00 2true 目的 为了从一系列旨在降解靶蛋白的化合物中筛选出高效的蛋白质水解靶向嵌合体（PROTAC），本文建立了一个稳定的高通量PROTAC筛选方法。方法 Nanoluc荧光素酶有LgBiT和HiBiT两个亚基组成，通过将HiBiT标签与mCherry（红色荧光蛋白）、目的蛋白、Halo标签融合表达，LgBiT与GFP（绿色荧光蛋白）融合表达，利用GFP与mCherry的共定位情况可直观评价Nanoluc荧光素酶的组装情况，而通过监测Nanoluc的活性可以指示目的蛋白的含量。利用慢病毒包装系统构建稳定过表达GFP-LgBiT和HiBiT-mCherry-Target-Halo的细胞系，使用可募集Halo标签融合蛋白被Cul2-Rbx1-EloBC-VHL复合体降解的HaloPROTAC3诱导HiBiT-mCherry-Target-Halo降解，进一步利用蛋白质免疫印迹（Western blot）、Nanoluc荧光素酶活性分析系统和流式细胞术分别评价HaloPROTAC3诱导底物降解的效率。结果 HaloPROTAC3高效降解HiBiT-mCherry-Target-Halo，并呈现浓度和时间依赖性。结论 本文建立了一种联合Nanoluc技术和荧光分析的PROTAC筛选策略，用HaloPROTAC3作为阳性对照，可以快速评价PROTAC分子使底物蛋白被降解的效率，实现对PROTAC的“优化选择”或者“优中选优”，为最终PROTAC的开发应用提供保障。]]> 2023/4/26 0:00:00 1true