2022/11/22 0:00:00 20true 2022/11/22 0:00:00 19true EIF2B 1~5分别编码真核细胞蛋白质翻译起始因子2B（eukaryotic initiation factor 2B，eIF2B）的5个亚基α~ε，其中任一编码基因突变均可引起发病。起病多见于婴幼儿及儿童期，临床表型差异大，典型表现为进行性运动功能退行，可伴共济失调和癫痫。应激（发热、外伤等）可导致发作性加重。影像学显示大脑白质进行性液化。尸解神经病理学特征主要表现为广泛性白质稀疏和囊性变性，无神经胶质细胞反应性增生，星形胶质细胞形态异常，过表达祖细胞标志物巢蛋白（Nestin）和胶质纤维酸性蛋白δ（GFAPδ），少突前体细胞数量增加和成熟少突胶质细胞减少、泡沫化且凋亡增加。VWM致病基因EIF2B 1~5是管家基因，但多数患者通常仅脑白质受累。少数胎儿期及婴儿早期发病的患者可出现多系统受累，成年女性患者可有卵巢功能障碍。目前认为，星形胶质细胞在其致病机制中起着核心作用，病理性星形胶质细胞继发性引起少突胶质细胞成熟障碍和髓鞘形成异常，进而导致脑白质病变。其他疾病机制包括内质网应激后未折叠蛋白反应（UPR）过度激活、线粒体功能障碍、自噬抑制等，尚不完全明确。]]> 2022/11/22 0:00:00 18true 2022/11/22 0:00:00 17true PLP1点突变通过影响PLP1/DM20寡聚体的形成，进而影响少突胶质细胞的存活，髓鞘分子结构的形成等；而PLP1重复突变则使少突胶质细胞及髓鞘脂的发育停止。近年来对细胞器互作网络（organelle interaction network，OIN）的研究进一步揭示了PLP1突变的致病机制：PLP1点突变通过影响PLP1蛋白上膜进而影响少突胶质细胞髓鞘化。PLP1重复突变则改变内质网线粒体间的连接，继而影响线粒体的形态功能等产生致病作用。目前已有相关研究表明，一些小分子化合物或药物例如胆固醇、吡拉西坦等以及基因疗法在动物体内对PMD临床症状有改善作用，其在PMD 患者体内的疗效有待进一步证实。]]> 2022/11/22 0:00:00 16true 2022/11/22 0:00:00 15true MLC1或GlialCAM突变导致的星形胶质细胞功能障碍的中枢神经系统髓鞘变性疾病，以星形胶质细胞肿胀与髓鞘囊泡形成为特征性病理改变。MLC/GlialCAM与ClC-2共定位于星形胶质细胞终足处，既往研究发现MLC1/GlialCAM突变后影响ClC-2通道的电容传导性，导致星形胶质细胞的水离子稳态失衡参与MLC的发病，但在GlialCAM纯合敲除的小鼠中，通过与选择性开放Clc-2通道的转基因小鼠杂交并不能纠正小鼠表型，提示有其他因素共同参与了MLC的发生发展。最近研究表明，突变后的MLC1通过促进Connexin43的内化，减少其在细胞膜处形成缝隙连接，影响细胞间通讯效率，从而导致水肿形成和髓鞘囊泡形成，进一步导致MLC的发生。这些研究提示，少突胶质细胞、星形胶质细胞及缝隙连接蛋白等构成的胶质细胞合胞体的功能异常是MLC致病机制的研究方向。]]> 2022/11/22 0:00:00 14true 2022/11/22 0:00:00 13true TMEM63A于2019年与髓鞘形成低下性脑白质营养不良19型（hypomyelinating leukodystrophy 19，HLD19）相关联，确定为HLD19的致病基因。髓鞘是神经系统中由少突胶质细胞形成的兼具营养轴突和加速动作电位传导的结构，髓鞘形成障碍可表现为髓鞘形成低下、髓鞘囊性化和髓鞘变性。髓鞘中脂质含量丰富，不同脂质参与髓鞘形成、修复和胶质细胞与轴突识别等重要过程。TMEM63A变异导致的HLD19为髓鞘形成低下性疾病。TMEM63A变异可引起渗透压改变，细胞上TMEM63A跨膜蛋白受机械刺激产生电流，从而影响少突胶质细胞分化、成熟，导致髓鞘形成异常；同时，TMEM63A变异也可引起细胞膜脂质的分布异常，影响脂质正常功能，异常的脂质通过参与不同的髓鞘形成环节最终导致了髓鞘形成障碍。]]> 2022/11/22 0:00:00 12true 2022/11/22 0:00:00 11true 2022/11/22 0:00:00 10true 2022/11/22 0:00:00 9true 目的 检测在星形胶质细胞瘤中一氧化氮（nitric oxide，NO）的表达及促进炎性水肿带相关肿瘤微环境的作用。方法 收集27例星形胶质细胞瘤患者的临床资料和肿瘤标本（WHO II级10例、II-III级7例、IV级10例），磁共振成像确认水肿带及手术取材部位；格里斯试剂比色法检测亚硝酸盐含量；质谱分析不同级别星形胶质细胞瘤（不同级别各5例）水肿带炎性分子含量；通过ClusterProfiler包以及Proteomaps和Metascape网页工具进行富集分析预测肿瘤分泌的NO与微环境中互作的蛋白质。结果 星形胶质细胞瘤组织及水肿带中存在NO，胶质瘤组织中的NO高于水肿带中的NO。在WHO II-III级和WHO IV级胶质瘤的水肿带中，有大量超氧化物歧化酶、细胞色素C氧化酶、热休克蛋白、CD44抗原，白介素-8、白介素-24、凝溶胶蛋白、应激诱导磷酸蛋白1、丝裂原活化蛋白激酶、硫氧还蛋白过氧化物酶、S100蛋白等炎症相关蛋白质的表达。信号通路分析提示，与II-III级别星形胶质细胞瘤相比，Ⅳ级胶质母细胞瘤水肿带中的基因更多地参与无氧代谢，如糖酵解。更重要的是，这些目标基因显著参与多种氧化还原反应，如氧化还原酶活性和过氧化物酶活性。其中，诱导性一氧化氮合酶（inducible NOS，iNOS）、NO、过氧亚硝酸阴离子（ONOO^-）、铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn superoxide dismutase，SOD-1）在氧化还原反应中发挥重要作用。结论 星形胶质细胞瘤周围水肿带的形成是炎症反应的结果，胶质瘤细胞通过分泌NO调控SOD-1等炎性分子促进侵袭性炎性肿瘤微环境的形成。]]> 2022/11/22 0:00:00 8true 目的 脑胶质瘤是最常见的恶性原发性中枢神经系统肿瘤，近年来分子病理的快速发展对胶质瘤诊断及分级带来了重要影响，在2021年发布的《世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分类指南》（第五版）引入了更多分子指标对肿瘤的诊断和分级进行指导。本研究旨在临床队列中比较最新版指南和上一版指南对肿瘤诊断及预后评估的影响，以期为临床实践活动中新版指南的应用提供数据参考和依据。方法 回顾性纳入了癌症基因组图谱数据库512例胶质瘤样本，分别依据2016版和2021版《世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分类指南》进行诊断、通过Kaplan-Meier进行生存曲线绘制和中位总生存期计算和生存差异分析。结果 对512例样本分别完成了上一版指南和最新版指南的诊断及分级。在新版指南下分别有53和72例异柠檬酸脱氢酶（IDH）突变型和IDH野生型的胶质瘤诊断级别升级为了4级，且这些诊断级别升高的胶质瘤的预后更差。结论 最新版指南较上一版指南可对胶质瘤进行更为精准地分类及分级，在有条件的情况下应尽快依据最新版指南开展诊断及分级。]]> 2022/11/22 0:00:00 7true 目的 探讨白质消融性脑病的临床及影像学特点。方法 回顾分析一例白质消融性白质脑病患儿家系的临床资料，并复习相关文献。结果 先证者1，女，4岁10个月，因步态异常起病。头颅磁共振成像（MRI）示白质异常，且弥漫对称。基因检测发现患儿EIF2B4基因存在2个错义突变，均位于外显子13，分别为C. 1544 T→A（p.Leu515Gln）和C. 1445 G→T （p.Arg 482Leu）杂合变异，国内外均未报道，为新发现的基因变异。结合国外临床诊断标准及基因分析结果确诊为白质消融性白质脑病。另一患儿为其同卵妹妹，与其发病时间、发病表现、头颅MRI及基因检测结果均大致相同，但随访1年发现先证者1退步更快。结论 发现2个新的EIF2B4基因错义突变，基因分析有助明确诊断白质消融性白质脑病。]]> 2022/11/22 0:00:00 6true 目的 探讨TMEM163变异导致髓鞘形成低下性脑白质营养不良（HLD）患者的临床特征及遗传学特点，归纳自然病程，以提高对该疾病认识，并构建患者来源诱导多能干细胞，为致病机制研究建立基础。方法 随访2009~2022年北京大学第一医院儿科就诊的2例TMEM163变异致病患儿，对临床表现、遗传学数据、蛋白质结构数据进行分析，总结临床遗传学特点，并采集患儿外周血构建诱导多能干细胞。结果 临床特点：2例患儿均具有早期运动语言发育迟缓、头颅磁共振成像显示脑白质髓鞘化不良，且症状随生长发育逐渐减轻的特点；均于婴儿期起病，以眼球震颤为首发症状，学龄期症状好转。遗传学特点：2例患儿均为TMEM163同一位点新发错义变异c.227T>G p.（L76R）、c.227T>C p.（L76P），均为国际上首例报道。病例2来源外周血单个核细胞成功重编程为诱导多能干细胞。结论 本研究为国际首次随访TMEM163变异致病髓鞘形成低下性脑白质营养不良患儿，完善了其自然病程，扩展了对髓鞘形成低下性脑白质营养不良临床表型认识，并首次构建了TMEM163 c.227T>C p.（L76P）变异患者来源诱导多能干细胞，为进一步致病机制研究打下基础。]]> 2022/11/22 0:00:00 5true 目的 探究组织蛋白酶B（CTSB）介导NLRP3小体在砷致小胶质细胞（BV-2）炎症激活中的作用。方法 取处于对数生长期的BV-2细胞，分别暴露于终浓度为0、2、4、8 μmol/L亚砷酸钠（NaAsO₂）溶液培养24 h，检测细胞活性，测定各组细胞内CTSB和细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达水平。流式细胞仪检测胞内溶酶体膜稳定性。基于实验结果，增设CTSB抑制剂组（5 μmol/L CA074-Me +8 μmol/L NaAsO₂、10 μmol/L CA074-Me+8 μmol/L NaAsO₂），检测两组细胞内炎症相关蛋白NLRP3、Caspase-1和IL-1β、IL-18的表达水平。结果 与对照组比较，各染砷组细胞抑制率增高，呈现剂量效应关系，溶酶体膜稳定性下降，差异有统计学意义（P<0.01），胞内CTSB、NLRP3、IL-1β、IL-18、Caspase-1表达增高，差异有统计学意义（P<0.01）；与对照组（8 μmol/L NaAsO₂）比较，抑制剂组BV-2细胞胞内CTSB、NLRP3、IL-1β、IL-18、Caspase-1水平均降低，差异有统计学差异（P<0.01）。结论 NaAsO₂通过诱导小胶质细胞内CTSB水平的上升，介导NLRP3炎症小体激活小胶质细胞，促其释放炎性因子，致神经系统损伤。]]> 2022/11/22 0:00:00 4true 目的 脑红蛋白（neuroglobin，Ngb）又称神经球蛋白，是一种携氧球蛋白。有研究证明Ngb在脑缺血缺氧疾病中具有神经保护作用，对氧具有高亲和力，有助于预防缺氧缺血性脑损伤，并影响急性缺血性卒中（acute ischemic stroke，AIS）的预后。本研究观察了AIS后血清Ngb水平的变化，并评估了Ngb与卒中严重程度及预后的关系。方法 前瞻性地募集AIS患者和健康对照者进行研究。在AIS患者起病后不同时间点（脑梗死发病后72 h内和第14天）及对照组中分别检测血清Ngb水平，并比较AIS患者与对照组之间的血清Ngb水平。对合并与不合并糖尿病的AIS患者的血清Ngb水平进行比较。分析患者血清Ngb水平与梗死体积及国家卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分之间的相关性。应用受试者操作特征（ROC）曲线评估Ngb对AIS预后的预测价值。结果 AIS患者的血清Ngb水平在脑梗死后72 h内和第14天时分别为105.7（88.3，123.1）μg/L和72.8（58.7，86.9）μg/L。对照组血清Ngb水平为58.2（35.0，81.6）μg/L。AIS发病后72 h内血清Ngb水平较对照组显著升高（P<0.05）。合并与不合并糖尿病的AIS患者血清Ngb水平在发病后72 h内及第14天均无显著差异（P>0.05）。AIS发病72 h内的血清Ngb水平与NIHSS评分显著相关（Spearman相关系数=0.232，P=0.038）。在各时间点，大体积脑梗死组患者血清Ngb水平与中小体积脑梗死组相比无显著性差异（P>0.05）。ROC曲线分析表明，血清Ngb水平对AIS患者的预后具有良好的预测能力。结论 AIS发病后72 h内血清Ngb水平升高。合并与不合并糖尿病的AIS患者血清Ngb水平无显著差异。发病后72 h内的血清Ngb水平与NIHSS评分显著相关。Ngb可能作为卒中严重程度和预后的预测因子。]]> 2022/11/22 0:00:00 3true 目的 探讨白质消融性白质脑病中胶质细胞选择性受累而神经元受累轻微的原因。方法 将EIF2B5-RNAi表达载体转染至人星形胶质细胞和人神经元，检测基础状态下及内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）后细胞凋亡和活力，检测参与ERS调控的已知和未知miRNA，筛选EIF2B5-RNAi人星形胶质细胞在ERS后miRNA变化。结果 与EIF2B5-RNAi人神经元相比，星形胶质细胞自发凋亡及细胞活力下降。较之神经元，更多miRNA参与星形胶质细胞ERS刺激后的调控，EIF2B5-RNAi组参与调控的miRNA数目显著减少。聚类分析发现，5条已知miRNA是通路连接的关键组分。结论 人星形胶质细胞在ERS后可能更加依赖众多促细胞增殖分化的miRNA修复，而EIF2B5-RNAi人星形胶质细胞存在自发凋亡，ERS后严重减少的miRNA可能导致细胞无法存活。]]> 2022/11/22 0:00:00 2true 目的 艾灸是一种经典的中医治疗手段，集合了物理疗法（热疗）和化学疗法，目前已经证明对多种癌症有抑制作用，但是具体的细胞生物学机制尚不明确。本研究旨在研究热疗对星形胶质细胞癌细胞系U251的作用，来揭示艾灸通过热疗对癌细胞的作用。方法 通过显微缩时摄影技术，记录了42℃热疗处理U251细胞系108 h中细胞形态的变化，并用细胞计数法检测了热疗3 d时全细胞数、活细胞数及活细胞比例的变化，来评价热疗对细胞增殖和死亡的影响。通过检测细胞凋亡标志物Annexin V和Caspase-3，来评价热疗对细胞凋亡的作用。结果 热疗明显抑制细胞的增殖，细胞死亡明显增加。热疗处理后的U251细胞较对照组存在明显的核固缩，标志物Annexin V和PI明显升高，PI阳性细胞呈Annexin V阳性，提示热疗导致的细胞死亡以细胞凋亡为主，PI阳性的细胞为凋亡终末期，细胞膜通透性增加所致。同时大部分收缩变圆的细胞中，Caspase-3和Annexin V呈共同阳性，提示热疗可能通过Caspase途径介导细胞凋亡。结论 本研究明确了热疗可以抑制星形胶质细胞癌U251细胞系的细胞增殖并诱导Caspase途径相关的凋亡。]]> 2022/11/22 0:00:00 1true