249true 248true 247true 246true 245true 244true 243true 242true 241true 240true 239true 238true 237true 236true 235true 234true 233true 232true 231true 230true 229true 228true 227true 226true 225true 224true 223true 222true 221true 220true 219true 218true 217true 216true 215true 214true 213true 212true 211true 210true 209true 208true 207true 206true 205true 204true 203true 202true 201true 200true 199true 198true 197true 196true 195true 194true 193true 192true 191true 190true 189true 188true 187true 186true 185true 184true 183true 182true 181true 180true 179true 178true 177true 176true 175true 174true 173true 172true 171true 170true 169true 168true 167true 166true 165true 164true 163true 162true 161true 160true 159true 158true 157true 156true 155true 154true 153true 152true 151true 150true 149true 148true 147true 146true 145true 144true 143true 142true 141true 140true 139true 138true 137true 136true 135true 134true 133true 132true 131true 130true 129true 128true 127true 126true 125true 124true 123true 122true 121true 120true 12为自旋探针,用ESR自旋标记法测量了不同表面pH时酰化前后紫膜表面负电荷密度,以酰化所屏蔽的表面电荷数为标准,计算了表面pH4-11时单位菌紫质紫膜两侧的总负电荷数.结果表明:表面pH5-9时为9,表面pH≥10及表面pH < 5时增大.结果有力支持了膜表面5个二价阳离子结合位点的模型.]]> 119true 118true 117true 116true 115true 114true 113true 2和Ca^2＋相互作用的研究表明,Ca^2＋在BPLA₂中十分重要.在Ca^2＋存在时,底物与BPLA₂的结合使酶中色氨酸残基周围的环境变得较为疏水,荧光发射谱蓝移达9nm,而无Ca^2＋存在时却无此现象发生;实验证明BPLA₂分子中有一较强的疏水区,Ca^2＋可明显增强这一区域的疏水性;另外,我们还发现Ca^2＋与酶的结合与酶中唯一的His残基有关.]]> 112true E.coli中表达并纯化了重组GDNF.]]> 111true 110true 109true 108true 125I-EGF可与表达菌特异性结合，其特异性结合量随反应的时间和温度而变化，Scatchard分析显示表达菌表达单一亲和性受体，其解离常数为3.0×10^-11 mol/L，每个细菌约有738个结合位点.免疫电镜显示EGF-RⅢ多分布于细菌菌膜上.]]> 107true 4噬斑中筛选到一个与探针呈特异结合的噬斑，说明大肠杆菌基因组中确有Era亲和蛋白基因存在.将该噬菌体中插段DNA前800 bp的测序结果与1996年底完成的大肠杆菌基因组全序列作同源性比较，发现该插段序列位于大肠杆菌基因组的第267 section.]]> 106true 105true 2O₂、胍基抑制或蛋白酶降解的实验结果表明，这两种酶的活性中心处于酶蛋白的不同部位.]]> 104true 103true 102true 101true 100true 99true 1-酸性糖蛋白(α₁-AGP)分析结果与早期文献值相比, 存在一定差异, 并发现该糖蛋白中除含有5-N-乙酰氨基唾液酸(Neu5Ac)外, 还含数量与Neu5Ac相当的5-N-乙醇酰氨基唾液酸(Neu5Gc).]]> 98true 97true P＜0.01）；BRD7基因有两种翻译方式，G133Ter可以导致另一种截断的翻译本（truncated isoform）.]]> 96true 95true 94true 93true 92true 91true 90true 1-ATP酶（基因突变质粒，α-C193S, γ-S107C，β亚基带有10个组氨酸标记（His-Tag），转入到菌株大肠杆菌JM103）的菌株中筛选出一高表达菌株.该菌株表达的F₁-ATP酶经纯化后其水解活性明显高于文献值. 从单分子水平上进行观察，发现在水解ATP过程中，γ亚基上连接的荧光标记蛋白微丝，其旋转速度要比文献中同样条件下快约一倍.]]> 89true 88true P＜0.05），1 292处突变与鸡的活体胫色性状显著相关（P＜0.05），1 377处突变与鸡的肉色性状显著相关（P＜0.05）.研究表明，MC1R基因可能是鸡黑色素性状的主效基因或者与鸡控制黑色素性状的主效基因连锁.]]> 87true 86true 85true 84true 2+ 激活的 K⁺ 通道 (BK 通道 ) 在哺乳动物的组织中广泛表达，起着多种多样的作用 . 目前只有少数组织中 BK 通道的性质被深入地研究，而且鲜见有失活的 BK 通道 (BK_i) 的报道，尤其是在神经元中 . 发现在大鼠小直径的背根神经节 (DRG) 神经元中，普遍存在失活的 BK 通道 . 失活的 BK 电流成分是 Ca²⁺敏感的，可以被大电导的 BK 通道特异阻断剂 ChTX 所阻断，而且木瓜蛋白酶可以从胞外改变通道失活的特性 .]]> 83true P<0.01). 免疫组化与肿 瘤病理形态学分析显示， AQP1 在野生型小鼠黑色素瘤血管内皮细胞上高表达，而在 AQP1 敲除小鼠黑色素瘤血管内皮细胞呈阴性表达. 在病理结构上，黑色素瘤细胞围绕血管分支呈岛状分布. 野生型小鼠黑色素瘤内血管管腔较细小，而 AQP1(－/－)小鼠黑色素瘤内血管床显著膨大. AQP1(－/－)小鼠肿瘤内平均微血管密度 (47/mm²) 较之 AQP1(＋/＋) 肿瘤 (142/mm²) 减少 67％ (P<0.01). 围绕 AQP1(－/－) 肿瘤血管的肿瘤细胞岛周边坏死区域明显大于 AQP1(＋/＋)肿瘤. 上述结果提出确切证据表明， AQP1 缺失使肿瘤血管生成发生障碍，从而影响了肿瘤血液供应和肿瘤生长. AQP1参与肿瘤血管生成的机理值得深入研究.]]> 82true 81true Streptococcus mutans) 是最主要的龋齿致病菌，其基因 Smu.260 编码一个约 23 ku (200 个氨基酸 ) 的蛋白质. Smu.260的 DNA 片段被克隆到表达载体 pET28a 后在大肠杆菌 BL21(DE3) 菌株中表达得到很好的产量. 产物 Smu.260 蛋白通过 Ni²⁺亲和柱和分子筛两步法纯化，并发现纯化后的蛋白以两种形式存在，二聚体 (约46 ku) 和四聚体，前者呈亮黄色，后者无色. 采用悬滴气象扩散法得到了二聚体形式的晶体. 晶体的 X 射线衍射分辨率达到 2.3埃，晶体属正交空间群 P2₁2₁2₁，晶格参数为a=89.88埃, b=90.91埃, c=105.17埃. 晶胞不对称单元内估计含有一个二聚体，溶剂含量为 53％ .]]> 80true 79true 78true 2006/7/17 0:00:00 77true 2006/7/17 0:00:00 76true 2006/6/14 0:00:00 75true 2006/10/18 0:00:00 74true +通道是心肌的特异性Na⁺通道，虽然研究发现神经元中也存在河豚毒-抵抗性Na⁺电流及Nav1.5/SCN5A mRNA的表达，但其确切的cDNA序列尚不清楚. 采用RT-PCR法对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA进行克隆发现：人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA有2种变构体，hB1和hB2 (accession number EF629346，EF629347)，其中hB1全长6 201个碱基，其开放读码框架(ORF)参与编码2 016个氨基酸，和人心肌Nav1.5 Na⁺通道氨基酸序列相同率高达98%，共有28个不同的氨基酸，其中7个集中位于第6A外显子与第6外显子编码区. 与人心肌Nav1.5/SCN5A基因cDNA不同的是，在对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA的克隆中未发现该基因第18外显子的选择性剪接，但却发现其第24外显子的选择性剪接，2种选择性剪接体 (hB1和hB2) 在脑组织中基本同时表达，表达比率接近 1∶1，但在心脏中二者的表达比率却与年龄有关. 人Nav1.5/SCN5A基因的第24外显子定位于染色体3P21区，共有54个碱基，参与编码18个氨基酸. RT-PCR法证实第24外显子的选择性剪接也可发生在大鼠心脑之外的其他组织中，竞争性PCR法证明，不同组织中2种选择性剪接体的表达比率不同，且随着周龄的增加，2种选择性剪接体在各组织中表达的变化趋势不同. 此外，RT-PCR法还发现Wistar大鼠全身16种组织中均可检测到Nav1.5/SCN5AmRNA的表达. 上述实验结果说明，Nav1.5 Na⁺通道在全身组织中分布广泛，但编码人脑组织Nav1.5 Na⁺通道与心肌组织该离子通道的cDNA序列不同，是Nav1.5/SCN5A基因的2种变构体，这为深入研究不同组织中Nav1.5 Na⁺通道的功能提供了基础.]]> 2007/9/17 0:00:00 73true 2007/8/13 0:00:00 72true F5C3和RNA2^C3F5) 的寄主侵染活性测定表明：2b基因或RNA2 3′端非编码序列决定CMV-CB7在心叶烟坏死症状. RNA印迹分析结果显示：CMV-CB7和CMV-Fny^F5C3引起寄主坏死与基因组RNA积累没有直接关系.]]> 2007/7/2 0:00:00 71true 2007/5/30 0:00:00 70true 2007/5/22 0:00:00 69true 2007/4/17 0:00:00 68true 2007/2/28 0:00:00 67true vs (0.633 ±0.053)，P＜0.01). 侵袭小室试验发现，Hs578T/Dox+cav-1侵袭转移能力增强，培养6 h迁徙进入微孔膜的细胞数比Hs578T/Dox+vector细胞株明显增多 ((107.8 ± 10.9) vs (80.8 ± 8.07)，P＜0.01)，侵袭破坏matrigel基质蛋白胶进入膜内的细胞数也明显增多 ((68.8 ± 9.88) vs (25.6 ± 5.41)，P＜0.01). 悬浮培养的Hs578T/Dox+cav-1细胞比Hs578T/Dox+vector细胞更容易聚集，形成相对较致密的细胞团块，24 h检测流式细胞凋亡指数下降 ((8.79 ± 1.54)% vs (16.42 ± 1.42)%，P＜0.01). 这表明其具有更强的抗失巢凋亡和继续生存的能力，为循环转移的肿瘤细胞定植前取了更多时间. Hs578T/Dox+vector细胞在裸鼠皮下种植成瘤试验中不能成瘤，而Hs578T/Dox+cav-1细胞接种15只裸鼠，全部形成肿瘤，平均直径 (0.8 ± 0.45) cm. 发现一只成瘤裸鼠双肺可见瘤样肿块转移. HE病理组织染色见肿瘤细胞弥漫性分布，细胞核异型性明显. 上述结果表明，caveolin-1对Hs578T耐药肿瘤细胞侵袭、转移和成瘤性具有明显的促进作用.]]> 2007/1/15 0:00:00 66true 2007/10/22 0:00:00 65true 2008/8/1 0:00:00 64true 2008/6/16 0:00:00 63true INK4a、PTEN/p27^Kip1和p53/p21^Waf1的表达变化，结果发现ING1a、ING1b、ING1c和1a△C均可促进p16^INK4a的表达，其中ING1c的促进作用最为显著，1b△C则略微抑制了p16^INK4a的蛋白质表达．利用荧光素酶分析初步确定1a△C可增强p16^INK4a启动子活性而促进p16^INK4a的转录，1b△C则抑制了p16^INK4a启动子活性．上述结果阐释了ING1家族各成员对HeLa细胞增殖的影响及其分子机制，从而确定了各异构体功能的异同及它们所调控的重要基因．首次发现除p53/p21^Waf1通路外，ING1家族各异构体还可通过上调p16^INK4a和PTEN 的表达而抑制肿瘤细胞生长，并且ING1a的PHD结构域删除体可以增强p16^INK4a的转录，这为研究ING1家族抑制肿瘤细胞生长的分子机制提供了新的线索．]]> 2008/5/23 0:00:00 62true 18F-脱氧葡萄糖(FDG)正电子断层扫描(PET)技术观察臂丛神经撕脱后慢性疼痛患者的脑葡萄糖代谢．选择左侧臂丛神经撕脱伤后慢性疼痛行脊髓后根入髓区(DREZ)切开术后疼痛减轻 > 75%的患者，共5例，分别在术前和术后14天行PET扫描采集数据，同时行视觉模拟评分(VAS)，汉密尔顿(Hamilton)抑郁和焦虑评分．用统计参数图(SPM2)软件分析数据．与术前疼痛状态下相比，术后葡萄糖代谢明显减低的脑区有双侧尾状核，眶额回 (OFC) (BA11)，对侧扣带下回 (BA25) 和同侧前额叶背外侧区域 (DLPFC) (BA46/47)．葡萄糖代谢明显增高的脑区有对侧丘脑，枕核和同侧顶叶(BA7)．研究结果提示，涉及情绪、注意和疼痛内在调节的脑区在臂丛神经撕脱伤后慢性疼痛的调制中发挥重要作用．]]> 2008/4/17 0:00:00 61true 2008/4/17 0:00:00 60true 2008/2/18 0:00:00 59true 2007/12/19 0:00:00 58true 2009/5/25 0:00:00 57true 2009/4/2 0:00:00 56true sec-10的缺陷型线虫．药学结果显示这种线虫神经信号传递存在缺陷，可是电生理的方法证明在神经肌肉接头处的已报道离子型受体和野生型相比并未发生改变．因此猜测，sec-10并未直接影响神经肌肉接头处的离子型受体，而是通过其他途径来行使功能．]]> 2009/4/17 0:00:00 55true 2009/9/1 0:00:00 54true 2009/9/1 0:00:00 53true Tol2转座子介导的大规模增强子诱捕筛选到26个血管特异表达绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的转基因斑马鱼系，其中有一些品系在胚胎的某些特异血管结构中表达绿色荧光．通过linker-mediated PCR克隆到22个鱼系中Tol2插入位点附近的斑马鱼基因组序列，其中有17个鱼系的Tol2插入可定位到现有的斑马鱼基因组中的单一位点．通过整体胚胎原位杂交对插入位点附近的基因进行表达谱分析，得到8个表达谱与转基因鱼系一致的基因，涵盖了9个鱼系，其中dusp5基因对应于2个不同的鱼系．这8个基因中包括hhex、ets1a和dusp5等3个功能已知的基因，但是大部分(5个)基因在斑马鱼中尚无功能研究，分别为zvsg1、micall2a、arl8b (1 of 2)、zgc:73355以及hecw2 (1 of 2)．hhex和ets1a基因对血管与血细胞前体的发育具有重要作用，所获得的EGFP报告基因受hhex或ets1a基因增强子控制的转基因斑马鱼(mp378b和mp430c-2)为国际首例，为深入研究这两个基因在血管与血液发育中的作用机制提供了新的机遇．筛选到的功能未知基因可以用来进一步研究其在血管发育中的功能；同时，利用所获得的转基因鱼系，可以实现实时、动态观察成血管细胞的起源、分化与基因表达调控，并可用于高通量小分子药物筛选等重要研究．]]> 2010/7/21 0:00:00 52true +和CD49f⁺双阳性的乳腺原基细胞包含两个细胞群：CD24^hiCD49f⁺细胞群和CD24^medCD49f⁺细胞群．它们占乳腺原基总细胞的比例分别为16%和47%．在随后的细胞培养实验和体内移植再生实验中发现，CD24^medCD49f⁺细胞群可以贴壁，而且具有再生乳腺导管的能力，相反，CD24^hiCD49f⁺细胞群既不能贴壁也不具有移植再生能力．这些结果表明，这两个细胞群分别代表不同的细胞类型，而CD24^medCD49f⁺细胞群有可能包含具有自我更新能力的乳腺原基干/祖细胞．挑选了可能与乳腺相关的19个黏附分子，并对这两群细胞进行了定量PCR检测．结果表明，具有乳腺导管重建能力的CD24^medCD49f⁺细胞群的黏附分子基因表达明显区别于CD24^hiCD49f⁺细胞群，而且其中几个与成体干细胞相关的标记基因在CD24^medCD49f⁺细胞群中的表达显著高于CD24^hiCD49f⁺细胞群．]]> 2010/4/28 0:00:00 51true 2010/10/26 0:00:00 50true 2011/6/17 0:00:00 49true 2011/5/20 0:00:00 48true Eisenia fetida protease Ⅰ，EfP-Ⅰ)的底物专一性，提出了“诱导契合-锁钥”反应模式．然而，采用EfP-Ⅰ建立的模式是否具有普遍的酶学意义需要进一步论证．以蚯蚓蛋白酶Ⅱ(Eisenia fetida protease Ⅱ，EfP-Ⅱ)、枯草杆菌蛋白酶(subtilisin，Sub)以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)为材料，分别研究了底物反应后酶与其他底物的相互作用．结果显示，经过凝血酶底物chromozym TH(CTH)反应后，蚯蚓蛋白酶Ⅱ和枯草杆菌蛋白酶与尿激酶底物(chromozym U，CU)的反应活性显著降低(P < 0.05)，表现出符合“诱导契合-锁钥”反应的模式．蚯蚓蛋白酶Ⅱ和枯草杆菌蛋白酶先与CU反应后，却仍能与CTH反应，但后续不能与CU发生反应，仍然表现为“诱导契合-锁钥”模式．另外，丙酮酸反应后的LDH，对乳酸的反应活力显著降低(P < 0.05)，而乳酸反应后的LDH对丙酮酸的活性却无显著变化．这可能是丙酮酸诱导的LDH构象具有相对的刚性，而乳酸诱导的酶构象具有相对柔性所致．]]> 2011/4/13 0:00:00 47true +CPCs向心脏肌钙蛋白T(cTNT)阳性心肌细胞和平滑肌肌球蛋白重链11(MYH11)阳性血管平滑肌细胞分化的潜能．心脏是一个由多种肌肉和非肌肉组织细胞构成的复杂器官．推测Tbx18可能在心脏祖细胞向肌源性细胞分化的信号通路中起重要调节作用．在上述研究中应用基因谱系示踪技术，验证Tbx18可作为一类CPCs的标志，为更深入揭示心脏祖细胞向心系细胞的分化潜能打下基础．]]> 2011/1/13 0:00:00 46true 2011/12/21 0:00:00 45true Pseudomonas aeruginosa)利用六型分泌系统(T6SS)向其他竞争性细菌分泌毒素效应分子Tse2，这是一种新发现的绿脓杆菌获得生存优势的分子机制．为了避免同类间的误杀，绿脓杆菌合成一种特异结合Tse2的抑制蛋白Tsi2来保护自己．序列分析显示，Tsi2是绿脓杆菌特有的一种新型类抗毒素蛋白．我们利用SAD方法成功地解析了Tsi2 1.8Å分辨率的晶体结构．Tsi2的三维结构采用一种规则的卷曲螺旋的结构特征，这是抗毒素分子中的一种全新的折叠方式，不同于经典的抗毒素分子在没有结合毒素分子状态下采用无规则构象的结构特征；二聚体是Tsi2的功能单位，二聚体内两个Tsi2单体通过广阔的疏水相互作用紧密结合，形成“夹子”状独特的二聚体组装方式；位于二聚体界面上的两个凹槽分别结合对称分子的两段螺旋，提供了Tsi2与Tse2结合可能的分子部位．该研究工作结果对于认识Tsi2抗毒素蛋白的分子本质，揭示其发挥抗毒素活性的结构基础，并为进一步开展Tse2-Tsi2复合物的结构与功能研究奠定了坚实的基础．]]> 2012/5/18 0:00:00 44true 2012/5/31 0:00:00 43true P < 0.05)．这是我们首次报道sTn特异性与Ⅰ型子宫内膜癌相关，有利于解释过去前后不一的矛盾结果．在非典型组织中，sTn的表达率较正常组织高，分别为31%(正常组织)和44%(非典型组织)．这说明sTn参与了子宫内膜癌的发生发展．同时，我们的结果表明，sTn的表达与肿瘤的组织分级具有相关性，其在高、中分化的肿瘤组织中表达率明显高于低分化的肿瘤组织．这预示着sTn可能与子宫内膜癌的良好预后相关．我们的研究为诊断Ⅰ型子宫内膜癌提供了一个新的标记物和诊断试剂，同时提示我们，将来对于子宫内膜癌的研究，有必要对Ⅰ型子宫内膜癌和Ⅱ型子宫内膜癌区别对待．]]> 2012/5/18 0:00:00 42true 2012/4/23 0:00:00 41true 2012/9/14 0:00:00 40true n = 30)和同龄健康人(n = 30)尿核糖进行了定量分析，结果显示，MOPBA-核糖衍生物与尿核糖浓度之间呈线性相关(r²=0.999)，回收率达99%．经质谱分析显示，HPLC分离的糖尿病患者尿样品中含569.19 u MOPBA衍生物峰(核糖，C₂₇H₂₉N₄O₁₀)和599.20 u MOPBA衍生物峰(葡萄糖，C₂₈H₃₁N₄O₁₁)．2型糖尿病组尿核糖浓度(男性：(134.28±35.09) μmol/L；女性：(97.33±23.68) μmol/L)显著高于正常对照组(男性：(35.99±5.64) μmol/L；女性：(33.72±6.27) μmol/L) (P < 0.001)，同时，其尿葡萄糖浓度也显著高于正常对照(P < 0.001)．糖尿病患者尿核糖显著高于正常人的现象提示，2型糖尿病不但葡萄糖代谢异常，同时核糖代谢也发生了异常．]]> 2013/9/16 0:00:00 39true 2013/8/21 0:00:00 38true 2013/7/24 0:00:00 37true 2013/5/22 0:00:00 36true 2013/4/22 0:00:00 35true 2013/3/22 0:00:00 34true 2014/9/22 0:00:00 33true 2014/6/18 0:00:00 32true 2014/5/22 0:00:00 31true 2014/2/21 0:00:00 30true 2014/2/21 0:00:00 29true prg-1突变样本中的小 RNA，并对其进行高通量测序．基于piRNA上游保守序列特征，在野生线虫L4时期中，发现了967种新piRNA，这些新piRNA在prg-1突变后表达消失．新piRNA的基因座集中分布在四号染色体的2个piRNA簇内，首位碱基以U为主．与已发表的成虫发育时期的PRG-1免疫共沉淀数据比对，发现有153种piRNA存在于与PRG-1免疫沉淀的数据中．同时还发现一些只在野生线虫中表达的non-21nt小RNA，它们与已知piRNA的基因座相同，推测这些non-21nt小RNA可能是其piRNA前体加工的产物．总之，通过小RNA测序，在线虫中发现了一些新的piRNA．]]> 2014/12/19 0:00:00 28true 2+)触发下释放神经递质普遍存在着同步和异步两种形式．突触囊泡膜蛋白(synaptotagmin 2，Syt-2)已被证实是Calyx of Held突触囊泡同步释放的Ca² 传感蛋白，而相关的异步释放Ca² 传感蛋白还有待于探索．虽然锶离子(Sr² )因其物理和化学性质都接近Ca² ，且能触发更多的囊泡异步释放成分而成为研究异步释放机制的常用工具，但有关Sr² 触发异步释放的机制存在着争议．本文在胞外以Sr² 替换Ca² 的条件下，通过对野生型(WT)和Syt-2敲除型(Z2B^-/-)小鼠Calyx突触囊泡自发和诱发释放的电生理特性分析，发现Syt-2是介导Sr² 诱发的突触囊泡快速释放的传感蛋白，但不是介导Sr² 相关神经递质异步释放和自发释放的传感蛋白；而未知的触发囊泡异步释放的传感蛋白相比Syt-2对Sr² 具有更高的亲和力，同时也介导突触囊泡的自发释放．这一研究为探索并最终发现触发囊泡异步释放的未知传感蛋白提供了新的线索．]]> 2014/11/21 0:00:00 27true 2015/6/24 0:00:00 26true Stenotrophomonas matltophila，还有4个菌株与Mesorhizobium amorphae亲缘关系很近．有趣的是，菌株A-3-E^T与已知物种同源性低，通过基于生物化学方法的多相分类学研究，我们将其确定为一个新属，并命名为Paramesorhizobium desertii gen. nov., sp. nov.，发现高浓度的β-内酰胺类抗生素，如1 000 mg/L的唑啉头孢菌素或 250 mg/L 的头孢氨噻肟，依然无法抑制其生长．此外，该菌株还能耐受所测试28种抗生素中的17种，塔克拉玛干沙漠可能是一个新的β-内酰胺环抗生素耐药细菌的自然资源库．]]> 2015/1/19 0:00:00 25true 2016/7/19 0:00:00 24true 2016/6/21 0:00:00 23true 2016/10/24 0:00:00 22true P < 0.01)；LeuLeuOMe处理bEnd.3细胞，使其溶酶体膜通透性增加，导致细胞内甲醛蓄积，而胞外甲醛降低．以上结果证明，溶酶体具有储存和转运甲醛的功能，如果溶酶体出现结构与功能的异常，会导致甲醛代谢失调，造成认知损害．]]> 2017/6/20 0:00:00 21true 2017/5/22 0:00:00 20true 2018/6/20 0:00:00 19true 2018/4/17 0:00:00 18true 2018/10/22 0:00:00 17true 2019/7/1 0:00:00 16true 2020/4/23 0:00:00 15true HECT）的晶体结构，并将其与HECT家族中其他成员的结构进行了比对. 尺寸排阻色谱和X射线小角散射的结果表明，AREL1^HECT在溶液中是以多种聚集状态形式存在的，小角散射的3D模型进一步表明AREL1^HECT在溶液中会发生二聚化. 这些结果将为AREL1^HECT与泛素复合物结构的解析及功能的分析提供坚实的结构基础，为揭示AREL1泛素化底物蛋白质的分子机制提供重要的依据.]]> 2020/8/11 0:00:00 14true 2021/3/4 0:00:00 13true 6A修饰及可变剪接调控中. 然而，RBM15在转录组水平如何调控可变剪接尚不清楚. 本研究应用超分辨率荧光显微镜技术发现，RBM15在细胞核中形成斑点状结构，且与核斑有密切接触或完全定位于核斑中. 核斑为细胞核中无膜细胞器，富含多种剪接因子，这提示RBM15可能参与到可变剪接的调控过程中. 为了确定RBM15能否及如何调控可变剪接，我们利用siRNA敲低RBM15，并对敲低RBM15和野生型细胞进行二代测序. 结果显示，敲低RBM15能够引起1 111个转录本中的1 279个可变剪接事件的变化. 与已发表的RBM15-CLIP数据进行比较分析，我们发现，这1 111个转录本中，有191个能够与RBM15结合，提示这191个转录本可能为RBM15调控的直接靶标. 进一步的分析表明，RBM15结合能够促进这191个转录本中的121个发生内含子或外显子的滞留. 该研究揭示了RBM15在转录组水平调控可变剪接的规律.]]> 2021/6/24 0:00:00 12true 2021/11/26 0:00:00 11true 目的 趋流，意即在水中调整身体方向并逆流而上的能力，是一种在大多数鱼类与两栖类动物中存在的保守行为。虽然关于趋流的研究已有一段很长的历史，并且近年来斑马鱼幼鱼趋流行为的理论机制也被提出，但是分布式的神经环路是如何整合多感知信息、做出决策、并实现行为控制仍然是个未知数。对自由运动的斑马鱼进行全脑神经活动成像为理解这一困难的问题提供了特殊的机会。方法 本文开发了一种微流控装置精确控制环境水流并激发斑马鱼的趋流行为。将该微流控芯片与扩增视野光场显微镜以及追踪系统整合，从而记录自由行为下斑马鱼全脑的神经活动。结果 在整合的微流控装置中稳定观察到了斑马鱼在水流中保持自身位置不变、逆流而上等刻板的趋流行为现象。与此同时，实现了对斑马鱼幼鱼趋流行为过程中的全脑钙活动记录。本文初步发现了几个脑区的神经活动与趋流行为相关。结论 本研究第一次展示了在斑马鱼幼鱼趋流行为的同时记录全脑神经活动的技术。接下来对神经活动和行为数据的分析与建模将有助于更好地理解一种重要自然行为背后的感觉运动转换机制。]]> 2022/9/21 0:00:00 10true 目的 核酸酶介导的DNA双链末端切割对同源重组修复至关重要。然而，DNA末端构型对RecJ 5"-3"核酸外切酶活性的调控尚不清楚。本研究旨在探究DNA 3"端和5"端构型对RecJ核酸外切酶活性的影响及其机制。方法 为探究DNA 3"端构型对RecJ核酸外切酶活性的影响，使用含有Mg²⁺的体系，对具有不同3"突出末端长度（9 nt与18 nt）和3"突出末端修饰（磷酸化和硫代磷酸酯修饰）的单链DNA分别进行RecJ核酸酶活性检测。为揭示DNA 3"端构型对RecJ外切酶活性的调控机制，在Mg²⁺缺失的体系中，使RecJ与底物结合后进行凝胶迁移实验（EMSA）。为探索其他调控因子与DNA 3"端构型对RecJ的协同作用，分别检测5"端磷酸化修饰和单链DNA结合蛋白（SSB）对DNA 3"突出末端修饰的影响。结果 DNA 3"端构型包括突出末端的长度和修饰（磷酸化和硫代磷酸酯修饰）均会抑制RecJ外切酶活性。DNA 3"端磷酸化和硫代磷酸酯修饰通过重塑RecJ-DNA的结合模式抑制RecJ外切酶活性。DNA 5"端磷酸化修饰可增强RecJ对具有不同3"端修饰底物的核酸外切酶活性，并改变RecJ-DNA的结合模式。此外，SSB通过增强RecJ-DNA结合可部分克服DNA 3"端修饰介导的抑制作用。结论 DNA 3"与5"端构型协同调控RecJ核酸外切酶的活性。]]> 2022/6/21 0:00:00 9true 目的 探究枸杞子提取物LBP1C延缓人成纤维细胞及线虫自然衰老的效应及机制，以期解读《本草纲目》记载的枸杞子轻身不老、易颜色、变白的科学内涵。方法 以人成纤维细胞及线虫自然衰老为模型，用LBP1C处理人成纤维细胞（复制性衰老模式细胞），检测P16、P21表达水平及β-gal染色指征衰老水平；用qPCR的方法检测转录因子GATA4及衰老相关分泌表型（senescence associated secretory phenotype，SASP）指标的mRNA水平；通过免疫荧光检测溶酶体生物发生和自噬的关键转录因子EB（transcription factor EB，TFEB）入核水平，通过Western blot检测LC3II/I的水平以指征LBP1C对自噬水平的影响；在细胞及线虫体系检测LBP1C对脂褐质水平进行检测。通过线虫身体在相同时间内的摆动次数和咽部吞咽次数评估LBP1C对线虫运动能力的影响。结果 LBP1C处理的人成纤维细胞组中衰老相关指标（P16、P21表达水平及 β-gal染色）相比于对照组显著下降，表明LBP1C可延缓细胞衰老；LBP1C还降低了细胞及线虫的脂褐质积累，并提高线虫运动及吞咽能力，促进线虫的健康从而抑制衰老。机制上，LBP1C处理组中TFEB入核比例显著升高，激活了自噬。自噬水平的提高降低了SASP的转录因子GATA4水平，从而降低了SASP相关的IL-1β及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）水平。同时，自噬水平的提高使脂褐质降解加速，降低了细胞及线虫中脂褐质的积累。结论 LBP1C通过激活TFEB提高了自噬水平，从而降低了SASP及脂褐质的积累，具有延缓衰老的效应，并促进了健康衰老。本研究初步揭示了枸杞子在抗衰老及抑制脂褐质从而潜在美白作用的效应及机制，为其进一步抗衰老和美白产品的研发提供了科学依据和理论基础。]]> 2023/8/14 11:14:21 8true 目的 乙酰胆碱作为一种高度保守的神经递质，在动物的运动行为调控中起着至关重要的作用。乙酰胆碱信号转导异常可导致多种运动功能障碍。然而，乙酰胆碱在运动行为中的抑制性调控机制尚未完全清楚。本文以秀丽隐杆线虫为研究对象，探究乙酰胆碱门控氯离子通道受体亚基（ACC-1、ACC-2、ACC-3、ACC-4）在运动行为中的调控作用。方法 通过将运动追踪、分子遗传学和光遗传学技术相结合，对乙酰胆碱门控氯离子通道受体亚基突变线虫的运动进行分析。结果 研究发现，这些亚基突变会影响线虫前进、后退和转向运动的运动学特征，并且前进过程中线虫身体弯曲幅度也发生了变化。在这些突变线虫的后退过程中光激活RIB中间神经元会导致后退运动延迟终止。结论 这些结果提示，乙酰胆碱门控氯离子通道亚基的调控作用对于维持和调节秀丽隐杆线虫运动状态是必需的。同时，这些亚基可能参与介导RIB中间神经元在秀丽隐杆线虫后退运动中的抑制性调控。本研究为理解乙酰胆碱门控抑制性受体在运动行为中的调控机制提供了新的思路。]]> 2023/6/20 16:49:48 7true 目的 槲皮素是一种广泛分布于药用植物中的黄酮类化合物，传统被认为具有神经保护作用。本研究利用位于大鼠脑干花萼状突触的突触前神经末梢进行膜片钳记录，研究槲皮素调控突触传递和可塑性的突触前机制。方法 利用全细胞膜片钳结合膜电容记录，在突触后记录微小兴奋性突触后电流（mEPSC），在突触前神经末梢记录钙內流和神经囊泡的释放、回收以及可立即释放库（RRP）的恢复动力学。并且利用纤维刺激在轴突给予5~200 Hz的刺激，诱发突触后EPSC，记录突触后短时程抑制（STD）。结果 100 μmol/L槲皮素不影响突触后mEPSC的振幅、频率以及AMPA受体的动力学特征。在突触前神经末梢，槲皮素不改变钙内流或囊泡的释放，但显著抑制胞吐后网格蛋白依赖的慢速胞吞。抑制胞吞会导致突触前囊泡动员的减慢，降低RRP的补充速率，并且增强高频刺激下的短时程可塑性STD。结论 本研究为槲皮素调控中枢神经突触传递提供全新的突触前神经机制，槲皮素有助于抑制中枢神经过度兴奋，进而发挥神经保护作用。]]> 2023/6/20 16:50:07 6true 目的 本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶（PRMT）7在人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化，进而探索相应的调控机制。方法 通过定量反转录PCR（qRT-PCR）和蛋白质印迹（Western blot）检测hBMSCs成脂分化过程中PRMT7的变化；通过qRT-PCR和Western blot实验证明PRMT7稳定敲低细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析，以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定敲低细胞系成脂分化水平的变化；通过裸鼠体内异位成脂实验，油红O染色检测PRMT7稳定敲低细胞系体内异位成脂的效果；通过qRT-PCR和Western blot证明PRMT7稳定过表达细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定过表达细胞系成脂分化水平的变化；通过qRT-PCR和Western blot实验检测敲低PRMT7和过表达PRMT7的细胞中IGF-1表达水平的变化。在PRMT7稳定敲低细胞系中转染siIGF-1并通过qRT-PCR和Western blot检测IGF-1的表达水平验证敲低效率。通过油红O染色和定量分析，qRT-PCR实验检测转染siIGF-1的敲低组hBMSCs成脂分化水平的变化。结果 本文发现：在hBMSCs成脂过程中，PRMT7表达水平明显降低（P<0.01）；敲低PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力增强（P<0.001）；敲低PRMT7后hBMSCs的体内异位成脂分化能力增强；过表达PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力减弱（P<0.01）；PRMT7敲低后IGF-1表达水平增加（P<0.000 1）；PRMT7过表达后IGF-1表达水平降低（P<0.000 1）；转染siIGF-1后，各细胞系IGF-1表达水平明显降低（P<0.001）；敲低组转染siIGF-1后成脂分化能力明显降低（P<0.01）。结论 本研究通过细胞水平和裸鼠皮下移植实验发现PRMT7显著抑制hBMSCs成脂分化，机制研究发现PRMT7对hBMSCs成脂分化的调控作用依赖IGF-1信号通路。上述研究表明，PRMT7可能是治疗相关疾病的潜在分子靶点，为PRMT7和hBMSCs应用于相关疾病治疗提供了新思路。]]> 2024/7/30 17:10:40 5true 目的 神经炎症在缺血性脑卒中的发生和发展过程中起着至关重要的作用，并显著影响中枢神经系统的恢复。过度的神经炎症可能导致继发性神经元损伤，进一步加重脑损害并阻碍功能恢复。因此，有效调控和减少脑内神经炎症已成为改善缺血性脑卒中预后的关键治疗策略。在众多方法中，通过免疫调节控制炎症反应逐渐受到广泛关注。本研究旨在探讨体外诱导的调节性T细胞（Treg细胞）在抑制缺血性脑卒中后神经炎症中的作用及其潜在的治疗效果。通过研究Treg细胞发挥免疫调节功能的机制，希望为缺血性脑卒中的治疗策略提供新的科学依据。方法 采用阴性选择的方法从小鼠脾脏中分离初始CD4⁺ T细胞，以确保高纯度，然后通过添加特定细胞因子在体外诱导其分化为Treg细胞。评估Treg细胞移植在缺血性脑卒中小鼠模型中的抗炎作用及治疗潜力。在大脑中动脉闭塞（MCAO）模型中，移植Treg细胞后，观察其是否能顺利到达脑梗死区域，以及对神经炎症水平的影响。分析细胞因子表达的变化及其对免疫细胞相互作用的影响。测定梗死面积及行为学评分，以评估Treg细胞在神经保护方面的效果。通过整合多种指标，全面探讨Treg细胞在缺血性脑卒中治疗中的潜在优势。结果 Treg细胞在体外和体内均显著调节了促炎和抗炎因子的表达水平，有效平衡免疫反应并抑制过度炎症。此外，Treg细胞能够抑制炎症细胞的激活和活性，从而减少神经炎症。在MCAO小鼠模型中，观察到Treg细胞在脑梗死区域富集，显著降低了梗死面积，显示出其神经保护作用。此外，Treg细胞治疗显著改善了行为学评分，提示其对功能恢复的促进作用，并且提高了缺血性脑卒中小鼠的存活率，突出了其作为卒中治疗潜在策略的应用价值。结论 体外诱导的Treg细胞能够有效抑制缺血性脑卒中引发的神经炎症，展现出良好的临床应用前景。通过调节促炎和抗炎因子平衡，Treg细胞可抑制神经系统中的免疫反应来减少神经元损伤。Treg细胞还能调控免疫微环境，抑制炎症细胞的激活，促进组织修复。此外，Treg细胞的治疗作用还包括增强卒中后恢复、改善行为学表现以及提高缺血性脑卒中小鼠的存活率。凭借其抑制神经炎症的特性，Treg细胞疗法为缺血性脑卒中的治疗提供了一种新颖且有效的策略，在临床免疫治疗和再生医学领域具有广阔的应用潜力。]]> 2025/2/28 16:13:08 4true 目的 脑瘫是一种常见的围产期获得性神经发育障碍，脑室周围白质损伤（PWMI）是其主要病理改变，其特征为少突胶质细胞（OLs）丢失及髓鞘崩解。神经干细胞（NSCs）可作为OLs的再生来源，但传统二维（2D）体外体系缺失三维（3D）生理微环境，微流控芯片技术可在干细胞微环境中实现3D微环境培养与浓度梯度的精准调控。梓醇（catalpol）是一种兼具抗氧化与抗凋亡活性的环烯醚萜苷，其在3D仿生条件下驱动NSCs向OLs分化的潜能及分子机制尚不明确。本研究拟构建微流控3D仿生平台，系统评估梓醇促NSCs-OLs分化的浓度效应，并解析小窝蛋白1（Cav-1）依赖途径。方法 自主设计微流控芯片，生成0~3 g/L梓醇稳定浓度梯度，并对NSCs 3D细胞球实施连续灌流培养。钙黄绿素乙酰氧基甲酯/碘化丙啶（Calcein-AM/PI）实时监测细胞活力；实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）定量与MBP/SOX10免疫荧光定性OLs分化；联合Cav-1抑制剂甲基-β-环糊精（MCD）解析梓醇促NSCs向OLs分化的分子机制。结果 梓醇在0~3 g/L范围内无细胞毒性（活力>96%）；3 g/L梓醇显著上调MBP与SOX10 mRNA表达（P<0.05，P<0.01）。伴随NSCs向OLs分化，Cav-1 mRNA表达下调；而Cav-1特异性抑制剂MCD进一步抑制Cav-1后，OLs相关基因表达显著升高（P<0.05，P<0.01）。结论 构建了微流控梯度芯片-NSCs 3D细胞球培养体系，发现3 g/L梓醇可有效抑制Cav-1诱导NSCs分化为OLs，为髓鞘再生研究提供新平台。]]> 2025/11/5 11:41:42 3true 目的 缺血性脑卒中后，急性炎症反应和持续性免疫微环境失衡会加剧神经损伤，严重限制神经功能恢复。针对这一关键病理过程，本研究旨在构建并系统评价一种兼具病灶靶向递送与免疫微环境重塑功能的仿生纳米体系——转化生长因子β1（TGF-β1）工程化血小板膜包被脂质纳米颗粒（PLP）。通过验证其在缺血病灶中的精准富集、炎症调控及神经保护作用，解决缺血性脑卒中治疗中“如何实现病灶定向、免疫调节与神经功能恢复的协同一体化干预”这一关键科学问题。方法 采用动态光散射、zeta电位分析和透射电子显微镜技术，表征了PLP的物理化学特性，包括流体动力学粒径、zeta电位、结构稳定性和形态。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对PLP与天然血小板膜的蛋白质谱进行比较分析，证实PLP保留了来源于血小板膜的黏附和免疫调节蛋白。在体外利用脂多糖（LPS）诱导的M1型分化的RAW264.7巨噬细胞评估炎症调节能力；采用氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）诱导的BV2小胶质细胞及SH-SY5Y神经元细胞研究神经炎症调控与神经元保护作用。建立小鼠短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO）模型以模拟脑缺血-再灌注损伤，通过活体荧光成像监测PLP在脑内的时空分布，并结合2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色、神经胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光以及体重变化和神经功能缺损评分（NSS），综合评估PLP的脑靶向富集能力、炎症与胶质反应调控作用以及对神经功能的改善效果。结果 PLP为粒径均一、形貌规整且表面带负电的稳定纳米颗粒，并成功保留多种血小板膜黏附与免疫调节相关蛋白，显示出良好的仿生特性，并通过OGD/R诱导BV2细胞评估了最佳给药浓度。PLP能够在体外显著抑制RAW264.7细胞向M1促炎表型极化，并使缺氧/复氧条件下神经元凋亡减少。在tMCAO小鼠中，PLP可在给药早期靶向富集于缺血半球，并在7 d内维持高水平脑内滞留。与对照组相比，PLP治疗显著减轻脑梗死范围，降低星形胶质细胞的激活程度，并促进神经功能评分恢复。结论 本研究构建了一种基于血小板膜仿生修饰的TGF-β1递送纳米平台，实现了“血小板膜-缺血内皮黏附分子”介导的主动靶向与TGF-β1的免疫调节、抑制炎症、抗氧化和神经保护作用的有机整合。PLP不仅能快速定向归巢和长效滞留于脑缺血区域，还能通过抑制炎症性细胞活化、减轻神经元凋亡和限制星形胶质细胞过度激活，从而从多层面协同调控脑卒中后的炎症微环境，显著降低组织损伤并改善行为学功能。本研究表明，利用血小板膜仿生技术实现“缺血灶靶向+免疫调控”的联合干预策略具有明显的逆转炎症微环境和改善神经功能的效果，为开发兼具靶向与免疫调节能力的新型脑卒中干预方案提供了坚实的实验基础。]]> 2026/2/7 8:22:53 2true 目的 胰腺导管腺癌（PDAC）因高度纤维化的基质及免疫抑制性肿瘤微环境，常对现有治疗方法反应不佳。近年来，嵌合抗原受体巨噬细胞（CAR-M）疗法为胰腺癌治疗开辟了新路径。为进一步提升原位CAR-M疗法的靶向递送效率，本研究致力于开发一种可口服的纳米基因递送系统，以实现嵌合抗原受体（CAR）基因在胰腺肿瘤部位的高效递送。方法 采用阳离子聚多肽负载编码CAR的质粒DNA（pCAR），构建纳米基因颗粒（PNP/pCAR），并利用β葡聚糖对其进行表面修饰，制备靶向型纳米颗粒（βGlus-PNP/pCAR）。对PNP/pCAR的粒径、电位、稳定性及负载效率进行表征；通过细胞实验评估其被巨噬细胞摄取、溶酶体逃逸及转染的能力；通过口服给药βGlus-PNP/pCAR，在原位胰腺癌模型小鼠体内验证其肿瘤靶向富集效果及基因转染能力。结果 制备的PNP/pCAR纳米颗粒具备适宜的粒径和电位、高负载效率和良好稳定性。细胞实验表明，PNP/pCAR纳米颗粒能被巨噬细胞高效摄取，并有效逃逸溶酶体，实现pCAR的成功转染。体内实验表明，与未修饰的PNP/pCAR相比，βGlus-PNP/pCAR在口服后表现出更强的原位胰腺肿瘤靶向和基因转染能力。结论 本研究成功构建并验证了一种可口服、能靶向胰腺癌的聚多肽纳米基因递送系统，为后续开发基于原位CAR-M的胰腺癌治疗策略奠定了重要的递送技术基础与实验依据。]]> 2026/1/14 10:00:02 1true