摘要:对于简单的球状蛋白来说,它形成天然态有活力的空间结构的信息都包含在氨基酸序列之中.理论上讲,从一级结构预测空间结构进而推测出蛋白质生物功能是可行的.但到目前为止,这条路尚未走通.原因之一是用一维信息编码三维结构的过程十分复杂.这个过程就称为蛋白质卷曲.文章介绍了蛋白质的体外和体内卷曲以及卷曲的起始等方面近年的研究状况.

摘要:简述了真核生物核基因 RNA 剪接研究的一些新进展,主要包括剪接体的结构组成,剪接体的逐步组装,剪接反应的影响因素等方面.

摘要:利用受体的结构进行合理药物设计是目前国际上药物设计的主要发展方向之一.综述了有关合理药物设计及全新药物设计的方法,并以 HIV-1蛋白水解抑制剂的设计为例介绍了该方法在新药设计中的成功应用.

摘要:C 端序列测定长期以来是蛋白质化学领域中的一大难题,但是生物化学与分子生物学中的许多研究表明了 C 端序列的重要性.文中介绍了 C 端测定的一些最新技术,尤其侧重于化学降解法,特别是运用商品化的 N 端分析仪器分析 C 端序列,增强了仪器的通用性.文中还推荐了几种 C 端标记进而分离 C 端肽段,然后用 Edman化学法测定 C 端序列的简便方法,有一定的可行性.

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摘要:HLH 蛋白是近几年来发现的一类 DNA 结合蛋白,其分子中含有一螺旋-环-螺旋(HLH)结构.至今,其家族成员已超过20个,它们参与转录调节、细胞癌变以及细胞分化等过程.骨骼肌发育成熟的各个阶段均受到特异生肌转录调节蛋白因子的控制.这些因子包括 Myo D1,myogenin 以及 Myf-5等,它们均系 HLH 家族成员,在生肌过程中起非常重要作用.

摘要:GABA 是一种分子量极小的氨基酸.GABA 及其合成酶 GAD 主要存在于中枢神经系统中,是一种独特的抑制性神经递质,在神经信息加工中起重要作用.近几年来,对于 GABA 作用的研究越来越引起人们的重视,分别在生理学药理学、生物化学和组织化学等领域中进行了广泛地探讨.文中介绍了 GABA 的三种组织化学研究途径及其研究结果.

摘要:用多聚酶链反应(PCR)方法扩增人型、牛型结核杆菌基因组 DNA,获得特异的158 bpDNA 片段,而从另外十三种分枝杆菌未见到特异的扩增产物.回收158 bpDNA 片段作探针,它除与人型、牛型结核杆菌有特异的杂交信号外,与金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及一些分枝杆菌皆没有杂交反应.结果表明,PCR 可用于检测结核杆菌基因组 DNA,扩增产物158 bp DNA 片段可作为探针用于检测人型、牛型结核杆菌并鉴别结核杆菌与其它分枝杆菌.

摘要:用 ¹²⁵I 标记载脂蛋白 CⅢ (apoCⅢ)为配体,采用聚乙二醇沉淀分离法,建立了小鼠肝细胞膜 apoCⅢ 受体(结合位点)放射分析法,并对人及小鼠肝细胞膜 apoCⅢ结合位点的特性进行了研究.

摘要:比较分析了嗜肝病毒家族四成员间的全基因核苷酸序列,得出了它们之间的相对进化距离,DHBV 分野最早,GSHV,WHV 次之,HBV 最晚;其进化方式属趋 异性进化.进一步比较各 ORF 的保守性,发现各 ORF 间及同一 ORF 内的不同区域核苷酸发生替换的频率有明显差别;讨论了各 ORF 的特点及意义.

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摘要:用合成的磷酸酪氨酸牛血清白蛋白(P-tyr-BSA)免疫家兔得抗血清,此抗血清与3种磷蛋白均有交叉反应.将 IgG 纯化并与辣根过氧化物酶偶联,经 Sephadex G-200纯化得酶标结合物.纯化的 IgG 只与载体牛血清白蛋白和磷酸酪氨酸蛋白有交叉反应.ELISA (酶联免疫吸附测定法)的最小检出量为2—4ng,与被检磷酸酪氨酸蛋白均有交叉反应,但与磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸蛋白及其他含磷酸物质无交叉反应.样品变异系数,批间和批内均小于5%.血清磷酸酪氨酸蛋白检测结果:20例正常人均阴性,20例急性淋巴细胞性白血病18例阳性,14例非急性淋巴细胞性白血病均阳性.

摘要:胸腺细胞受照后发生凋落——一种与坏死不同的主动性细胞死亡.为了检测单个凋落细胞的 DNA 变化,我们建立了微凝胶电泳法.受照的大鼠胸腺细胞培养后用本法进行电泳,结果可见细胞被分为二群,一群细胞的 DNA 几乎没有泳动,另一群细胞的 DNA 则泳动成大小相似的水滴或慧星形状.DNA 泳动细胞的比例与细胞死亡的比例一致.实验说明凋落细胞的 DNA 分解十分迅速,一旦开始就很快达到一定程度.

摘要:介绍用大鼠肝细胞膜为材料 EGF 放射受体分析方法. ¹²⁵I-EGF 采用 Iodogen 方法,其标记率为50%左右, ¹²⁵I-EGF 对受体的结合率为20—30%.大鼠肝细胞膜 EGF放射受体法的灵敏度为 28pg/管,精密度为6.3%.应用此法测定了大鼠血清,颌下腺和唾液中的 EGF 的含量.

摘要:用电化学聚合和戊二醛交联的方法,将羊抗人 IgG 抗体固定在石墨电极表面,研制成固态活性膜直接 IgG 免疫传感器,对人血清 IgG 进行了测定.并对免疫传感器的测定、再生、保存条件、精密度、测定范围和选择性及与 IgG 免疫扩散测定法的相关性进行了研究.结果表明,石墨活性膜 IgG 免疫传感器具有操作简单、快速、测定准确度和精密度高的特点,为今后免疫传感器的研制提供了一种新的方法.

摘要:用福尔马林固定-石腊包埋的人肿瘤组织切片,经脱腊处理直接用 PCR(poly-merase chain reaction)技术扩增 Ki-ras 癌基因序列中包括12,13位密码子的 DNA片段,并分别以5种含特异突变点的寡核苷酸探针代替3′端引物,经 PCR 扩增的产物作为点突变的阳性对照.用上述五种探针进行选择性斑点杂交,检测了人肺癌及结直肠癌组织的 Ki-ras 基因12及13位点突变.为了封闭杂交时的非特异结合,采用野生型冷探针与标记的含突变点的探针同时进行杂交的方法,有效地消除了杂交过程中可能产生的假阳性,而不影响真阳性反应的出现.因而增加了检测的可靠性.

摘要:报道了固相时间分辨荧光免疫螫合剂4,7-二氯磺基苯-1,10-菲罗啉-2,9-二羧酸(BCPDA)的制备方法,BCPDA 标记蛋白质及螫合 Eu³⁺方法,BCPDA-Eu³⁺标记物荧光光谱研究以及固相时间分辨荧光免疫分析法检测甲胎蛋白异质体(AFP-R-LCA)方法的建立.结果表明 BCPDA 能在温合条件下与蛋白质氨基结合并与 Eu³⁺螯合,BCPDA-Eu³⁺蛋白质标记物荧光特性、标记比度、生物结合活性与国外同类产品一致,所建立的检测 AFP-R-LCA 免疫分析法最小检测值0.6ng/ml,为提高我国非放射性同位素标记技术水平奠定了基础.

摘要:在分子生物学研究的许多领域均需要一定纯度的寡核苷酸.目前寡核苷酸的纯化方法主要有高效液相色谱法及电泳法两种.这两种方法不仅需要一定的仪器设备而且纯化周期长(2—3d)、回收率低(50%—80%).文中报道建立了一种高效薄层色谱纯化寡核苷酸及其衍生物的方法.该方法可在3—4h 内获得寡核苷酸纯品,平 均回收率可达97.7%.

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