摘要:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一种常见慢性肝脏疾病，其发病率呈逐年上升趋势，但发病机制尚未明确，诊疗手段仍不完善．蛋白质组学(proteomics)的出现使NAFLD研究有了进一步的发展，相关研究已达21个．目前，蛋白质组学技术可以研究疾病相关的分子改变，从而寻找新的生物标志物和治疗靶标．在此，对蛋白质组学在NAFLD诊断及分期、发病机制和其他相关领域研究进展作一个较为全面的综述．首先，对研究中遇到的研究对象、样本种类、实验方法和标志物特征选择进行经验性总结．其次，除了介绍如何运用蛋白质组学研究病因、危险因素和重要分子在NAFLD发病机制中的作用，还介绍NAFLD发病机制的亚细胞蛋白质组学、修饰蛋白质组学以及蛋白质组学与转录组学相结合的研究实例．此外，对差异蛋白质的分析策略和价值作了重点阐述，收集到一些有望成为NAFLD治疗靶标的候选分子．最后，结合新技术展望研究新空间，以期能够有助于推动蛋白质组学在寻找新的疾病标志物、探索疾病分子机制和治疗靶标中开辟新的途径．

摘要:人类听觉的基本特性和机制与其他哺乳动物相似，因此，利用动物所作的听觉研究和获得的结果，有助于认识人类自身的听觉．围绕听觉中枢神经元对不同模式的声信号的识别和处理，简要综述了这方面的研究．声信号和声模式识别在听觉中枢对声信号的感受和加工中具有重要意义．听神经元作为声模式识别的结构和功能基础，对不同的声刺激模式产生不同反应，甚至是在同一声刺激模式下，改变其中的某个声参数，神经元的反应也会发生相应改变，而其反应的特性和机制均需要更多研究来解答．另外，声信号作为声信息的载体，不同的声信息寓于不同的声参数和声特征之中，研究发现，听觉中枢神经元存在相应的声信息甄别和选择的神经基础，能对动态变化的声频率、幅度和时程等进行反应和编码，并且，在不同种类动物上获得的研究结果极为相似，表明听觉中枢对不同声信号和声刺激模式的识别、分析和加工，具有共同性和普遍性．

摘要:作为发现疾病相关生物标志物的重要途径，定量研究已成为蛋白质组学的热点问题．随着实验方法的发展和改进，定量数据处理算法也在不断更新和完善．将现有的无标记定量方法归纳为需要/不需要鉴定结果两类方法，分析比较了两类方法的异同及优缺点，详细讨论了所涉及的主要算法，总结了一些常用的无标记定量软件及对应的网络资源．展望了无标记定量数据分析的未来研究方向．

摘要:利用杆状病毒-昆虫细胞表达H5N1型禽流感病毒的血凝素蛋白(HA)，纯化后的重组蛋白HA免疫小鼠并制备杂交瘤单克隆抗体，用H5N1型禽流感病毒的全病毒进行筛选，成功地获得了抗H5N1型禽流感病毒血凝素蛋白HA的单抗．MDCK细胞微量中和试验表明，单抗8G10D7可对clade2 和clade9的H5N1型禽流感病毒起中和作用．Western-blot及血凝抑制实验进一步证明了该单抗的结合位点位于HA蛋白的HA1亚基上．鸡胚感染病毒预防试验结果表明，8G10D7对禽来源的和人来源的H5N1型禽流感病毒均可达到100%的保护率；在治疗试验组中，8G10D7对禽来源的病毒感染具有较高的保护率，可达100%，对人来源的H5N1型禽流感病毒最高也可达87.5%的保护率．该抗体的获得不仅为H5N1型高致病性禽流感病毒的预防和治疗带来了希望，同时其中和位点的发现也为以后亚单位疫苗的研制提供新的思路．

摘要:探讨冷藏是否导致新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma，FFP)中的转化生长因子-β(transform growth factor-β，TGF-β)发生变化并降低其对内皮细胞迁移的诱导能力及其分子机制．为证实冷藏可能导致FFP中TGF-β的水平升高进而影响其功能，首先采用ELISA法分析当天解冻FFP(FFP Day 0)和解冻后4℃冷藏1～5天FFP中TGF-β含量，迁移实验及Western blot分析比较FFP(Day 0)和FFP (Day 5)处理人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells， HPMECs)后的细胞迁移率及TGF-β信号通路Smad2 和 Smad3磷酸化，进一步采用ALK5-siRNA和ALK5特异性抑制剂阻断细胞TGF-βⅠ型受体ALK5的活性，分析下调TGF-β/Smad2/3信号传导后的内皮细胞迁移率．结果显示：随着冷藏时间的延长，FFP中TGF-β1水平逐渐增加，其增加率为244.31 ng/(L·d)(P < 0.05)；与FFP( Day 0)相比，FFP (Day 5)诱导内皮细胞HPMECs的TGF-β信号通路Smad2/3磷酸化显著增加(P < 0.05)；不管是FFP(Day 0)还是FFP (Day 5)体外均能诱导内皮细胞迁移，与FFP( Day 0)相比，FFP(Day 5)诱导细胞迁移能力显著降低(P < 0.05)；阻断TGF-βⅠ型受体ALK5的活性、下调Smad 3信号传导可恢复FFP(Day 5)诱导细胞迁移能力．上述结果表明，FFP能显著诱导内皮细胞迁移，4℃冷藏增加FFP 中TGF-β1水平并增加内皮细胞TGF-β1信号传导，进而降低FFP诱导内皮细胞迁移．提示，FFP复苏疗效的提高可能与增加内皮细胞迁移有关，冷藏导致内皮细胞迁移降低进而降低FFP复苏疗效．

摘要:探讨和分析了重组大肠杆菌菌蜕递送系统能否进一步提高幽门螺杆菌核酸疫苗的免疫应答水平．首先构建了展示尿素酶B表位的重组大肠杆菌菌蜕，然后以此菌蜕包裹幽门螺杆菌核酸疫苗pcDNAKAT，经DNA凝胶电泳、荧光显微镜观察和FACS分析，表明该质粒DNA可以非特异地结合到大肠杆菌菌蜕内膜上．该核酸疫苗经重组菌蜕包裹后免疫小鼠，其血清抗过氧化氢酶抗体效价由单独免疫时的1∶(307 ± 39)提高到1∶(520 ± 54)，二者差异极显著(P = 0.005 8)，结果表明利用菌蜕递送系统能较好地提高核酸疫苗的免疫应答水平．

摘要:SMAD-4在肿瘤抑制方面有重要作用，但它在肿瘤发生中的作用及其与细胞周期进程中的一种关键调控因子——PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)的关系仍存在争议．分别在人胚肾细胞(293T)及人胃癌细胞(MGC-803)中研究SMAD-4及TGF-β信号通路对PTEN基因表达的影响．结果发现，在293T细胞中，SMAD-4与TGF-β促进PTEN表达，而MGC-803细胞中，SMAD-4与TGF-β抑制PTEN转录．进一步研究发现，胃癌细胞中，SMAD-4与转化生长因子β(TGF-β)对PTEN的抑制可被PD98059(MEK抑制剂)解除．此外，SMAD-4的核转移也明显促进PTEN表达，并且PD98059存在下，SMAD-4与TGF-β协同刺激可促进胃癌细胞凋亡．综上，实验发现，SMAD-4作为一种co-Smad蛋白，通过TGF-β信号途径影响PTEN表达．

摘要:探讨了CyclinB1在肝癌药物耐受形成中的作用．用siRNA技术沉默CyclinB1在细胞中的表达，使用流式细胞仪技术分析细胞的凋亡和周期分布，用细胞克隆形成能力分析和细胞毒性实验分析细胞的增殖能力．由siRNA诱导的CyclinB1下调导致40%～50%肝癌细胞阻滞在G2/M期，并显著抑制肝癌细胞的单克隆形成能力；柔红霉素联合CyclinB1 siRNA 较单独使用柔红霉素能更加有效地导致肝癌细胞凋亡，而在人正常肝细胞HL-7702中这种现象不明显．实验结果表明针对于CyclinB1的靶向性下调与肝癌药物的联合使用将有可能成为肝癌治疗的新策略．

摘要:在真核生物中，基因组DNA是被高度包装成染色质的形式而存在的，这就对基因在复制、转录、修复、重组时的功能分子有效地接近DNA形成了天然屏障，执行上述生化反应需要松散染色质的结构，染色质松散是染色质动态变化即染色质重塑(chromatin remodeling)的一种形式．越来越多的证据表明，染色质重塑在DNA损伤反应中起着非常重要的作用，染色质重塑过程可以把损伤应答和修复蛋白募集到损伤位点，从而完成修复．为了进一步探讨染色质重塑和DNA损伤修复的偶联机制，采用了基于Lac抑制子和Lac操纵子的大规模染色质重塑报告系统，并借助GFP分子荧光显示方法，建立了可以直观地观察染色质松散的技术．在利用该技术证实了DNA损伤应答蛋白TIP60能够强烈诱导染色质松散的基础上，发现P53诱导基因3蛋白(PIG3)在细胞辐射DNA损伤反应中也能够一定程度地诱导染色质松弛．这些结果证明此技术是可靠的，也为阐述DNA损伤修复与染色质重塑关联机制提供了新的信息．

摘要:采用GFP稳定表达的细胞系(293-BAC)接种裸鼠形成移植瘤．取肿瘤组织进行原代培养，通过GFP示踪和细胞形态学变化，观察了肿瘤组织中细胞的生长规律．肿瘤细胞释放并生长在组织块附近，向周围空间延伸．种植时散落的薄层组织细胞则直接贴壁生长．生长的鼠源间质细胞占总细胞量的1%～3%，散在或在组织新生肿瘤细胞外围集中生长．原代培养的细胞在传代5代以后，其中的鼠源细胞消失．经过成瘤和传代过程的肿瘤细胞生长性能稳定、来源纯净，是相关研究的好材料．观察到的细胞生长规律可为移植瘤的相关研究提供参考．

摘要:c-Jun氨基末端激酶(the c-Jun N-terminal kinase，JNK)家族是促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族成员之一．JNK信号通路对细胞生长、分化和凋亡等生物学活动都有重要作用．而SUMO化是一种重要的生物学修饰，可以调节多种细胞生理活动．最近，黄海等在Development发表文章首次将SUMO化途径与JNK信号通路通过Hipk激酶联系起来，为进一步研究SUMO化的功能及其对JNK通路的调节建立了一个新的模型．

摘要:近期，本实验室报道了内源性甲醛浓度与认知功能损伤程度之间的关系(Neurobiol Aging, 2011, 32(1): 31-41)．观察到转基因痴呆小鼠(APP、APP/PS1)及衰老加速型(SAMP8)小鼠脑内甲醛浓度较对照组显著升高．参照痴呆鼠脑内甲醛浓度，实验人员对正常成年小鼠进行注射，导致其视觉空间记忆能力减退．注射甲醛消除剂可以降低老龄大鼠体内甲醛浓度、减少APP痴呆模型小鼠脑内的老年斑，且能观察到记忆功能的改善．临床观察显示，老年痴呆患者尿甲醛浓度与认知功能损伤程度之间呈正相关．甲醛的过量蓄积造成脑慢性损伤，可能是散发性老年记忆衰退的机制之一．