一种快速构建cRNA标准曲线检测基因表达方法的建立
DOI:
CSTR:
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

国家自然科学基金资助项目(39970270).


Rapid Construction of cRNA Standard Curves in Real-time Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction to Measure mRNA Expression
Author:
Affiliation:

Fund Project:

This work was supported by a grant from The National Natural Sciences Foundation of China (39970270).

  • 摘要
  • |
  • 图/表
  • |
  • 访问统计
  • |
  • 参考文献
  • |
  • 相似文献
  • |
  • 引证文献
  • |
  • 资源附件
  • |
  • 文章评论
    摘要:

    为了建立一种适于实验室乃至常规定量检测mRNA表达的、可快速构建cRNA标准曲线的方法,设计带有T7启动子序列和PolyT序列的引物对目的基因和内参照进行PCR,克隆入载体作为体外合成cRNA的模板,快速构建cRNA标准.结果表明:该曲线的线性范围至少达6个数量级,相关系数为0.99.该法快速、简便,适用于所有靶基因.

    Abstract:

    To establish a rapid construction cRNA standard curves method applicable to common laboratory, PCR was carried to amplify the target gene and internal reference gene using primers containing T7 promotor and polyT sequence, PCR product was cloned as the template of T7 RNase polymerase to synthesize cRNA in vitro for establishing standard curves. The result shows that constructed cRNA curve has a wide linear range of at least six orders and correlation coefficient is 0.99.The rapid and simple method can be applicable to measurement of transcripts for any gene.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

张燕,沈茜.一种快速构建cRNA标准曲线检测基因表达方法的建立[J].生物化学与生物物理进展,2003,30(3):474-477

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
  • HTML阅读次数:
  • 引用次数:
历史
  • 收稿日期:2002-11-20
  • 最后修改日期:2002-12-26
  • 接受日期:
  • 在线发布日期:
  • 出版日期: