牛胚系基因中两种 JH 和 Cμ抗体基因的克隆与分析
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国家高技术“863”计划资助项目(2002AA206311).


Cloning and Characterization of Two JH and Cμ Ig Genes in Bovine Germline Gene
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This work was supported by a grant from The State 863 High Technology R&D Project of China(2002AA206311).

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    根据 NCBI GenBankTM 中登录的 2 个牛抗体重链可变区 J 基因 (JH) ( 序列号为 AY158087 , AY149283) 的序列不同之处设计 PCR 引物,能从同一个体的 Holstein 牛基因组 DNA 中扩增得到与以上 2 个基因分别相同的序列,证明这 2 个 JH 基因的差异不是由于牛个体或品种不同引起的 . 提取牛脾脏总 RNA , RT-PCR 扩增 IgM cDNA ,测序结果显示:序列号为 AY149283 的 JH 基因中第六外显子 JH6 是一个功能基因,它可以编码牛 IgM 的部分 CDR3 区和完整的 FR4 区,从 2 种 IgM cDNA 克隆的测序结果可以看出,其恒定区序列分别与序列号为 U63637 和 AY230207 的 2 种抗体重链恒定区μ基因 (Cμ) cDNA 序列相同 . PCR 扩增 JH-Cμ序列,测序结果表明:序列号为 AY158087 的 JH 基因是同以上 2 种 Cμ基因分别串连在一起的 ( 序列号分别为 AY230207 和 U63637). 以上结果证明:序列号为 U63637 和 AY230207 的 2 个 Cμ基因分别与 AY149283 的 JH 基因串联在一起,都能够参与牛 IgM 的产生,它们与 AY158087 的 JH 基因共同存在于同一个体 Holstein 牛胚系基因中 .

    Abstract:

    Using methods based upon the PCR, two DNA sequences which are identical to two JH genes(accession No.AY158087 , AY149283) from one Holstein bovine genomic DNA have been cloned, the results demonstrate that all the two JH genes(accession No.AY158087 , AY149283) are present in the same Holstein bovine genomic DNA. Two kinds of IgM cDNA was cloned from bovine spleen total RNA. Sequencing the cDNA clones show that the last exon of JH gene (accession No.AY149283) JH6 is a functional gene encoding part of CDR3 and whole FR4 region of bovine IgM. The sequences of two IgM cDNA clones indicate each constant region is identical to one of the two Cμ genes(accession No.AY230207 , U63637), there are greater diversities in the IgM CH1 domain than the other CH domains. PCR products of JH-Cμ gene suggested that each Cμ gene (accession No.AY230207 , U63637) is in series with the same JH gene (accession No. AY149283) in the bovine germline genes, they are all functional genes in the process of bovine IgM generation.

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引用本文

李 敏,陈丽梅,林爱星,杨兴元,安晓荣,陈永福.牛胚系基因中两种 JH 和 Cμ抗体基因的克隆与分析[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(9):857-864

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