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摘要:ELISA (酶联免疫吸附法)试验近两年来的进展情况可分为5部分:a.抗原包被技术,b.提高 ELISA 的灵敏度,c.提高 ELISA 的特异性,d.ELISA 的实验设计与理论,e.ELISA 的应用.从中可以看出 ELISA 的进展趋势.

摘要:对三链核酸的历史发展进行了简单的回顾.对三链 DNA 的形成条件、制备方法、结构测定手段和量子生物学方法分别加以评述,指出了近期及今后的研究趋向.简单地讨论了三链核酸可能的生物学作用,指出它具有特异性裂解正常 DNA分子的功能并可阻断、诱导基因转录,在治疗遗传性、病毒性疾病方面可能具有较大应用价值.

摘要:介绍了一种从一级结构预测蛋白质稳定性的方法.Guruprasad,Reedy 和 Pandit 对32种稳定蛋白质和12种不稳定蛋白质进行了统计分析,发现存在这样一些二肽,它们在稳定的和不稳定蛋白质中的出现频率是明显不同的.通过一系列的统计学计算处理,计算出所有400种二肽各自对蛋白质稳定性(或不稳定性)的影响大小,给它们设计了一个二肽不稳定性权值(DIWV).对一个给定的蛋白质,与它的序列长度相一致的这些 DIWV 的加和能帮助区分不稳定蛋白质和稳定蛋白质.这种方法对如何提高蛋白质的稳定性具有一定的指导意义.我们根据 Guruprasad 等人的方法计算了几个已知序列的蛋白质的稳定性指数,并由此推出它们的稳定性.

摘要:介绍了一种双球形人工模型膜系统.提供了研究跨两个双层膜之间细胞连接重组和通道活性的机会.通常研究通道性质和膜重组所使用的脂质体和板形膜仅仅是一个细胞的双层膜模型,而此系统则为两个相邻细胞间的联接模型.这里报告了该系统的制备和在胞间通道研究中的应用.

摘要:蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTPP)能特异地催化蛋白质酪氨酸残基的脱磷酸化反应.它是一个由很多结构相关的酶组成的家族.比较氨基酸的序列发现 PTPP-1B和跨膜蛋白 CD45 的胞内区有结构相似性.现已证明 CD45 确实具有内在 PTPP活性.通过研究 CD45 在淋巴 T 细胞中的功能,揭示了一个新的信号传导机制.蛋白质酪氨酸残基的脱磷酸化在这一信号传导途径中起着关键性作用.

摘要:应用重组质粒在大肠杆菌中表达人乳头瘤病毒(HPV)16 型 E7 基因.以所产生的 E7 融合蛋白为抗原免疫家兔,制得抗 E7 蛋白抗血清.在子宫颈癌组织切片中用此抗血清作免疫组化染色(胶体金标记染色法).在光学显微镜下可观察到癌细胞中存在 E7 抗原黑色颗粒,位于细胞核内.主要附着于核膜,可证明 E7 基因在 HPV16 感染的子宫颈癌细胞中有强烈表达;提示 E7 基因可能即为 HPV16的癌基因.

摘要:主要研究了蓝绿藻污棕席藻(Phormidium luridum)别藻蓝蛋白在不同 pH值条件下的吸收光谱和共振拉曼光谱.发现低聚化的结果导致了三聚体别藻蓝蛋白 650nm 特征吸收峰的消失和一些共振拉曼带强度和位置的移动.结果表明在低 pH 值作用下的低聚化的别藻蓝蛋白中藻蓝胆素发色团分子的构象和自由胆素分子类似,比三聚体的别藻蓝蛋白的发色团分子更趋于卷曲,折叠的构象态.而三聚体的别藻蓝蛋白,主要的拉曼带 1645cm^-1是其发色团分子构象处于更线性延展的标志,其光谱行为和吸收光谱 A_vis/A_uv所表征的发色团分子构象的结果相一致.

摘要:用高效蛋白层析柱纯化破伤风毒素的 B 片段,用膜片箝(patch clamp)技术证明纯化的 B 片段于人工磷脂膜上能够形成离子通道.在中性和酸性 pH 时形成离子通道的几率很小,在有 pH 梯度存在的情况下却较容易测到通道活性.形成的离子通道的电导系数为2.3pS. B 片段形成的离子通道允许 K⁺双向通过.离子通道打开的持续时间一般在20—120ms之间,多为20—40ms 和 100—120ms;闭合持续时间一般在20—40ms 间,多为20ms.表明通道的开和闭非常频繁.

摘要:首次采用新技术双水相萃取方法作为鸭血清胆碱酯酶(EC.3.1.1.8 CHE) 纯化的第一步,后经 DEAE-Sephadex A50,sephadex G200 柱层析,获得电泳纯鸭血清胆碱酯酶,提纯倍数1018倍,酶活力回收43.4%,比活274.9U/mg。鸭血清胆碱酯酶性质研究表明:此酶是糖蛋白和酸性蛋白水解酶,等电点 4.2 左右,最适 pH7.5 左右;对底物碘化硫代丁酰胆碱的 K_m=9.8×10^-5mol/L;SDS-PAGE 电泳和聚丙烯酰胺梯度电泳表明,鸭血清胆碱酯酶以相同亚基组成的不同聚合体形式存在,亚基分子量 78000,具有完整的酶活性.不同聚合体带电状态相同.

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摘要:介绍一种改进的神经突触膜(SPM)的制备方法.采用此方法,可简化制备过程,缩短制备时间,提高 SPM 产率,特别是可以完全排除胞液对 SPM 制备物的污染.

摘要:将抗原性很弱的半抗原 AAP 与牛甲状腺球蛋白偶联,采用淋巴结免疫法制得免抗 AAP 抗体,效价为1:13600.AAP 分子结构中没有可与 ¹²⁵I发生反应的酪氨酸或组氨酸残基,我们用3-(4-羟苯基)丙酸-N 琥珀酰胺酯做连接剂,通过酰氨键将酯连在 AAP 肽的末端氨基上,再将 ¹²⁵I 标记在酯的羟苯基的2,5位置上,成功地建立了 AAP 放射免疫分析法.

摘要:建立了薄层扫描测定寡核苷酸含量的新方法.与传统方法相比,该方法具有简单、微量、样品间无交叉污染等优点,该方法的线性方程 Y=-155.7+0.1428X),相关系数(r=0.9989),线性范围(10—3000ng),平均回收率(97.33%)及平均变异系数(5.5%)均属优良.

摘要:介绍了一种同时测定组织中氧化型谷胱甘肽(GSSG)和还原型谷胱甘肽(GSH)的荧光方法,应用邻苯二甲醛作为荧光试剂,GSH 和 GSSG 的标准曲线(2—10μg)均呈线性关系.测定了17例正常人肺组织及肺癌组织胞浆和线粒体内GSH 含量的亚细胞分布,本法简单、灵敏、重复性好、回收完全,比高效液相层析法容易推广.

摘要:对四个多位点小卫星探针 33.6,33.15,α珠蛋白-3’HVR 和 M13用于家禽的DNA 指纹分析的可行性进行了探讨,较详细地报导了用不同探针在鸡、鸭、鹌鹑上产生 DNA 指纹图的方法.结果表明,用我们所采用的方法,四个探针都能在鸡、鸭、鹌鹑上产生信息量大、分辨率较高的 DNA 指纹图.

摘要:以生物素标记的单链 DNA 为探针和 mRNA 液相杂交,再由带抗生物素蛋白的磁珠捕获已杂交的 mRNA,建立了快速、简便捕获特异 mRNA 的方法.磁珠的捕获率为 70.4%,洗脱率为 78.6%,mRNA 的总回收率为 55.2%.

摘要:曾使用 PCR-RFLP 方法分析过 c-Ha-ras 癌基因第12密码子的点突变.因N-ras 基因第12位密码子、K-ras 基因第12和13位密码子无已知的限制性内切酶的酶切位点,不能使用 PCR-RFLP 方法分析这些位点的突变.在 PCR 引物的3′端引入一个误配的碱基使之正好成为某限制性内切酶的酶切位点,这样便能使用PCR-RFLP 技术分析 c-Ha-ras 基因第61位、N-ras 基因第12位、K-ras 基因第12和13位密码子的点突变.

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