1995, 22(4):295-300.
摘要:大肠杆菌的分泌蛋白定位于内膜、外膜、周质空间和胞外环境,它们在N端或C端带有一定的结构包含着分泌信号,这两类分泌蛋白在各自特定的一组蛋白因子的协助下跨越内膜,再通过目前尚不清楚的方式实现其最终定位.N端带有信号肽的分子在跨越内膜时得到Sec家族蛋白因子协助,信号肽在跨膜过程中可能被切除,该过程由ATP和电化学势提供能量.C端带分泌信号的分子主要受到Hly家族分子协助,一次穿过内膜和外膜而不经过周质空间.
1995, 22(4):300-303.
摘要:CpG双核苷酸中的胞嘧啶甲基化和去甲基化在哺乳动物的基因表达中有重要的调控作用.哺乳动物基因组中有两类启动子:CpG岛启动子和CpG缺乏启动子.两种蛋白质因子通过与甲基化CpG的相互作用影响基因表达,CpG岛在基因组分析中也有广泛的用途.
1995, 22(4):303-307.
摘要:载脂蛋白(apolipoprotein,apo)A-Ⅰ是一种重要的血浆蛋白,其基因表达具有明显的组织特异性、种属特异性和发育阶段特异性,Apo A-Ⅰ基因5'调控区的肝细胞特异性增强子等顺式作用元件同ARP-Ⅰ、HNF-4、RXRα等反式作用因子相作用,调控该基因的特异性表达.
1995, 22(4):317-322.
摘要:交互网络(Internet)的发展为联网的计算机用户之间进行信息交流提供了有效途径.就分子生物学家而言,他们不仅可以利用电子邮件系统发送和接收信息,而且更重要的是能够存取大量的分子生物学数据库和软件.利用Internet可以开展多种序列分析作业,包括序列数据库的类似性检索、基因编码区鉴定和蛋白质二级结构分析等.一个数据库,例如GenBank,可以通过多种方式来存取:a.电子邮件文件服务器,b.文件传送协议(FTP),c.Gopher,WAIS或WWW等服务器-客户机(Server-Client)系统.专为分子生物学家设计的BIOSCI电子公告牌为研究人员开展学术讨论、寻求别人帮助和与数据库人员交流提供了极大的方便.
1995, 22(4):322-326.
摘要:综述了内含子在转基因动物基因表达中的作用,对内源性内含子和异源内含子对转基因表达的影响进行分析,讨论了内含子提高转基因动物基因表达效率的三种可能机制,并指出在表达载体构建中应考虑到内含子的重要性.
1995, 22(4):327-330.
摘要:结合自身研究工作,综述了近5a(年)来蛋白质印渍术广泛应用于蛋白质和肽序列自动分析、临床诊断药盒、超微量分离分析、抗体生产等方面的进展.
1995, 22(4):330-334.
摘要:利用真核基因表达调控的原理,以pSV2-dhfr为起始材料,构建了两个通用的真核质粒表达载体pMAML1-dhfr和pMAML2-dhfr,它们包含人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子调控元件,由两个转录方向相同或相反的表达单元组成.以荧火虫荧光素酶基因为报道基因,β-半乳苷酶基因为内对照,借助COS-7短暂表达系统,研究了它们对荧光素酶表达的影响,并比较了它们与出发载体pSV2-dhfr的相对强弱.
1995, 22(4):337-340.
摘要:采用马来酰亚胺标记完整的大脑皮层细胞,观察由低氧引起的ESR谱线的变化及脑细胞脂质过氧化程度,低氧引起细胞过氧化物生成增加,膜蛋白构象改变.金属硫蛋白(10-5mol/L)能明显抑制过氧化反应,具有一定的抗氧化作用.并对实验的分子机理进行了简要的讨论.
1995, 22(4):340-345.
摘要:经氰尿酰氯和对硝基苯碳酸酯活化过的甲氧基聚乙二醇分别用来对枯草杆菌蛋白酶进行化学修饰.修饰后的酶在水溶液和有机溶剂中均保持活性.酶在水溶液里的kcat增加,Km不变.酶对温度和pH的稳定性都显著升高,但最佳反应温度不变.
1995, 22(4):345-349.
摘要:建立了一种亲和层析纯化肌质网Ca2+-ATP酶的方法.用非离子型去污剂C12E8 溶解肌质网,再通过反应红-120琼脂糖亲和层析柱使肌质网Ca2+-ATP酶纯度从粗品中的65%提高到99%,并具有较高ATP水解活性.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,为电泳纯.
1995, 22(4):349-352.
摘要:采用酸处理Sepharose 6B亲和层析和Sephacryl S-200凝胶过滤,首次从中药北寄生中分得一种有毒凝集素,称为北寄生凝集素(Viscum coloratum lectin,VCL),是一种高毒性的植物毒蛋白,对小鼠静脉给药的LD50为4.4μg/kg,其粗提物也具有很强的毒性,对小鼠腹腔给药的LD50为0.2g/kg,分子量52 000,等电点10.5.
1995, 22(4):352-354.
摘要:以3d龄Sprague-Dawley大鼠腹腔注射苯丙氨酸(Phe)诱导高苯丙氨酸血症,荧光法测定大脑皮层及其突触体中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量;Y型电迷宫法测其学习记忆能力.结果显示:高苯丙氨酸血症大鼠大脑皮层NE、DA及5-HT含量降低38.6%~67.4%,突触体中NE、DA和5-HT含量降低51.9%~70.2%,学习记忆能力明显低于对照组.结果提示,苯酮尿症智力障碍可能与大脑皮层及其突触体中某些单胺类递质含量降低相关.
1995, 22(4):355-357.
摘要:采用地高辛标记探针,以核酸杂交法检测人γ型基因工程干扰素(IFN-γ)制品中残余DNA含量,结果表明,自制的二组DNA标准品相应量间显示的色斑相差悬殊,提示高蛋白含量对痕量残余DNA的检测干扰较大,添加IFN-γ的DNA标准品比纯DNA标准品更合理,以此测得各样品均符合WHO要求(<100pg/剂量),方法敏感性为4pg.
1995, 22(4):357-361.
摘要:用水稻黄化苗作实验材料,经蔗糖不连续梯度纯化细胞核、琼脂糖包埋、蛋白酶消化释放DNA,脉冲交变电泳显示所得DNA样品分子量在200kb至3Mb之间,其中大量集中在2.2Mb处.所得DNA容易被多种内切酶消化和连接,可用于构建水稻YAC文库和大尺度物理图的研究.
1995, 22(4):361-366.
摘要:序列搜索算法由三部分组成:搜索过程、搜索得到多肽的各氨基酸残基的评分及两端(N端、C端)搜索得到的多肽的合并过程.通过若干实际多肽质谱的解析,结果表明,该算法对多种序列专一性离子并存的未知多肽质谱的解析,可获得较满意结果.尤其是它的评分方式及标准,比较适合多肽质谱图的实际情况,可最大限度地判断解析结果的准确度,为从事用质谱测定多肽一级结构的分析工作者提供了一比较简便且可靠的手段.也为质谱法快速测定蛋白质或多肽序列及其在生物学中的普及提供了一条方便之路.
1995, 22(4):366-370.
摘要:采用新型物理分离技术──超临界CO2萃取法,提取天然蛋黄粉中的磷脂.在40MPa,先去除蛋黄粉中甘油三酯和胆固醇,再萃取磷脂.结果显示,磷脂纯度为95%,N/P比值为1.003,λmax=214nm,薄层层析显示磷脂着色点清晰,并去除了绝大部分甘油三酯和胆固醇.此法操作简单、产品质量高、安全和不污染环境,还可得到天然纯蛋黄油和蛋白.
1995, 22(4):370-373.
摘要:获得了抗促甲状腺激素(TSH)单克隆抗体杂交瘤细胞20株,其中T74A10小鼠腹水滴度为1:50 000,亲和常数为7.15×109L/mol,T71B11小鼠腹水滴度为1:150000,亲和常数为8.75×109L/mol.两个抗体与人绒毛膜促性腺激素(HCG)、促卵泡激素(FSH)和促黄体生成激素(LH)的交叉反应分别小于1.1×10-6%、0.01%和0.016%.将T74A10和T71B11应用于TSH免疫放射分析中,得到了满意的结果.
1995, 22(4):374-376.
摘要:用定点突变法分别得到了两个人白细胞介素-2(IL-2)的部分拮抗剂15Val-IL-2和126Asp-IL-2以及一个为IL-2受体α亚基结合缺陷型的突变体62Leu-IL-2,当将15Val-IL-2或126Asp-IL-2与62Leu-IL-2共同保温时,62Leu-IL-2的活性受到明显抑制,对此现象机理的分析表明15Val-IL-2或126Asp-IL-2可用于IL-2受体亚基结合缺陷型突变体的初步鉴定.同时,这一思路在其它受体-配基系统中具有一定的适用性.
1995, 22(4):377-379.
摘要:高压静电场下盆栽水萝卜、使用含 32P培养液和由8种无机离子组成的培养液,测试 32P的放射强度分布和8种无机元素的分布,结果在土壤和培养液上层 32P的放射强度分别比对照高15.19%和63.73%,下层分别比对照低18.39%和29.05%.静电场下生长在含 32P土壤中的水萝卜叶片中 32P放射强度比对照高66.57%,而根部较对照低8.27%.在静电场作用下,培养液中无机离子向电场的正极方向移动(上层),而对照呈相反的分布趋势.这说明静电场促进植物对离子的吸收是与静电场作用下的离子移动有关.
1995, 22(4):380-382.
摘要:通常,逆转录PCR(RT-PCR)需要高质量的mRNA,操作过程复杂,效率低且易受到RNase的破坏,为了简化操作,提高效率,用10%甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞,以Np-40渗透化处理细胞后做RT-PCR,获得了大约350bp的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段,与用同一对引物得到的常规RT-PCR扩增产物一致.这项技术可用于获得特定结构基因片段,连结并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等.
1995, 22(4):382-383.
摘要:考马斯亮蓝是常用的聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳的染料,利用硝酸纤维素膜(NCF)对染料的吸附作用,将低浓度的考马斯亮蓝(0.025%)染色液直接对NCF上的转移蛋白带进行染色,经实验反复验证.它是一种较好的NCF上转移非特异性蛋白带的染色方法.
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