1996, 23(4):290-293.
摘要:血小板生成素(TPO)是最近被描述的一种新型细胞因子,相对分子质量在35×103以上,是一种糖蛋白.人和鼠TPO成熟蛋白分别由332和335个氨基酸残基组成.TPO的受体与造血生长因子受体超家族成员c-Mpl相关.TPO不仅对巨核系祖细胞的增殖、分化具有明显的调控作用,而巨对血小板的生成同样具有促进作用.
1996, 23(4):293-297.
摘要:一氧化氮合酶(NOS)是一氧化氮(NO)生物学与医学研究的重要内容.近年来,对NOS酶本质及其生化与分子生物学特性甚至某些分子遗传学方面的认识都在迅速发展和深化.研究表明,干预NOS-NO途径的某些环节,如酶激活、NO合成、释放与转运甚至有关酶的编码基因及其表达,将为某些临床问题的解决提供新的思路和手段.
1996, 23(4):297-301.
摘要:反义RNA技术在植物基因工程领域中的应用包括:a.番茄和其他水果的成熟控制;b.植物的抗病性;c.改变花卉的颜色;d.植物淀粉合成的控制;e.油料植物种子中脂肪酸合成的控制;f.杂交种子生产中雄性不育性的控制;g.其他.
1996, 23(4):301-304.
摘要:制备高活性的真核蛋白,必须使用哺乳动物细胞,痘苗病毒为这一工作提供了简便、实用的工具.痘菌病毒宿主范围广,无致癌性,插入长达20多kb的外源基因后仍有感染性,能够高效表达外源蛋白,有效地加工表达产物.而且,痘菌病毒的表达产物可刺激机体免疫系统产生良好的体液免疫和细胞免疫.利用这些特点构建成的哺乳动物细胞高效表达系统将是基因工程药物和基因工程疫苗的有效工具.
1996, 23(4):304-307.
摘要:近几年,国际上肽库技术得到了迅速的发展,在抗原决定簇的定位及分子识别方面积累了大量的数据.就近3年来蛋白质分子识别方面的观念和认识上的深化进行了综述:a.蛋白质间的相互作用是少数几个关键残基的弱相互作用提供了大部分结合能;b.这种相互作用可以用小肽来模拟.因此通过研究小肽片段的特异性相互作用,可以揭示蛋白质间相互作用的本质,为小肽分子药物和疫苗的设计,乃至复杂超分子体系的研究提供了理论基础和实验依据.
1996, 23(4):308-312.
摘要:聚腺苷二磷酸核糖基聚合酶(poly (ADP-ribose) polyerase, PARP)是存在于多数真核细胞中的一个蛋白质翻译后修饰酶,它可催化组蛋白H1等重要核蛋白及它自身的聚腺苷二磷酸核糖基化作用.细胞受到外界损伤因子作用时, DNA发生链断裂,PARP结合到DNA断裂口,其催化活性被激活,修饰受体蛋白,进而引发一系列级联反应.这种性质使PARP有可能作为细胞内的分子感受器和传感器,启动细胞内对损伤作出反应的信号传导机制,从而根据细胞受损程度决定细胞的命运:修复或是死亡.
1996, 23(4):316-318.
摘要:在高等生物中含有约100000个不同的基因,其中仅有15%的基因在任何个体细胞中均表达.因此分离特异的目的基因便显得十分重要.差异展示是通过部分扩增mRNA的逆转录产物、经测序胶电泳,分离到差异性表达的基因.它与消减杂交相比是分离特异表达基因的更有效的手段.虽然这种方法在实际运用中存在着这样或那样的困难,但随着对这种技术的不断改进,它将会有越来越广泛的用途.
1996, 23(4):318-322.
摘要:近年来,一种诱导免疫应答的新手段─—基因免疫,正在引起人们越来越多的关注.所谓基因免疫,是将含有编码序列及必要表达调控元件的质粒DNA,直接导入动物组织,经诱导动物免疫系统对编码序列所表达的蛋白质发生免疫应答,达到免疫的目的.文章介绍了基因免疫的基本方法,综述了这一新兴领域中涉及传染病、肿瘤、移植等方面的研究成果及存在的问题,并展望了研究前景.
1996, 23(4):322-325.
摘要:胞程序性死亡有别于一般意义上的死亡──坏死,所以对其判定显得格外重要.国内外目前常从细胞形态、细胞膜完整性、DNA及某些重要生化指标等方面进行判定.
1996, 23(4):325-329.
摘要:Calponin为一种平滑肌特有的调控蛋白, 分子克隆的证据表明, 它具有两种亚型, α型和β型分别由292和252个氨基酸组成它能与肌动蛋白结合, 抑制肌球蛋白ATP酶活性和平滑肌收缩其与肌动蛋白结合域有38个氨基酸残基(第145~182位), 丝氨酸175在调宁蛋白与肌动蛋白的相互作用中起重要作用, 它还能与钙调蛋白结合, 呈钙依赖性, 其结构域在第52~144位残基调宁蛋白的机能受磷酸化与脱磷酸化的调节.
1996, 23(4):329-333.
摘要:对近几年来应用计算机模拟和分子生物学定点突变技术研究乙酰胆碱酯酶的结构与功能关系的进展进行了综述,对不同抑制剂的抑制作用机理及重活化药物对不可逆抑制剂有机磷酸酯磷酰化酶的重活化作用机理研究进展也进行了综述.
1996, 23(4):334-337.
摘要:用羟基磷灰石柱亲和层析法制备了高纯度的缺脂泛醌细胞色素c还原酶.脂的缺失使该酶活力丢失,部分细胞色素(约52.8%细胞色素b和82.5%细胞色素c1)呈现还原状态.将缺脂泛醌细胞色素。还原酶与磷脂重组,可恢复其活性,同时那些呈还原状态的细胞色素也恢复到氧化态.此结果表明如此制备的缺脂泛醌细胞色素c还原酶仍保持着活力所必需的构象状态,细胞色素氧化还原状态随脂缺失的变化反映了脂与蛋白的相互作用.
1996, 23(4):337-342.
摘要:经超声破碎、硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、磷酸钙胶层析和离子交换层析等步骤, 从Comamonas testosteroni菌株中获得了SDS-PAGE单一条带, 相对分子质量为62×103的间羟苯甲酸4-羟化酶比活提高21倍, 产率为30%.此酶为FAD加单氧酶, 催化间羟苯甲酸转变为3,4二羟苯甲酸.
1996, 23(4):342-345.
摘要:用DEAn-52阴离子交换层析, 高压液相凝胶过滤层析两步法, 从人胃粘膜中分离纯化到分子质量为67ku的胃蛋白酶原. 此蛋白具有较强的抗碱性,水解活性在pH10.8处理后仍无明显变化, 其水解活性的最适pH为1.8, 比活性为5.96U/mg.
1996, 23(4):346-348.
摘要:用DNA解旋荧光检测法(FADU)研究了黄芪总黄酮(TFA)对γ射线和H2O2所致V79细胞DNA链断裂的防护作用. 结果表明TFA对这两种损伤因子所致的DNA损伤均有不同程度的防护作用, 当TFA浓度达到0.4g/L和0.6g/L时, 分别对H2O2和γ射线所致的损伤有保护作用(P<0.05), 而浓度增至0.8g/L和1.2g/L时, 分别对两种因素所致的DNA链断裂损伤有非常显著的防护效果(P<0.01), 对H2O2的防护效果优于对γ射线.
1996, 23(4):352-355.
摘要:分离及纯化兔肝金属硫蛋白.制备去金属金属硫蛋白、锌7与镉7金属硫蛋白.在不同pH条件下,比较后二者清除羟自由基能力;在pH6条件下,比较锌7-金属硫蛋白与有关蛋白和无机锌盐清除羟自由基效果.结论是在近生理pH条件下锌7-金属硫蛋白清除羟自由基能力远强于镉7-金属硫蛋白.金属硫蛋白清除羟自由基的能力主要来源于蛋白中处于还原态的流基.
1996, 23(4):356-359.
摘要:介绍一种鉴别SOD类型的方法─—聚丙烯酰胺凝胶电泳的定位染色法. 由于不同类型的SOD对抑制剂的表现各异, 电泳后的凝胶经不同的抑制剂处理, 染色, 结果展示在凝胶上, CuZn-SOD酶带在H2O2或CN-的作用下消失, Mn-SOD在CHCl3-CH3OH作用下消失, Fe-SOD在H2O2或. CHCl3-CH3CH2OH作用下失活, 从酶带消失或存活的情况, 可以判断SOD的类型.
1996, 23(4):359-364.
摘要:滤纸条半干技术在保证分辨率的前提下, 将凝胶电泳的电泳时间从原来的2~4h缩短到40~50min, 并简化了操作, 节省了实验费用, 不需配制大量的缓冲液. pH4.8较pH8.9阳极电泳提高了酸性蛋白质的电泳分辨率. pH5.5阴极电泳用于分离碱性样品可以得到很好的效果.
1996, 23(4):364-369.
摘要:为克隆肺腺癌分化相关基因, 采用诱导分化与消减杂交相结合的策略, 建立了全反式维甲酸(RA)诱导前后人肺腺癌细胞系的cDNA消减文库, 得到124个cDNA消减克隆. 经加减法杂交差异筛选、DNA和RNA印迹、cDNA全序列测定和生物学功能分析, 分离到3个在人肺腺癌细胞系分化过程中由RA激活而特异表达的新的cDNA序列这一策略和技术路线适用于分离细胞中呈过量表达或表达抑制基因的cDNA克隆, 并具有反映细胞分化过程中基因表达动态变化特征和相对简便适用的特点.
1996, 23(4):369-373.
摘要:固定化Mucor miehei脂肪酶可催化有机硅醇和脂肪酸的酯化反应.对固定化酶用量、脂肪酸链长、不同有机硅醇底物、有机溶剂极性和水含量等影响因素进行了初步研究.
1996, 23(4):373-375.
摘要:应用酸性、中性交互提取法从人胚骨中提取Ⅰ型胶原,经SDS-PAGE电泳,氨基酸分析和免疫学方法鉴定.结果表明所提胶原电泳区带与Ⅰ型标准品相同,环状沉淀反应阳性,氨基酸分析甘氨酸占1000个氨基酸总残基的1/3,羟脯氨酸与脯氨酸之比为0.65,符合Ⅰ型胶原特征,并显示有较高的纯度,可用于胶原制品的制作.
1996, 23(4):376-378.
摘要:构建了以癌胚抗原(CEA)基因启动子控制的HSV-TK和ECCD的表达质粒PCEA-TK和pCEA-CD. 将它们分别与pSV2-neo共转染人结肠癌细胞株LoVo和人宫颈癌细胞株HeLa. G418筛选得到细胞克隆LoVo/CEA-TK、toVo/CEA-CD、HeLa/CEA-TK和HeLa/CEA-CD. 与野生型LoVo细胞相比, LoVo/CEA-TK和LoVo/CEA-CD形态无明显改变, 生长曲线也相似, 但对GCV或5-FC的细胞毒的敏感性分别提高了2000倍或700倍.而HeLa/CEA-TK(或HeLa/CEA-CD)仍对低浓度GCV(或5-FC)不敏感. 以上结果显示了应用组织专一性表达的自杀基因治疗人结肠癌的可能性.
1996, 23(4):379-380.
摘要:人红细胞NADH-细胞色素b5还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类, 其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症. 目前, 主要通过分光光度法测定b5还原酶活性. 我们将b5还原酶抗体点于硝酸纤维膜上, 以此捕获并富集红细胞胞浆b5还原酶. 有b5还原酶活性的斑点用噻唑蓝染色. 此法简单直观, 可用于b5还原酶的定性和半定量测定, 为遗传性高铁血红蛋白血症的诊断提供了一种新的实验手段.
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