摘要:胞内抗体技术是近年来随抗体工程技术发展起来的一项新型基因治疗方法．它将单链抗体表达于非淋巴细胞内，并使之定向分布于细胞核、细胞浆或内质网等部位，特异性阻断、干扰分布于该部位的大分子物质生物活性或加工分泌过程．实验证明该技术能抑制生长因子受体的表达，灭活原癌基因蛋白，抑制病毒复制．在生物科学及医学研究中具有很大应用潜力．

摘要:HIV的长期感染, 使得患者体内活性氧大量积累, 形成了氧胁迫. 各种活性氧介导的氧胁迫, 能够激活转录因子NFκB, 从而刺激并促进HIV的基因表达. 同时氧胁迫还使得HIV感染者机体功能陷入紊乱, 表现为DNA严重损伤, Ca²⁺失去细胞内外的平衡, 酶系统遭到破坏, 能量代谢受阻等诸多方面. 应用抗氧化剂治疗艾滋病仍处于探索阶段.

摘要:总结了近年来关于蛋白质电导率的理论研究工作，简要介绍和评述了过去已有的对蛋白质电导率的研究工作，讨论了对蛋白质分子作完整分子的电子结构和理论电导率计算的近似方案和计算方法，由计算结果总结出蛋白质的电子结构和理论电导率的基本特性．最后，根据对胰岛素的计算结果提出了胰岛素及其受体在跨膜信号传递中的电子通道模型．

摘要:菌紫质(BR)是嗜盐菌紫膜中的唯一蛋白质，野生型的BR分子含有248个氨基酸残基，其中一个视黄醛通过希夫碱基连结在第216位赖氨酸上，它具有质子泵的功能．光照下，BR进行光循环，光循环又与质子泵过程相关联．菌紫质的结构和功能方面的研究已有很大进展，但其光循环途径和质子泵的机理还不太清楚．文章概述了近年来对菌紫质结构，光循环和质子泵机理研究的进展，尤其对争论较大的菌紫质光循环途径的四类模型作了较详细的介绍．

摘要:近年来，胰岛素蛋白质工程研究进展很快，主要介绍具有临床意义的速效长效和高效胰岛素研究概况，包括分子设计基础，生物活性和应用前景等.此外，还讨论了胰岛素的受体结合部位及胰岛素与其受体相互作用的研究近况．

摘要:超氧化物歧化酶(SOD)是一种催化超氧化物阴离子自由基发生歧化反应, 生成氧和过氧化氢的金属酶. 按其结合的金属离子, 区分为Fe-SOD, Mn-SOD和CuZn-SOD三种. Fe-SOD主要存在于原核细胞中;Mn-SOD在原核和真核细胞中都存在;CuZn-SOD主要存在于真核细胞中. Fe, Mn-SOD的一级结构, 空间结构及其性质很相似, 来自一个共同的祖先; CuZn-SOD的结构与前两者相差较大, 是在以后的发展中单独进化的.

摘要:DNA损伤是引起基因突变，导致细胞恶性转化的重要原因．DNA损伤的修复过程非常复杂，是与细胞周期调节、DNA复制和DNA转录等生命活动紧密相连的．首先DNA修复需要细胞周期停滞，避免DNA损伤进入子代细胞．其次，参与DNA转录的某些基因产物参与DNA损伤的识别，有利于转录链的优先修复．最后，DNA修复系统NER、MMR参与损伤修复．上述DNA修复过程任何环节的异常，都将造成DNA修复功能减弱，导致某些功能基因突变，从而导致细胞的恶性转化．

摘要:在细胞周期调控研究中, 对cyclin-CDK在细胞周期调控中作用机制的认识已获得突破性进展. 近几年来, CDK抑制因子(CDIs)家族成员──p16和p21的分离和研究, 表明细胞周期蛋白(cyclin)与CDI在调节CDK活性方面形成了极为复杂的调控网络, 从而控制细胞的增殖与分化, 并与肿瘤的形成与发展相联系.

摘要:介绍了近几年基于知识的蛋白质三维结构预测方法及其进展．目前，基于知识的结构预测方法主要有两类，一类是同源蛋白模建，这种技术比较成熟，模建的结果可靠性比较高，但只适用于同源性比较高的目标序列的模建；另一类方法即蛋白质逆折叠技术，主要包括3D profile方法和基于势函数的方法，给出的是目标蛋白质的空间走向，它主要可用于序列同源性比较低的蛋白质的结构预测．

摘要:制备了R-藻红蛋白(R-PE)、C-藻蓝蛋白(C-PC)及变藻蓝蛋白(APC)的单组分累积LB膜及三组分复合累积LB膜. 吸收及荧光光谱测定表明三种蛋白的LB膜的光谱重叠性质与他们在水溶液中的性质相同. 结构测定表明, 三种蛋白在其LB膜中排列有序, 且由它们组装的复合累积LB膜结构类似于藻类植物中的藻胆体结构. 通过稳态荧光光谱及其光谱解叠, 观察到了三种蛋白在复合累积LB膜中的激发能量传递现象. 根据给体荧光峰的猝灭, 计算出在复合累积LB膜中从给体R-PE经C-PC到受体APC的能量传递效率为51%.

摘要:研究藻胆蛋白中藻胆素构象的变化对藻胆素光谱性质的影响，在光合作用原初过程的研究中有重要意义．由于四吡咯发色团构象的非同源性随机涨落，藻胆素的电子激发态能级呈类Boltzmann分布；藻胆素的电子－振动吸收跃迁谱带线型因子可描述为与构象随机分布因子有关的卷积形式；藻胆素构象的随机分布导致电子－振动吸收跃迁谱带的不对称增宽．

摘要:用凝胶阻滞分析的方法, 发现鼠T淋巴细胞系CTLL-2在白细胞介素-2(IL-2)刺激下可活化一个DNA结合因子, 它与γ-干扰素活化序列(GAS)专一性结合, 命名这个DNA结合因子为白细胞介素-2活化核因子(IL-2-NAF).IL-2-NAF的活化非常迅速, 不需要新的蛋白质合成, 并且它的活化程度随着IL-2刺激细胞的时间的不同而发生相应的变化. 进一步研究表明, IL-2-NAF的活化过程是通过酪氨酸激酶的信号传递途径, 并且它本身的酪氨酸残基也被磷酸化, 酪氨酸残基的磷酸化为其结合DNA所必需. IL-4、γ-IFN刺激CTLL-2细胞不活化与GAS专一性结合的因子. 而在Hut-102细胞中, IL-2、IL-4均可活化GAS结合因子, 但活化程度较弱.

摘要:应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术, 测定了单个活细胞胞内游离Ca²⁺的动态变化与立体分布影像. 结果显示, 在37℃, Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下, C57BL/6J小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获得良好的标记效果. 相反, 若探剂浓度太高或负载时间太长, 胞内荧光强度太强, 影响在共聚焦显微镜镜下分辨细胞内结构. 因此用LSCM研究细胞内游离Ca²⁺变化时, 荧光探剂的负载应以获得最适荧光信号而不是以最大荧光强度为标准. 上述方法在其他如平滑肌细胞、卵母细胞中的测定亦获得满意的结果, 这对进一步研究各种生理和病理条件下细胞内Ca²⁺信号的动态变化、与跨膜Ca²⁺梯差的关系及对活细胞功能活动的调节提供了一种可行的、直观的研究手段.

摘要:用膜片钳连细胞电压钳法, 在培养的Wistar大鼠单个心肌细胞上记录了T-2毒素对B、L和T三型Ca²⁺通道单通道电活动的影响. 结果表明, T-2毒素浓度为10mg/L时, 心肌细胞B、L和T三型Ca²⁺通道均受到明显的阻滞, 其阻滞作用表现为使Ca²⁺通道的开放概率减小, 开放时间缩短, 关闭时间延长, 而对流过Ca²⁺通道的Ba²⁺流幅值无影响.

摘要:运用下列RNA二级结构预测算法:碱基最大配对方法、Zuker极小化自由能方法、螺旋区最优堆积、螺旋区随机堆积和所有可能组合方法与基于一级螺旋区的RNA二级结构绘图技术, 构建了RNA二级结构预测系统Rnafold. 另外, 通过随机选取20个tRNA序列, 从自由能和三叶草结构两个方面比较了前4种二级结构预测算法, 并运用t检验方法分析了自由能的统计学差别. 从三叶草结构来看, 以随机堆积方法最好, 其次是螺旋区最优堆积方法和Zuker算法, 以碱基最大配对方法最差. 最后, 分析了两种极小化自由能方法之间的差别.

摘要:以芹菜4.5SRNA为底物, 在pH5.0的条件下, 5种纯核糖体失活蛋白:天花粉蛋白、苦瓜子蛋白、肥皂草蛋白、丝瓜素毒蛋白和多花白树毒蛋白均显示出核糖核酸酶活性, 放射自显影图显示出它们对RNA分子中的各种碱基具有不同的敏感性.

摘要:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增了我国登革2型病毒E基因, 大小为1.29kb. 将扩增的E基因片段首先克隆到T载体(pBluescript ⅡKS⁺)中, 用PCR和限制性酶切分析鉴定出阳性重组子. 然后利用M₁₃通用引物直接对插入的E基因片段进行序列分析. 结果表明, 经限制性内切酶鉴定和DNA序列分析证明所克隆的序列与已报道的E基因序列是一致的.

摘要:从人左室心肌中成功纯化心肌肌钙蛋白T(cTnT). 经匀浆, 70℃加热处理, 咪唑盐酸透析, DEAE-纤维素层析, 100g心肌获取cTnT 5mg, 纯度为97.6%. 同时采用脾内免疫法, 免疫Balb/C小鼠, 经细胞融合, 筛选, 克隆化得5株稳定分泌抗人cTnT单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(G₃, G₈, G₁₀, A₅, A₇), 4株为IgM, 1株为IgG, 染色体数目92～110条. 腹水效价为3.2×10^-6～1. 6×10^-7.

摘要:分析了应用氨甲蝶呤（MTX-Agarose）亲和层析法提纯的鸡肝二氢叶酸还原酶的组成和性质.建立了用平面粒度胶等电聚焦法去除与酶紧密结合底物的方法．讨论了结合底物对酶构象研究的影响，并指出，用未完全去除结合底物的酶研究酶在变性过程构象变化会得到错误的结论．

摘要:从pHIG53质粒内切下人白细胞介素-2(IL-2)cDNA基因, 并经中间质粒pSP72转换成与pDOR-neo载体相匹配的酶切位点, 然后将IL-2cDNA定向连接入pDOR-neo载体, 构建成功人IL-2逆转录病毒载体, 经脂质体导入人骨肉瘤细胞系Ma中, 经G418筛选后测转基因肿瘤细胞培养上清中IL-2表达量, 每1×10⁵细胞24hIL-2表达量为50～800U, 为骨肉瘤的基因治疗创造条件.

摘要:从分泌抗癌胚抗原(carcinoembryoni antigen, CEA)单抗的杂交瘤细胞株C50中提取总RNA, 逆转录成cDNA, PCR扩增分别得到抗体轻、重链可变区基因, 再利用两对PCR引物合成和扩增得到全单链抗体基因. 将含轻、重链可变区序列的DNA片段克隆于含噬菌体基因Ⅲ的噬菌粒pCANTAB5. 重组克隆在噬菌体表面表达基因Ⅲ与单链抗体的融合蛋白. 表达具抗原结合活性的单链抗体的重组噬菌体可以通过亲和筛选的方法筛选得到并富集. 利用该方法我们可以从许多分泌不同抗体的杂交瘤细胞RNA中快速克隆和筛选功能性抗体可变区基因.

摘要:用高效液相色谱法测定超滤后血浆中的谷氨酰胺, 平均回收率为96.75%, 在130～1300μmol/L范围内呈线性关系(r=0.9906), 健康人正常值男性为(694.97±102.31)μmol/L, 女性为(623.79±99.27)μmol/L, 男女间值有显著差别(P＜0.05)该分析方法简单、迅速, 可用于外科肠道内营养的监测和对肠粘膜结构与功能的研究.

摘要:对传统构建重组杆状病毒的方法作了如下改进：先用磷酸钙共沉淀法单独将质粒DNA转进昆虫Sf细胞中，其中重组质粒采用聚乙二醇沉淀法纯化，12～24h后再用低剂量的病毒攻击细胞．改进后的方法简便、省时、经济、重组率高，适于一般实验室使用．