1998, 25(6):483-485.
摘要:基质结合区(matrix association regions,MAR) 是真核生物基因组中特有的一种参与基因表达调控和染色体动力学的顺式作用元件,也是真核染色体上的一种固有且各不相同的分子标记.通过体外(in vitro)或体内(in vivo)结合法可以得到与核基质特异性结合的MAR分子而构建MAR文库.体外MAR作为一种结构性的边界元件可用于染色体物理图谱的构建;而体内MAR作为某一组织中与核基质特异性结合的功能元件,则可用于研究已知基因的表达调控和染色体组织以及对新基因的分析.
1998, 25(6):488-492.
摘要:介绍了分子信标设计和分子信标核酸检测原理、技术特性和在基因突变大规模自动化检测中的应用. 分子信标是一种基于荧光共振能量转移现象设计的发卡型寡核苷酸探针,空间结构上呈茎环结构, 环序列是与靶核酸互补的探针,茎序列由与靶序列无关的互补序列构成,茎的一端连上荧光分子,另一端连上淬灭分子.通过空间结构改变决定分子信标发射荧光特性,从而对核酸进行定量检测. 分子信标技术具有操作简单、敏感、特异、可对核酸进行液相实时检测和对活体内核酸动态进行检测等特点,已应用于HIV辅助受体基因等基因突变的大规模自动化检测,是一种新型核酸定量检测技术.
1998, 25(6):492-496.
摘要:人雄激素芳香化酶与乳腺癌的发生和发展密切相关.综述了编码该酶的CYP19基因的结构、独特的组织特异性表达和调控CYP19基因表达的各种因素及其有关的调控机制.
1998, 25(6):496-503.
摘要:MAPK级联途径在真核生物细胞的信号传递过程中起着重要的作用.MAPK级联途径由MAPK、MAPKK和MAPKKK三类酶蛋白组成.这三类蛋白质的结构非常保守,通过磷酸化作用传递各种信号.在酵母和动、植物细胞中已经发现了一系列的MAPK级联途径成员,使真核生物的信号传递途径逐渐得到阐明.
1998, 25(6):503-508.
摘要:基因敲除技术的应用使学习、记忆分子机制的研究出现了新的突破.目前已报道了多种学习、记忆以及LTP、LTD有缺陷的基因敲除动物,发现多种基因在学习、记忆的形成过程中必不可少.然而,现有研究的一个较大问题是忽视了遗传背景基因在表型改变中的作用,被认为由突变靶基因造成的表型缺陷实际上可能是由背景基因而不是由突变基因造成的.要排除背景基因的作用,必须建立新的ES细胞,选择纯遗传背景的小鼠品系,并且在时间、范围和程度上对基因敲除进行精细的控制.
1998, 25(6):508-512.
摘要:水通道蛋白是对水专一的通道蛋白,它普遍存在于动、植物及微生物中,不同水通道蛋白之间具有类似特征.哺乳动物中水通道蛋白主要分为六类,分布于水分代谢活跃的器官中;植物除了质膜上水通道蛋白外,液泡膜也存在着水通道蛋白,它们在植物生长,发育及胁迫适应中起着重要作用.目前有关水通道蛋白的详细的结构和功能信息主要来自对红细胞膜上水通道蛋白的研究,它由同源的四聚体组成,每个单体具有独立的水通道功能,四聚体在膜上分布具有不对称性,在膜内侧四聚体呈伸展状态,在膜外侧形成大的中心空腔.
1998, 25(6):513-517.
摘要:RET是一个在转化中发生重排的原癌基因,且因此行为而得名.它编码细胞膜受体酪氨酸激酶,初步研究表明它介导的信号转导途径较为独特.RET基因突变与人类4种癌症的发生相关:甲状腺乳头状腺癌存在RET基因与其他基因多种重排;多发性内分泌腺瘤2型,家族遗传甲状腺髓样癌等存在7个位点点突变;先天巨结肠疾病与RET基因缺失相关.因此近年来备受关注.对Ret蛋白的结构功能,RET基因突变对Ret蛋白功能的影响及与人类相关疾病的关系作一综述.
1998, 25(6):517-522.
摘要:微芯片(有人称其为生物芯片biochip)是用硅、玻璃等材料,经光刻、化学合成等技术微加工而成的、大小1 cm2左右的芯片.它可以用来对生物样品进行分离、制备、预浓缩,还可以作为微反应池进行PCR(polymerase chain reaction)、LCR(ligase chain reaction)等反应.最为吸引人的是,芯片上制成多种不同的DNA阵列,即可用于核酸序列的测定及基因突变检测.对微芯片的制作、作用原理、性能及用途等进行了综述.
1998, 25(6):522-526.
摘要:二硫键抗体(dsFv)的概念最早出现于1990年,它是将抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的各一个氨基酸残基突变为半胱氨酸,通过链间二硫键连接抗体可变区(Fv)的片段抗体.通用的突变位点是重链的44位和轻链的100位或重链的105位和轻链的43位.dsFv最显著的优点是生化性质稳定,能够耐受环境条件的剧烈作用,在血液中的半衰期长达14 d以上,符合临床给药要求.动物实验显示,dsFv-毒素在不对动物造成毒副作用的情况下,可完全抑制肿瘤生长.
1998, 25(6):527-532.
摘要:计算诱发电位波形第一至第六次谐波的幅度和相位,把这12个参数作为判别分析的自变量.用32只正常眼、31只弱视眼和30只球后视神经炎患眼的诱发电位波形数据建立判别分析系统,再用另外32只正常眼、35只弱视眼和30只球后视神经炎患眼的诱发电位波形数据检验该判别分析系统的判别效果.
1998, 25(6):532-535.
摘要:化学合成两类去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的人工配体——半乳糖基白蛋白(GalnHSA)和半乳糖基多聚-L-谷氨酸(GalnPLGA), 并以 125I标记的去唾液酸胎球蛋白(ASF)为标准配体,测定了合成配体抑制 125I-ASF与大鼠肝细胞膜ASGPR结合的IC50值. 结果表明,Gal12HSA、Gal15HSA、Gal26HSA、Gal30HSA和Gal34PLGA均能够有效地抑制 125I-ASF与ASGPR的结合,且前者与ASGPR的亲和力随半乳糖基化程度的增加而增加. 这些合成配体来源丰富、制备简单,适合于作为药物或基因肝靶向运送的导向配体.
1998, 25(6):536-539.
摘要:用聚合酶链式反应(PCR)从人基因组DNA中扩增了人脑源性神经营养因子(hBDNF) cDNA和hBDNF成熟蛋白编码片段,分别克隆到pUC18中.经测序确认两个插入片段序列正确.hBDNF cDNA在CMV启动子控制下在NIH/3T3细胞中表达,用RT-PCR检测转染细胞确有BDNF mRNA存在.BDNF成熟蛋白编码序列在T7启动子控制下在E.coli中表达,SDS-PAGE表明,BDNF得到表达,以包涵体形式存在.
1998, 25(6):539-542.
摘要:在有机相酶促反应中,水含量是影响酶活力的关键因素.对异辛烷/正辛醇体系中柱状假丝酵母脂肪酶催化萘普森酯化反应中的水分调控技术进行了研究. 结果表明:水合盐对——Na2SO4·10H2O/Na2SO4对系统水分的变化具有有效的缓冲作用;非极性硅藻土吸附固定酶,使之对水分的敏感性得到缓解;另外,加入分子筛去除副产物——“水”可促进酯化过程的进行.
1998, 25(6):543-547.
摘要:建立一种高灵敏度的氯甲酸芴甲酯柱前衍生荧光检测反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸的方法.内标为己氨酸, 固定相为Shim-Pack CLC-ODS(M), 4.6 mm×150 mm, 填充料为5μm; 流动相采用二元梯度洗脱, A相为0.05 mol/L醋酸钠缓冲液∶水∶四氢呋喃∶冰乙酸(250∶100∶15∶2.2), B相为乙腈∶甲醇(4∶1).系统研究了pH值、反应时间、离子强度及衍生化试剂用量对衍生化反应的影响, 确定最佳反应条件和最佳色谱条件.方法的精密度为批内变异系数<4.6%,批间变异系数<6.1%;最低检出限(信噪比=2)为3.1 nmol/L;线性范围为50~1000 nmol/L, γ2=0.9992;平均回收率为97.1%.
郭大玮 , 郎海丽 , 徐晓莉 , J.C.J. EIKENBOOM , R.M. BERTINA
1998, 25(6):547-550.
摘要:采用多相缓冲系统,在成层胶T=5%,C=2.6%, 分离胶T=8%,C=5%的条件下用聚丙烯酰胺凝胶电泳对人类短串联重复序列(STR)DNA片段进行分离.其中,成层胶内主要缓冲成分为2-二羟乙基亚胺-三羟甲基甲烷(Bistris)、H2SO4及N、N-2(羟乙基)甘氨酸(Bicine) ; 而分离胶以Tris、H2SO4及2-二羟乙基亚胺-三羟甲基甲烷(Bistris)为主,构成多相缓冲系统.DNA片段在成层胶中被有效地压缩, 在分离胶内又可完全解压缩,使其按片段大小分离;从而达到提高分辨率的目的.
1998, 25(6):554-556.
摘要:以免疫家兔制备的抗人Ⅳ型胶原多抗包板,采用改良过碘酸钠法辣根过氧化物酶标记抗人Ⅳ胶原单抗,建立了一种血清Ⅳ型胶原的增强化学发光双抗夹心酶免测定法.实验结果表明方法较为灵敏、准确、稳定、特异,其最低检测限为30 μg/L,平均回收率为94.5%,批内和批间变异系数分别≤6.0%和11.6%.测定60例健康人,其参考值为160 μg/L,与进口的日本试剂盒相关性良好,因此可以作为临床血清Ⅳ型胶原放免测定法的参考替代方法.
1998, 25(6):560-562.
摘要:创伤后不同时期渗出液(wound fluid,WF)的质和量的变化,在很大程度上反映伤口组织的愈合进程.研究伤口不同天数的WF对小鼠伤口组织的成纤维细胞(mouse wound fibrolast,mWFb)体外增殖能力的影响,探讨伤口微环境WF在调控mWFb的增殖规律.用两种培养基进行检测:1640培养基-10% FCS(fetal calf serum 胎牛血清)-10% WF或1640-1% FCS-10% WF.发现第1、3、7天的WF能刺激mWFb增殖.在高浓度(10%)FCS条件下,9、11、15天WF对mWFb生长产生抑制作用.而同一WF在低浓度(1%)FCS时导致mWFb死亡.结果提示,在损伤后一周期间伤口微环境能刺激mWFb增殖,但伤后更长时间的WF使细胞生长受阻止.在创伤愈合晚期的微环境中可能存在一些生长抑制因子.
1998, 25(6):563-565.
摘要:从家蚕品种C108和大造后部丝腺提取的基因组DNA,用PstⅠ酶解后与自己设计的人工接头相连,并用与人工接头序列相匹配的选择性引物进行选择性PCR扩增(selective amplification).扩增产物经琼脂糖电泳检测显示,用SADF法在两品种中能检测到稳定的DNA多态性片段.
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