1999, 26(3):195-197.
摘要:C端酰胺化是许多神经内分泌多肽重要的翻译后加工过程,是在酰胺化酶的催化下分两步进行的,PHM和PAL分别催化这两步反应.PHM由两个结构相似的结构域组成,每个结构域均为九链β折叠组成的三明治样结构,分别由三个His或两个His和一个Met螯合一个Cu组成活性中心.在一个反应周期中,两个Cu分别独立地与抗坏血酸和分子氧发生单电子传递的氧化还原反应,最后完成多肽底物的α-碳的羟化反应.
1999, 26(3):197-199.
摘要:记忆的形成阶段包含着神经元突触的可塑性变化过程.近年来的研究表明,神经细胞粘附分子可同时增进突触的可塑性和维持突触结构的稳定性.许多研究证实神经细胞粘附分子对与学习和记忆相关的过程起着一定的调节作用.
1999, 26(3):199-201.
摘要:Rx (retinal homeobox)家族是新发现的一类与视觉神经系统发育密切相关的同源异型盒基因,调控眼基质、视泡、视网膜、前脑以及中脑部分区域的发育.Rx基因的研究将对视觉神经系统发育的调控机制提供新的认识.
1999, 26(3):205-208.
摘要:成骨蛋白-1(OP-1)又称骨形态发生蛋白-7(BMP-7),属转化生长因子β(TGF-β)超家族成员.重组人OP-1(rhOP-1)在体内和体外都显示了高效的骨诱导活性,可使多种实验动物的骨缺损满意愈合,有良好的临床应用前景.
1999, 26(3):209-213.
摘要:介绍了Apo-CaM、Ca2+-CaM以及CaM与其靶肽及拮抗剂复合体的空间结构.钙调素(calmodulin, CaM)作为细胞多功能的Ca2+受体,在细胞信号转导过程中发挥重要作用.近几年对它的空间结构有了较清楚的了解,使人们能够更明确地认识CaM的Ca2+激活及CaM与其靶酶的作用机制.
1999, 26(3):213-216.
摘要:zif268基因编码一转录因子ZIF268. 在发育的视皮层中,zif268基因的表达模式受发育的调节. 在具有正常视觉经验的视皮层中,zif268基因有较高水平的表达. 视觉废置后,视皮层内该基因的表达水平显著降低. 通过视觉刺激可显著增强该基因的表达. 有关zif268基因表达模式的研究对于阐明该基因在哺乳动物视觉系统中的生理功能起到借鉴的作用.
1999, 26(3):216-219.
摘要:凋亡的调控是细胞生理死亡和肿瘤发生的重要机制. 对各种刺激诱导下细胞凋亡机制的分析有助于深入了解肿瘤细胞生物学及发现新的治疗对策.凋亡调控基因BCL2家族成员可分为凋亡阻遏基因和凋亡促进基因.这些基因编码的蛋白质分子通过组成和/或影响同二聚体与异二聚体的不同比例而介导其对细胞存活的生物学效应.
1999, 26(3):219-223.
摘要:蛋白质C端测序是蛋白质化学与分子生物学中一门有重要意义的技术,由Schlack和Kumpf于1926年提出的(异)硫氰酸法在该领域发展迅速并占主导地位.对(异)硫氰酸法的反应机理,最新进展以及标准乙内酰硫脲氨基酸制备进行了较详尽的介绍.
1999, 26(3):223-228.
摘要:细胞外基质(ECM)是存在于细胞之间的动态网状结构,由胶原、蛋白聚糖及糖蛋白等大分子物质组成.这些大分子物质可与细胞表面上的特异性受体结合,通过受体与细胞骨架结构直接发生联系或触发细胞内的一系列信号传导而引起不同的基因表达,从而导致细胞的生长和分化.作为降解ECM成分最重要的酶-基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)在这一过程中起着非常重要的作用.MMPs是一类依赖金属离子锌并以ECM成分为水解底物的蛋白水解酶.其在转录水平的表达受到生长因子、细胞因子及激素等因素的严格调控,在蛋白质水平其活性也受到其激活剂和抑制剂的调节. MMPs通过对ECM成分的水解来影响其降解与重组的动态平衡而参与多种细胞的生理和病理过程.
1999, 26(3):228-233.
摘要:新的标记技术的进展和采用稀释的液晶作为溶剂以提供额外的结构信息,提高了核磁共振技术测定蛋白质溶液三维结构的精度,扩大了分子质量测定范围.目前已经利用多维 15N,13C,2H标记NMR测定了许多分子质量为30 ku左右的蛋白质溶液结构,这一上限可能还会被进一步提高.
1999, 26(3):233-237.
摘要:概述了近10年来利用结构生物学和蛋白质工程技术在纤维素酶分子结构和功能方面研究的进展,包括:酶分子结构域的拆分、催化域和纤维素结合结构域的结构和功能的研究,纤维素酶的分子折叠.并展望了该领域的研究前景.
1999, 26(3):237-240.
摘要:水杨酸是一种重要的能激活一系列植物抗病防卫反应的内源信号分子.首先介绍了水杨酸在植物抗病性中的作用,并从水杨酸与过氧化氢及其代谢酶类相互作用的角度初步探讨了水杨酸诱导植物抗病性的分子机理,最后概述了目前这一领域中需要进一步研究的若干问题.
1999, 26(3):241-242.
摘要:昆虫杆状病毒的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶(ecdysteroid UDP-glucosyltransferase, EGT)能催化UDP-糖基连接到蜕皮甾体上,使之失活,从而阻止或推迟蜕皮,有利于病毒复制,所以缺失egt基因的病毒能改良杀虫效果,如加速死亡和减少摄食量等.最近几年的研究进展主要集中在基因和蛋白质的一级结构、酶催化反应、以及对宿主的生物学功能等几方面.
夏振炜 , 李云珠 , 陈舜年 , 申庆祥 , 邵洁 , 王健 , 俞善昌
1999, 26(3):243-246.
摘要:采用离子交换层析和免疫印迹法分离、纯化和分析血红素和苯肼诱导后大鼠肝脏、脑组织.结果显示:纯化诱导后的大鼠肝脏,获得 HO-1和 HO-2,前者活性高于后者为2∶1.未诱导的大鼠肝脏仅获得HO-2,但诱导剂作用后,HO-1活性明显增加,而HO-2未见改变.HO-1和HO-2表观分子质量分别为30 ku和36 ku.诱导剂未作用的肝脏及作用的脑层析后仅获得HO-2活性的洗脱峰.免疫印迹法检测发现大鼠肝脏HO-2抗体与脑HO-2间有交叉反应,与肝脏HO-1无反应.实验表明在诱导剂作用的大鼠肝脏内含HO-1和HO-2同工酶,其中HO-1为诱导型酶.诱导剂作用的脑仅含HO-2.两种构型在表观分子质量,诱导性和免疫化学特性方面明显不同.
李平阳 , 王江成 , 谭润初 , 李永龙 , 贺奇才 , 黄耀熊
1999, 26(3):246-250.
摘要:应用显微准弹性激光散射(MQLS)技术与显微生物医学图象分析技术对地中海贫血红细胞及胞内血红蛋白动态特性进行了研究.在实验中,比较了正常人及地贫患者红细胞胞内血红蛋白聚集体的平均流体力学半径、平均平动扩散系数及红细胞膜的搏动频率等动态特性参数,以及细胞的截面积、规化形状因子、长径、短径、灰度等图象分析数据,发现地贫红细胞的血红蛋白聚合物平均流体力学半径远远大于正常人红细胞的,其大小变异亦较正常人大,且其膜搏动频率也较为缓慢,细胞的截面积也变小.这反映了地贫红细胞内有较大的蛋白质聚合物存在和红细胞变形能力差的特性.研究还表明,显微准弹性激光散射技术结合图象分析技术,可使测量的可比性和准确性大大提高,预期可广泛适用于各种活细胞动态特性的研究.
1999, 26(3):250-254.
摘要:用 125I-EGF与人多形成胶质细胞瘤BT325细胞系膜上EGF受体的饱和结合实验, 竞争抑制实验研究GM3,BBG(bovine brain gangliosides)对EGF受体最大结合量, 亲和常数及受体数目的影响; 放射受体法观察EGF-EGFR复合物内吞过程, 测定胞质和培养基中EGF含量.结果表明: BT325细胞质膜上存在高亲和力EGF结合位点,GM3对EGF与其受体的亲和力无明显抑制作用(P>0.05),但能明显减少其受体的数目(P<0.05); GM3能明显延长EGF-EGFR复合物内吞过程; GM3处理的胞质中EGF浓度比对照组显著升高(P<0.05), 培养液中无明显差异,这可能是由于GM3抑制EGF分泌所致.
1999, 26(3):254-258.
摘要:用流式细胞计(flow cytometry,FCM)测定H2O2损伤后的红细胞(RBC)与IgG的结合能力,并直接检测细胞自发荧光的变化,以研究H2O2对RBC抗原性和脂质过氧化(LPO)荧光产物生成的影响.结果表明RBC抗原性和自发荧光变化与H2O2浓度和作用时间有关,抗原性变化对H2O2更敏感,比引起自发荧光明显增强所需H2O2浓度低两个数量级;还发现了RBC抗原性和自发荧光的变化与细胞的散射光有相关性.
1999, 26(3):259-261.
摘要:在有机介质中,脂肪酶L-1754可以催化非天然有机硅烷醇与脂肪酸酯的转酯反应.反应介质、反应体系水活度和底物的结构对酶促转酯反应有显著的影响.适宜的反应介质为正辛烷,反应体系最适水活度为0.55.
1999, 26(3):261-264.
摘要:利用PCR扩增方法获得1.5 kb人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因组基因,将其受控于2.6 kb的鼠乳清酸蛋白(WAP)基因的启动子下,构建成乳腺表达载体.通过显微注射方法建立转基因鼠,PCR及DNA印迹鉴定证实获得两只转基因阳性鼠.在其乳腺表达出极低的G-CSF.为探讨低表达的原因,采用RT-PCR方法,从转基因鼠乳腺获得G-CSF cDNA,序列分析表明,其RNA剪接出现错误,将其第四外显子识别为内含子,由此导致其低水平表达.
1999, 26(3):265-270.
摘要:利用p53 C端118个氨基酸的mRNA二级结构和Chou-Fasman蛋白质二级结构预测原则,预测p53蛋白质C端289~325为卷曲肽段,368~393段包括两段螺旋结构: α1 368~373, α2 381~388.其中三段已知的蛋白质二级结构与此mRNA二级结构单元间有准确的对应关系.与四种以多重序列联配为基础的蛋白质二级结构预测方法(准确率均为73.20%左右)相对照,预测结果基本一致.结合单体聚合区31个氨基酸晶体结构,在SGI INDIGO2工作站上构建了p53 C端108个残基的三维结构.进一步揭示了p53 C端诸多生物功能区之间的空间构象关系.
1999, 26(3):273-276.
摘要:根据2,3-二氨基萘(2,3-diaminonaphthalene,DAN)可与一氧化氮( ·NO)反应生成荧光性2,3-萘酚三唑(2,3-naphthotriazole,NAT)和 ·NO的气体特性,设计了一个流动气体和荧光方法相结合的 ·NO直接测定方法.此法以惰性气体氮气为流动气体使样品中的待测 ·NO随流动气体进入测定溶液,溶液中的DAN捕集流动气体中的 ·NO生成荧光性NAT.实验结果表明测定溶液的荧光强度与 ·NO浓度呈正比,与酸化亚硝酸盐溶液的浓度亦呈良好线性关系.用此方法测得五份酸化正常人血浆的 ·NO浓度为(31.04±4.70) nmol/L,并可用于连续观察 ·NO从亚硝基硫醇的自发释放.
1999, 26(3):276-280.
摘要:为进行中国人遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症(HPFH)的分子病理学研究,以四种已知非缺失型HPFH突变样品为研究材料, 建立了针对二种γ-珠蛋白基因( Gγ和 Aγ)的点突变筛查技术——化学裂解法(CCM). 为分析nd HPFH点突变提供了简单可靠的分子诊断方法.
1999, 26(3):280-283.
摘要:利用H2O2易通过细胞膜而到达核这一特点,初步探讨了不同浓度H2O2对HL-60细胞DNA的氧化损伤程度.发现H2O2浓度在0.4 mmol/L以上时,作用8~24 h可以用气相色谱/火焰离子检测器(GC/FID)检测到氧化损伤标志产物——8-羟基鸟嘌呤(8-oh-G),并观测到在0.4~0.8 mmol/L H2O2作用一定时间时,8-羟基鸟嘌呤含量随H2O2浓度升高而升高.
1999, 26(3):283-286.
摘要:为了研究内皮型氧化氮合酶(eNOS)的功能、功能调节以及结构与功能的关系.通过PCR技术克隆出eNOSFAD间区801~902AA肽段的编码基因,插入pET-28a(+)表达质粒中构建成pET-28a/eNOS2重组表达质粒,经转染在大肠杆菌中成功表达.表达蛋白经金属离子螯合亲和层析和SDS-PAGE回收纯化,得蛋白质纯品.为eNOS特异性抑制肽的筛选和eNOS特异性抗体的制备提供了必要的准备.
1999, 26(3):286-288.
摘要:雄激素不敏感综合征(AIS)为一类主要与雄激素受体(AR)基因缺陷密切相关的X-连锁隐性遗传病.为进一步阐明AIS的发病机制,建立了用干血纸片直接PCR扩增或将干血纸片中的血细胞洗脱裂解后进行PCR扩增雄激素受体(AR)基因的方法,结合已建立的SSCP分析及DNA直接测序等方法,可对AR基因进行突变分析.干血纸片取样及保存容易,便于邮寄,适用于外地,特别是边远地区患者的取样.该法不仅为AIS患者的AR基因突变分析和家系调查提供简便易行的方法,也适用于PCR基础上的其他各种基因的突变分析.
1999, 26(3):289-291.
摘要:用脂质体法和电穿孔法分别转染Cos-7,Vero和Namalwa细胞.发现脂质体法在转染效率和操作方便方面比电穿孔法优越,而电穿孔法对细胞种类的适用性方面似乎比脂质体法广. 结果表明,电穿孔法能转染Cos-7,Namalwa和Vero细胞,而用脂质体法只能转染Cos-7和Vero细胞.
1999, 26(3):295-296.
摘要:充分利用英特网上完善的生物信息资源是十分有益且必要的.介绍了利用网上生物资源的几种主要方式和一些重要的站点和生物信息搜索引擎.
1999, 26(3):297-299.
摘要:温度梯度凝胶电泳(TGGE)是一种用于检测核酸序列变异和点突变的电泳方法.该法利用不同构象的核酸分子具有不同的变性温度(Tm)来进行分离.TGGE方法具有分辨能力高、重复性好和节省时间的特点,可广泛应用于分子生物学研究领域.
1999, 26(3):299-299.
摘要:
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