1999, 26(6):523-524.
摘要:Synuclein是一个广泛分布于中枢神经系统突触前成分内的小分子蛋白质家族,N端以11个氨基酸残基为周期的双极性α螺旋是其二级结构的共同特征.Synuclein的生理功能目前尚不够明晰,但大量研究提示synuclein可能和突触的发育与可塑性有关.同时,synuclein与阿尔茨海默(Alzheimer)病、帕金森(Parkinson)病等多种神经系统退行性疾病的关系,及其在乳腺癌侵袭过程中的作用日益受到关注.
1999, 26(6):525-528.
摘要:综述了近年来关于IGF-Ⅰ和胰岛素表现生理功能的结构基础和分子基础研究进展.IGF-Ⅰ和胰岛素是胰岛素家族中的2个重要成员, 两者的分子结构高度同源, 两者的受体相似且属同一家族, 两者的生理功能可彼此交叉, 但各自具有主要的生理功能.IGF-Ⅰ的主要生理功能是促进细胞生长, 胰岛素的主要生理功能是促进葡萄糖的摄取和代谢.生物大分子的功能及其表现的基础是分子结构及参与功能表现的诸多分子, 如受体、信号分子等等.
1999, 26(6):528-530.
摘要:EB病毒编码LMP-1介导的信号传导途径已引起人们广泛的注意.它涉及TRAF/TRADD途径,AP-1途径,JAK/STAT及其他途径.就此作一综述,有助于人们认识LMP-1的致瘤效应.
1999, 26(6):531-534.
摘要:DNA依赖蛋白激酶由Ku异二聚体和DNA-PKcs组成,结合Ku蛋白后,DNA-PK激酶活性激活,DNA依赖蛋白激酶具有多功能性,参与DNA修复、基因重组以及复制、转录等多种细胞学过程.
1999, 26(6):534-536.
摘要:bcl-x是bcl-2家族中的重要成员,由于不同的剪接产生Bcl-XL、Bcl-XS、Bcl-Xγ三种同源蛋白.Bcl-XL、Bcl-Xγ抑制凋亡,Bcl-XS促进凋亡.bcl-x在细胞发育、维持机体平衡、肿瘤发生和预后中起作用. Bcl-X通过与Bcl-2、Bax、Bad等相互作用而实现对凋亡的调控.
1999, 26(6):541-543.
摘要:近年来,N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体在突触可塑性形式——长时程增强(long-term potentiation,LTP)中的作用及该受体被激活后的细胞内级联反应备受人们的关注.人们利用拮抗剂技术和基因敲除的方法,对其进行了广泛的研究,并且就LTP的诱导和维持方面获得了一些进展.已获得的这些研究结果为LTP的突触前及突触后机制提供了有力的证据.
1999, 26(6):544-547.
摘要:粘细菌的多细胞形态发生是粘细菌细胞社会性行为的主要表现.包括细胞有序聚集、细胞自溶、子实体发育和粘孢子的分化形成等.粘细菌的形态发生过程涉及复杂的信号系统和调控,与真核生物具有较大的相似性.是研究原核生物细胞分化发育以及生物进化的重要模式材料.
1999, 26(6):547-551.
摘要:阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease,AD)是一种神经退行性疾病,是老年人群痴呆最普遍的原因,也是老年人病态和死亡的主要原因.以阿尔茨海默氏病与氧应激为题,从AD发生的分子基础和氧应激基础,以及β淀粉样蛋白(β amyloid, βA)的聚合作用和毒性与自由基的关系,对近年来在AD发生机制研究中引人注目的氧应激问题,作一简要综述.
1999, 26(6):551-553.
摘要:介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足.在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统,将应用范围扩大到研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子药物间的相互作用.
1999, 26(6):554-558.
摘要:综述了HSP70分子伴侣系统的晶体结构、功能及作用机理方面的研究进展.HSP70分子伴侣能够帮助细胞内新生蛋白的折叠和跨膜运输、蛋白质多聚体结构的装配和解装配,并能在胁迫下维持蛋白质的特殊构象,防止未折叠的蛋白质变性和使聚集的蛋白质溶解复性.所有这些活性均依赖于ATP调节的HSP70与底物蛋白中的疏水片段的相互作用.
1999, 26(6):563-566.
摘要:为检测细胞凋亡过程中bcl-2基因的结合蛋白,用PCR技术扩增小鼠bcl-2基因(mbcl-2)调控区,经亚克隆后的序列分析证实其准确性.用5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导小鼠成纤维细胞(C3H 10 T1/2 Cl 8)凋亡,以此PCR产物作探针,对上述细胞的核蛋白质粗提物进行迁移位移法(EMSA)与DNA-蛋白质印迹分析.结果表明,细胞核内一分子质量为53 ku的结合蛋白与mbcl-2调控区的结合信号在5-Fu刺激12 h后明显增强,而一种100 ku的DNA结合蛋白与该区的结合信号在5-Fu刺激12 h后明显减弱.因而,p53蛋白有可能是bcl-2的负转录因子,100 ku的DNA结合蛋白有可能是bcl-2的正转录因子.
1999, 26(6):566-569.
摘要:为探讨双位点核酶对乙型肝炎病毒C基因体外转录物的剪切作用,观察双位点核酶对单一核酶体外剪切的增强作用,同时比较串联核酶和混合核酶的体外切割作用,构建了核酶Rz1,Rz3, Rz1和Rz3的串联核酶(Rz13)体外转录载体, 经体外转录后切割靶RNA. 结果表明:双位点核酶,无论是串联或混合核酶均可增强单一核酶的体外切割作用, 串联和混合核酶中的单一核酶可独立发挥作用;当串联和混合数目为2个时,两者的切割效率差别不大(P>0.05).
1999, 26(6):569-573.
摘要:通过DNA重组构建蛋白激酶Cγ(PKCγ)亚类的重组质粒并经基因转染技术和DNA印迹、蛋白质印迹与PKC活性分析,获得了过表达PKCγ的C3H10T1/2细胞——NCP4.NCP4细胞生长速率提高,流式细胞光度术检测表明,NCP4细胞G1期百分率下降,S期和G2+M期百分率升高,与对照组细胞相比,血清依赖性明显下降,贴壁依赖性降低,在软琼脂中形成小集落,出现部分转化表型.进一步检测,首次观察到NCP4细胞中癌基因c-sis表达明显增强,这可能是NCP4细胞血清依赖性下降的分子机理之一.实验表明,在正常C3H10T1/2细胞中PKCγ的过表达可直接导致细胞增殖加速并可诱导出现部分转化特征.
王建枝 , GRUNDKE-IQBAL I , SMITH A , IQBAL K
1999, 26(6):574-577.
摘要:cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)的预处理可显著增强糖原合成酶激酶-3(GSK-3)对τ蛋白的磷酸化作用.将磷酸化的τ蛋白经胰蛋白酶消化,FeCl3亲和柱分离及C18反相高压液相层析纯化后,再用高压电泳,手工Edman降解及自动氨基酸序列分析等技术,对其磷酸化位点进行鉴定.结果发现:GSK-3可使PKA预处理的τ至少在丝氨酸(Ser)-195,Ser-198,Ser-199,Ser-202,Ser-235,Ser-262,Ser-356,Ser-404,苏氨酸(Thr)-205和Thr-231等10个位点发生磷酸化.其中Ser-198,Ser-199,Ser-202,Ser-235,Ser-262,Ser-404,Thr205和Thr-231为Alzheimer病(AD)τ蛋白的异常磷酸化位点.上述磷酸化作用高度抑制τ的生物学活性,提示:AD τ的生物学功能的抑制与Ser-198,Ser-199,Ser-202,Ser-235,Ser-262,Thr-205和Thr-231的磷酸化密切相关,PKA和GSK-3的相互作用可能在AD神经原纤维变性中起重要作用.
1999, 26(6):578-580.
摘要:高胆固醇饲料喂养造成的动脉粥样硬化(As)模型家兔通过静脉注射人血浆HDL制剂,观察HDL对As家兔肝细胞膜LDL受体活性的影响.结果发现,摄取高胆固醇饲料的As家兔,其肝细胞膜LDL受体Kd值虽无明显变化但Bmax值显著减小(P<0.01,与正常对照组比较);注射HDL制剂后,As家兔肝细胞膜LDL受体Kd值仍无明显改变,但Bmax值却显著回升(P<0.01,与高脂组比较).表明人血浆HDL具有增加As家兔肝细胞膜LDL受体活性的作用.
1999, 26(6):581-584.
摘要:为了观察SHR与WKY大鼠肾脏组织的基因表达的差异,用T11G、AP6引物对12周龄的SHR与WKY大鼠肾脏mRNA进行了差异显示,得到了一条在SHR大鼠肾脏组织中高表达的差异显示条带,进一步分析证明这一差异显示条带含有170 bp,与GenBank 收录的已知的核苷酸序列的同源性低于80%,可能为未知基因的cDNA片段,并定位于SHR大鼠的肾小管上皮细胞内.
蒋太交 , 吉鑫松 , 章如安 , 黄艳红 , 吴祥甫 , 袁中一
1999, 26(6):584-587.
摘要:表达有活性的辣根过氧化物酶(HRP)不仅可以深入揭示HRP结构与功能及其生理作用规律,而且为HRP的广泛需要提供新的来源.为了在甲醇酵母P.pastoris中成功表达,将编码HRP-C成熟肽的cDNA构建到pPIC9上,再转化到P.pastoris中,筛选到了分泌表达非糖基化HRP和高糖基化HRP(分子质量超过100 ku)两种主要产物的重组细胞株.优化表达条件,目标产物在摇瓶发酵液中高效表达,可达4~6 g/L.并且直接从发酵液中可获得具有活性的高糖基化HRP,每毫升发酵液中酶活力约有2 U,经初步的纯化HRP具有最大吸收峰403 nm.
1999, 26(6):587-590.
摘要:利用乙酰胆碱( acetylcholine,Ach)自身抗体对金黄地鼠视皮层17、18区乙酰胆碱阳性神经元及其分布进行免疫学显示并进行量化分析.实验发现,Ach阳性细胞大部分为非锥体神经元,也有少量锥体神经元.Ach阳性神经元在视皮层的Ⅱ~Ⅵ层,主要分布在Ⅱ~Ⅳ层.在不同层次中其阳性神经元类型存在某些差异,Ⅱ~Ⅳ中双极细胞居多,其他层次中多极细胞占优势.17区的这类神经元数量较多且集中成垂直于皮层表面的细胞带,18区的神经元数量相对较少且多呈分散状态.
1999, 26(6):591-593.
摘要:人纤溶酶原激活剂抑制物1(PAI-1)基因与复制缺陷型腺病毒载体AdCMVHSgD重组,与pJM17质粒共转染293细胞,采用不铺琼脂的方法产生重组病毒.PCR证实PAI-1基因重组进入腺病毒.进一步感染B16(F10)细胞,细胞表面洗提物和上清分别经纤维显示胶和反向纤维蛋白显示胶检测PAI-1抑制纤溶酶原激活剂(PA)的活性.
1999, 26(6):593-596.
摘要:常规的蛋白质碘标方法易引起被标细胞因子的失活,是受体配基竞争结合实验失败的原因之一.试用氯胺-T双相碘标法标记rhG-CSF和rhEPO,并应用受体配基竞争结合分析法测定NFS-60细胞G-CSF受体及BET-2细胞EPO受体的特性.结果显示所获 125I-EPO和 125I-G-CSF放射比活度均较高;发现BET-2细胞有高、低两种亲和力的EPO受体,NFS-60细胞只有一种高亲和力的G-CSF受体,所获结果与文献资料相一致.说明氯胺-T双相碘标法是细胞因子同位素碘标记的理想方法之一.
1999, 26(6):596-600.
摘要:研究了牛眼透明质酸(HA)的提纯方法,采用0.125 mol/L Na2SO4取代0.1 mol/L NaCl溶解粗品,发现前者溶解液中有2个组分,一个组分被十六烷基溴代吡啶(CBP)吸附回收,产物呈纤维状,另一组分保留在溶液中并能通过分级稀释而被沉淀回收,产物呈粉末状;而用0.1 mol/ml NaCl溶解粗品,除了被CBP吸附回收外,保留在溶液中的HA不能被回收;与同类方法相比,回收率提高1.7倍以上.还分析了产物的性质,与同类样品比较,提高了纯度,降低了提纯中有机溶剂的消耗.
1999, 26(6):600-602.
摘要:对传统的反向PCR技术作了一些改进:用巢式PCR扩增含量极少的靶序列;PCR反应体系中加入5%的甲酰胺以减少非特异性扩增.结果表明,改进的反向PCR体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法.
庄立岩 , 张志文 , 郭宏骞 , 李宏军 , 唐东起 , 苑学礼 , 刘漓波 , 丁义 , 郭应禄
1999, 26(6):603-605.
摘要:Wnt基因所编码的蛋白质与许多生长因子一样具有分泌型生长因子的结构特点,其家族成员Wnt-5A是许多恶性肿瘤的自分泌生长因子,在肾细胞癌中表达显著升高.为研究在细胞周期的不同阶段生长因子Wnt-5A在转录水平的表达情况,我们采用胸腺嘧啶双阻断及高压笑气处理的方法,使肾细胞癌细胞系GRC-1细胞同步化.用半定量反转录多聚酶链反应对处于细胞周期不同阶段的细胞cDNA进行扩增,S期与G1,M期Wnt-5A mRNA表达存在差异显著(P<0.05).结果提示生长因子Wnt-5A在肾细胞癌的发生中具有潜在的作用,在S期作用可能尤为显著.
1999, 26(6):606-608.
摘要:平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC)增殖在动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)形成中起着重要作用.氧化修饰HDL(oxidized HDL, OX-HDL)可刺激 3H-TdR掺入培养人动脉SMC的DNA,促进SMC增殖.以四甲基偶氮唑盐(MTT)法直接观察OX-HDL对培养人动脉SMC增殖细胞数的影响.结果显示,天然HDL(native HDL N-HDL)对SMC增殖没有影响,而OX-HDL则显著刺激SMC增殖(P<0.01),N-HDL显著抑制OX-LDL刺激SMC增殖作用(P<0.01),而OX-HDL则显著增加OX-LDL刺激SMC增殖作用(P<0.01)
1999, 26(6):609-610.
摘要:采用紫外线照射及戊二醛活化处理聚苯乙烯酶标板后再包被八肽胆囊收缩素(CCK-8),以此为基础进行酶联免疫吸附试验(ELISA),通过不同的洗涤过程对CCK-8与酶标板相互作用的性质进行研究.结果表明,该包被方法可使CCK-8通过共价交联的方式稳定地结合于固相载体上,该方法适用于不同来源的酶标板,处理后的酶标板性质稳定,可储存使用,测定的批内及批间变异系数分别为4.75%和7.80%,方法稳定可靠,重复性好,便于推广应用.
1999, 26(6):611-612.
摘要:微弱发光分析技术用于测定药物的抗氧化作用方式和抗氧化能力有其独特的优点.简要介绍应用BPCL型微弱发光仪测定了十几种药物的抗氧化性能的方法和初步结论.说明了这种技术和仪器在应用领域的作用.还谈到了BPCL微弱发光测量仪数据采集和分析的主要性能.
1999, 26(6):613-615.
摘要:对1992年6月至1993年4月入院诊断为急性心肌梗塞(AMI)患者在发病后即时至48 h分三个阶段进行连续取血样测定4种血清酶(AST、CK、LDH、CKMB)的含量,且与心电图作比较.结果表明,在AMI过程中酶异常检出率最高可达到90%(AST、CK-MB),最低为70%(LDH).若以异常Q波为AMI确诊,其不能检出率为40%;提示在AMI早期作血清酶检测有助于进一步确诊及减少漏诊率.若AMI患者已下降的CK-MB再度上升,提示可能有新的梗死灶发生;AMI患者在发病6 h内,血清酶显著升高,提示预后不佳.
1999, 26(6):616-617.
摘要:在中文定名中,把prion定为朊病毒或与病毒有关的名称均不恰当,不应在定名上动摇“病毒”的原有定义.同样,也不应把ribozyme定为与酶有关的中文名,以避免冲击酶的传统概念.我们赞同把prion定名为蛋白感染子;把ribozyme定名为RNA催化剂.
1999, 26(6):618-620.
摘要:
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