摘要:

摘要:白细胞介素-18(IL-18)是新发现的细胞因子，具有多种生物学功能.IL-18能促进外周血单个核细胞产生干扰素-γ(IFN-γ)、IL-2、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子，增强天然杀伤细胞(NK细胞)的细胞毒作用.IL-18结构上与IL-1相似，而功能更接近IL-12，IL-18与IL-12均能诱导Th1细胞产生IFN-γ，存在协同效应，但它们的作用途径不同.IL-18在抗感染抗肿瘤等方面有着潜在的应用前景，并与自身免疫性疾病的发病密切相关.

摘要:蛋白质是生物体内一切功能的执行者.人体内的任何功能，从催化化学反应到抵御外来侵略都是蛋白质作用的结果.蛋白质折叠是生命活动的最基本过程，近年发现蛋白质的错误折叠可以导致一些疾病.蛋白质的错误折叠与疾病的关系已成为分子生物学新的研究前沿.介绍了细胞内保证蛋白质正常功能的“质量控制”系统，重点讨论了翻译后的质量控制、与蛋白质错误折叠有关的一些疾病和治疗这一类疾病的原则方法.

摘要:随着后基因组时代的到来，蛋白质组研究越来越受到国内外科学工作者的密切关注, 我国国家自然科学基金委员会已把蛋白质组研究列为重大科研项目.概述了蛋白质组研究中的基本技术，包括双向凝胶电泳的样品制备和分离、蛋白质的检测、凝胶图像分析、蛋白质的鉴定以及蛋白质数据库构建等，并就蛋白质鉴定的常用方法如氨基酸组成分析方法、蛋白质末端序列分析、肽质量指纹谱作了详细阐述.直观地列出了蛋白质组研究的技术体系流程图，着重介绍了蛋白质组研究的最新技术及其进展.

摘要:凝血因子Ⅸ/Ⅹ结合蛋白家族是近来发现的C型动物凝集素超家族中一个亚家族.它们存在于蝰科蛇毒中，不具有酶活性，通过与凝血因子Ⅸ或凝血因子Ⅹ结合来延长凝血时间.在钙离子存在下结合在凝血因子Ⅸ/Ⅹ分子中γ-羧基谷氨酸区域.它们彼此之间具有很高的序列同源性，都是由两条同源的肽链通过一对二硫键相连.两条肽链都具有C型糖识别区的二硫键构型，各含一个钙离子结合位点.其中habu凝血因子Ⅸ/Ⅹ结合蛋白的晶体结构已经测定，除掉相互交叠的中心环外，两条肽链都具有类似于鼠甘露糖结合蛋白的结构.

摘要:双组分系统是广泛存在于原核和真核细胞中的信号转导系统.主要由组氨酸蛋白激酶(HPK)和响应调节蛋白(RR)两个组分组成. 双组分系统信号通路一般包括信号的输入、HPK自身磷酸化、RR磷酸化、信号输出等环节.对双组分系统信号转导机制及其在渗透胁迫信号识别和传导中的作用进行了综述.

摘要:大肠杆菌周质和外膜蛋白发挥功能必须首先到达其特定亚细胞分区.大肠杆菌通过一系列与蛋白质分泌有关的蛋白（Sec蛋白）将周质和外膜蛋白转运至内膜.在切除了信号肽后，与周质蛋白的定位不同的是，外膜蛋白的最终定位还需要其他因子的协助.外膜蛋白的定位近来认为是以周质作为中介的.

摘要:随着对端粒和端粒酶在衰老和肿瘤中重要性认识的不断深入，端粒酶的激活途径已日益成为这一研究领域的热点.已发现，MYC原癌蛋白(myelocytomatosis virus oncoprotein, MYC)在端粒酶的激活中起关键作用.它可以与TERT基因启动子区域内的E盒结合反式直接激活端粒酶，还可能介导了细胞内其他分子如人乳头瘤病毒E6癌蛋白(human papillomavirus E6 oncoprotein, HPV-E6)和雌激素等对端粒酶的激活.雌激素也可与雌激素受体形成复合物,直接与TERT基因启动子区域内的退化雌激素反应元件结合反式激活端粒酶.此外，腺瘤样结肠息肉癌蛋白(adenomatous polyposis coli protein,APC)、p53及调节蛋白质磷酸化和去磷酸化过程的酶类等亦可能参与了端粒酶活性的激活.

摘要:由于缺乏合适的HCV感染细胞模型，严重制约了HCV复制，特别是HCV复制的关键因子依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)的研究.对HCV序列比较分析并通过异源表达证明NS5B是HCV复制的RdRp.NS5B C端疏水性氨基酸区域以及NS5B与细胞膜形成复合体等影响NS5B溶解性.在合适的反应条件下NS5B可以多种RNA分子为模板催化RNA复制，特别是能有效复制HCV全长(+)RNA.高浓度GTP激活HCV RdRp活性.NS5B N/C端缺失突变和保守性A、B、C区中的点突变影响RdRp活性，但D区345位精氨酸突变为赖氨酸时RdRp活性明显升高.HCV RdRp的发现及其功能研究为HCV药物研究提供了新型靶标.

摘要:含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类：一类是与酵母RPD3同源的分子，另一类是与RPD3不同源的分子.它们各有其不同的来源，存在于各自的复合物中，催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化；这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系, 主要是介导基因转录的抑制.

摘要:鞭毛马达(flagellar motor)是一种分子旋转马达，它在细菌鞭毛的结构与功能中起着中心作用.鞭毛马达的结构已基本清楚，主要由Mot A、Mot B、Fli G、Fli M和Fli N 5种蛋白组成定子(stator)和转子(rotor)，其驱动力来自于跨膜的H⁺或Na⁺流.目前对鞭毛马达的旋转动力学及旋转力矩产生机制已有初步的了解.鞭毛马达可作为研究分子旋转马达的理想模型，对其深入研究将有助于认识生物能量转化利用及细胞运动的机制并具有广泛的生物学意义.

摘要:用Fura-2/AM标记药物敏感的肺腺癌细胞A₅₄₉和抗顺铂药物的肺腺癌细胞A₅₄₉/DDP两种细胞胞内游离Ca²⁺，用碘化丙锭(PI)标记细胞DNA，检测其胞内Ca²⁺的变化及两种细胞增殖能力和细胞周期.实验结果表明，抗药性细胞株A₅₄₉/DDP胞浆内游离Ca²⁺的浓度仅为药物敏感细胞株A₅₄₉的1/3左右，同时前者的细胞增殖能力较后者明显增强，而且细胞周期也明显缩短.当用BAPTA-AM和EGTA或A₂₃₁₈₇和Thapsigargin处理细胞以降低或升高其胞内自由Ca²⁺浓度时可改变细胞的生长周期，二者也呈现明显差别.这些结果表明，对顺铂产生耐药性的人肺腺癌A₅₄₉/DDP细胞胞内Ca²⁺浓度的降低，可能影响细胞的增殖，缩短细胞的生长周期，特别是影响起决定作用的G1期，从而有利于肿瘤细胞多药耐药特性的维持.

摘要:藻红蛋白(phycoerythrin, PE)是海藻中的重要捕光色素蛋白，具有强荧光性，易溶于水.在藻体内能将捕获的光能传递给光合反应中心; 在体外则能将光能传递给周围环境中的氧分子，产生如单线态氧等活性氧组分，可用来介导光动力效应治疗癌症.将纯化的藻红蛋白加入到瘤细胞培养基中，数小时后，采用488 nm波长的氩离子激光辐照，MTT法检测细胞存活数，计算细胞存活率. ³H-TdR掺入实验观察细胞DNA的合成.结果表明，藻红蛋白介导的光动力反应能够有效地抑制肿瘤细胞DNA合成并杀伤癌细胞.随着藻红蛋白浓度增加，DNA合成下降，瘤细胞存活率降低.将藻红蛋白加入到pUC18质粒溶液中，随之进行激光辐照，琼脂糖电泳结果可见pUC18构象由超螺旋（supercoiled）向带切口的环形构象(relax)转换.结果提示：通过改变或影响DNA构象，抑制细胞DNA合成可能是藻红蛋白介导肿瘤光动力治疗的途径之一.

摘要:大豆液泡膜V型H⁺-ATPase是ATPases中的一种，它在植物细胞的生长发育中有重要的作用.利用竹红菌乙素(HB）和KI这两种分别猝灭蛋白质疏水区域内源荧光和亲水区域内源荧光的荧光猝灭剂，在不同pH值、温度条件下对纯化的大豆液泡膜V型ATPase进行荧光猝灭实验，初步探讨了V型H⁺-ATPase的水解活性同其蛋白质折叠状态间的关系.研究表明，通过比较不同pH值、温度条件下蛋白质疏水区域和亲水区域内源荧光的荧光猝灭常数（K_SV），发现当环境pH值、温度偏离酶的最适pH值和温度时，蛋白质的内源荧光强度降低且疏水区域和亲水区域内源荧光的荧光猝灭常数（K_SV）降低，说明伴随着酶的水解活性降低，蛋白质的折叠状态发生了变化.我们认为蛋白质在膜内的折叠状态变化是酶失活机制的一个重要方面，为植物的抗冻和抗盐研究提供了一定的参考.

摘要:氧化应激时产生大量的自由基，造成心肌细胞的损伤.过氧化氢(H₂O₂)是有机体氧化代谢产物，同时是一种活性氧.应用不同浓度的H₂O₂，分别于不同作用时间，动态观察其对心肌细胞的损伤作用.从实验结果看到，低浓度的H₂O₂（＜0.1 mmol/L）作用2 h，使心肌细胞产生早期的生物化学的改变，如MDA产生堆积和细胞周期时相改变（G1期细胞增加，G2期细胞减少），此时心肌酶基本无泄漏，心肌细胞的死亡率很低，HE形态学观察基本无改变；随着H₂O₂浓度的增加（1～5 mmol/L）和作用时间的延长，进一步诱导细胞损伤加剧，LDH释放和MDA积累明显升高，细胞死亡率也明显增加，已具有统计学意义.同时可观察到其病理形态学的坏死性改变；当10 mmol/L H₂O₂作用时，细胞大量死亡，形态学可见细胞极度收缩、脱落，形成大面积的细胞脱失区.因此，H₂O₂作为一种活性氧自由基，依其浓度和作用时间不同可造成不同程度的心肌细胞的损伤.辣根过氧化物酶作为一种自由基清除剂，可明显减少H₂O₂活性氧自由基对心肌细胞的损伤作用.

摘要:Y2受体亚型是早期发现的NPY的两种主要受体亚型之一，参与NPY所介导的多种生理和病理功能.为了制备Y2受体抗体和开展Y2受体的定位研究，用RT-PCR方法从大鼠海马的总RNA扩增NPY的Y2受体全长基因，接着PCR扩增Y2受体的C端片段，克隆入表达载体中，建立了重组NPY Y2受体C端肽的表达菌株，并对表达产物进行纯化.

摘要:用Dextran T-500, PEG 3350两相分配法分离并纯化了悬浮培养的胡杨细胞质膜.不同聚合物浓度(5.5%、5.7%、5.9%、6.1%、6.3%、6.5%)和KCl浓度(0、5、10、15 mmol/L)对分离效果影响的研究结果表明, 采用聚合物浓度为5.9%和无盐存在的两相分配体系可获得纯度较高的胡杨细胞质膜.纯化的质膜H^＋-ATPase的活力提高8倍，且酶定向程度较高，这为进一步研究胡杨细胞质膜特性及获得高纯度H^＋-ATPase提供了良好基础.

摘要:将合成的含有随机序列（NNK）₁₀的寡核苷酸片段，克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒pCANTAB5E的SfiⅠ，NotⅠ位点，即cpⅢ蛋白信号肽与成熟肽之间，电转化E.coli TG1，构建了噬菌体表面呈现的十肽库，实际库容为3.53×10⁷，插入率为66.7%.经辅助噬菌体M13KO7超感染后，获得滴度为4.8 ×10¹¹ pfu/ml的噬菌体上清.经过两轮panning筛选和富集，从构建的随机十肽库中筛选到26个具有血管形成素结合活性的重组噬菌体克隆，对其中12个阳性噬菌体克隆的短肽序列进行了分析，ELISA检测结果显示12个阳性噬菌体克隆都能够与血管形成素特异性结合.

摘要:建立和优化了中枢神经组织蛋白质组分析所需的双向电泳及相关技术.由于中枢神经组织结构的特殊性，样品处理非常困难.对样品液组成、样品处理、上样方式、上样量、IPG胶条和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法和保存等相关技术进行了比较研究和条件优化后，以固相pH梯度等电聚焦为第一向和SDS均一胶（T=12.5%）的水平电泳为第二向，成功地得到了神经组织双向电泳图谱.

摘要:确定由脂类分子介导的信号转导途径和细胞内某些信使分子的生成及改变是信号转导研究领域中的一个重要组成部分.如确定不同磷脂酶活性的调控及细胞内不同来源的第二信使分子及其他脂类生物活性分子的生成与调节，成为探讨生长因子或其他许多分子的生物效应及其作用机理的重要研究内容.为了增加人们对有关研究工作的了解及在方法上的选择，介绍了研究脂类代谢信号转导中广泛运用的一个基本而重要的方法——选择性标记法，并且以实际研究结果为例，说明如何运用该方法检测不同的信号传递途径和有关信号分子的生成与变化.该法针对性强而灵活，重复性高，能有效地检测某些不同来源的信号传递分子的生成及其变化.此外，对脂类代谢信号转导途径及对该途径的研究在信号转导领域的地位和意义也作了简要的介绍.

摘要:介绍了一个简便的DNA改组操作程序.首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段，两者相比较同源性大于93%.然后将其等量混合后，在Mg²⁺存在的条件下，用DNaseⅠ切割成10～50 bp的小片段.这些小片段在不外加引物的前提下，利用PCR反应进行重聚，再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增，获得了与原来片段大小相当的基因片段.这一技术有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因.

摘要:几种抗氧化剂的浓度与其清除1，1-二苯基苦基苯肼(DPPH)能力呈显著的线性相关.不同抗氧化剂清除DPPH能力差异明显.抗坏血酸与DPPH反应的灵敏性高于其抑制肾上腺素氧化的能力.用DPPH法和亚油酸氧化法同时测定了生长在不同光强下植物叶片抗氧化能力的变化，两种方法所得结论相一致.结果表明清除有机自由基法是一种快速、简便、灵敏的评估植物抗氧化能力的可行方法.

摘要:以克隆乙型肝炎病毒pC/C及C基因为例，报道了在DNA重组中，当目的基因与载体末端不匹配时可采取的一新方法.用内切酶切取的基因片段为平端时，可在含dATP的反应体系中，用Taq酶的末端转移酶活性在其3′末端加上单个碱基(dA)的突出尾；基因片段为3′凹端时，可在含4种dNTP的体系中，利用Taq酶的聚合酶活性先将其末端补平，再经末端转移酶活性在其3′末端加dA尾；末端经此修饰的基因片段可亚克隆至T载体中，再克隆于其他表达载体中.

摘要:根据血清中有关酶（如：天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LD)、肌酸激酶及其同工酶(CK-MB)）活性的变化来诊断急性心肌梗塞（AMI）已有多年的历史.近年来，一些蛋白质标志物，如：CK-MB质量，心肌肌红蛋白，心肌肌钙蛋白（cTn）也已逐渐应用于临床诊断.其中心肌肌红蛋白是一项良好的排除心肌梗塞的指标，而心肌肌钙蛋白则是很好的确证指标.CK-MB质量的分析性能高于其活性测定.蛋白质标志物分析还可用于冠心病的危险分级及监测治疗.血清酶分析由于价廉、方法成熟，也不失为有效的AMI辅助诊断指标.需特别注意标本采集时间对结果应用的影响.

摘要:随着RNA功能多样性的发现，RNA研究领域日益受到重视，同时RNA序列、二级结构和三维模建数据已有较大增长.利用这些数据可以有效地搜索结构信息和进行功能提示.与此同时，计算科学的优越性以及全球网络的发展促进了RNA相关数据库和网络站点的建设，为RNA的研究带来了极大的方便.介绍了RNA序列和结构数据库、软件资源以及一些常用的在线分析工具，文中所列网络资源均可在http://dna.sibc.ac.cn/bio/rna.html上浏览.