摘要:Survivin是近年来发现的一种凋亡抑制因子，属于凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins,IAP）家族的新成员；主要通过抑制caspase-3和caspase-7的活性而阻断细胞凋亡过程. Survivin选择性地表达于胚胎发育组织和大多数肿瘤组织，而正常成人终末分化组织中不表达. Survivin参与了细胞周期调控，与肿瘤的发生、发展和预后密切相关，可作为肿瘤治疗的新靶点.

摘要:胰岛素是机体最重要的激素之一，它调节机体的血糖稳定、促进同化代谢、调节细胞的分裂分化和生长发育.胰岛β细胞的胰岛素分泌受到营养物质、神经递质和激素的精确调控.它们的作用部位可分为改变胞内第二信使物质水平的近端调节步骤（钙依赖性），和直接作用于胞吐分子构件的末端调节步骤（钙非依赖性）.胰岛素的胞吐过程与神经递质的释放机制类似.葡萄糖等营养物质主要通过升高胞内的ATP/ADP比率，导致ATP敏感钾通道关闭、细胞膜去极化、钙内流这一途径增加胰岛素的分泌.神经递质和部分激素通过其G蛋白偶联受体-G蛋白系统的跨膜信号转换后，影响胞内IP₃、DAG、Ca²⁺等第二信使物质水平，主要通过PKA、PKC等蛋白激酶途径，调节胰岛素的分泌.胞内单体G蛋白参与了对囊泡运输和胞吐过程的调控，G蛋白也可能直接作用于胞吐过程，在分泌过程中发挥了重要的调节作用.

摘要:信号传导与转录激活因子家族（signal transduction and activators of transcription, STATs）的成员之一——Stat3，被胞外细胞因子、生长因子等多肽类配体激活，在胚胎的早期发育，皮肤重建，免疫反应等生理过程中发挥重要作用. 近几年的研究发现，Stat3在各种肿瘤细胞中持续激活, 持续激活的Stat3能促使细胞的恶性转化并阻断凋亡. Stat3作为转录因子类癌基因作用机理的研究，为肿瘤形成机理的阐释及某些肿瘤的治疗药物筛选工作奠定了坚实的基础.

摘要:转基因植物中的除草剂或抗生素抗性标记基因的生态环境和食用安全性一直颇有争议.糖类分解代谢酶基因作为安全标记基因,近年来在植物转化中显示了巨大应用潜力.这类标记基因编码产物是筛选剂糖类的分解代谢酶，使转化细胞能利用筛选剂糖类作为主要碳源从而获得优势生长，非转化细胞则因饥饿生长被抑制但不被杀死，故称为正筛选系统(positive selection system).目前木糖异构酶基因（xylose isomerase,xylA）和磷酸甘露糖异构酶基因（phosphomannose isomerase,pmi)等安全标记基因已成功应用于植物转化.

摘要:端锚聚合酶(tankyrase)是一种位于端粒的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶，它在端粒酶阳性细胞中过表达可使端粒长度增加，从而影响染色体的稳定性，与细胞的衰老、死亡和癌变密切相关；同时它在细胞中的复杂分布模式和不同类型的存在，使其可能在不同的亚细胞位点发挥不同的作用.

摘要:机械应力在细胞生长、分化和基因表达等生理学过程和某些病理学过程中起了重要的作用.细胞粘附分子——整合素是机械信号转导中重要的跨膜分子.细胞通过整合素与胞外基质蛋白、细胞骨架蛋白以及聚焦粘附激酶等的反应，将感应的力信号转化为化学信号，从而调节细胞的生理机能，其中整合素与胞外基质蛋白之间的动态和特异性反应在细胞的机械信号转导过程中起了功能性作用.

摘要:

摘要:随着人类基因组计划实施而开展的动物基因组计划受到了科学界和各国政府的支持. 无论是作为一种实验用模式生物，还是作为一种农业经济动物，鸡都有着独特的生物学特性和经济学价值，因此，开展鸡基因组研究是十分有意义的. 综述了近年来鸡基因组研究（包括鸡基因组的有关参数、遗传连锁图、物理图谱、比较定位、表达序列标签和数量性状座位定位等方面）所取得的成就并对其前景进行了讨论.

摘要:核因子kappaB(NF-κB)是一组重要的转录调节因子，当细胞处于静息状态时，它与抑制蛋白IκB结合以非活性的形式存在于胞浆中.当细胞受到多种外界信号刺激，NF-κB、IκB分别在核定位信号（NLS）的介导下经核孔复合物（NPC）转运入核.在核内，NF-κB与IκB再次结合成复合物，在核转出信号（NES）介导下，经CRM1依赖的途迳出核.该过程是能量依赖的主动转运过程，涉及小分子Ran蛋白及多种可溶性因子.

摘要:为了探讨鼻咽癌表达下调基因NAG7对鼻咽癌细胞系HNE1生长的影响, 构建了NAG7基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/NAG7, 并采用脂质体转染技术将真核重组体pcDNA3.1(+)/NAG7质粒和真核空载体pcDNA3.1(+)质粒分别导入HNE1细胞, 经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆, RT-PCR和RNA印迹检测NAG7基因的表达, 并通过细胞生长曲线、裸鼠接种和流式细胞等方法对转染细胞的生物学行为进行检测.结果显示：转染NAG7基因后，基因表达增加，细胞生长倍增时间较空载体转染和HNE1明显延长，流式细胞技术检测表明，NAG7可延缓细胞由G0～G1期进入S期；裸鼠接种实验显示转染NAG7基因后的HNE1细胞致瘤性受到抑制.上述结果表明：NAG7基因转染后鼻咽癌细胞生长受到抑制，提示NAG7基因是一鼻咽癌相关的抑瘤基因候选者.

摘要:以人食管癌细胞系EC109作为驱赶方（driver），以被一氧化氮（nitric oxid，NO）诱导的EC109作为实验方（tester），应用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)、反向mRNA斑点印迹和RNA印迹等技术手段研究了NO诱导的食管癌细胞中基因的过表达情况.然后对过表达基因的表达序列标签（expressed sequence tag，EST）实施序列测定，并与GenBank进行BLAST同源性比较和序列突变分析.结果先后两次从69个SSH阳性克隆中共鉴定出6个线粒体DNA（mitochondrial DNA, mtDNA）编码的基因，即ND-4L、ND-4、COX-2、Lys-tRNA、ATP-8和ATP-6.表明NO可以诱导食管癌细胞mtDNA编码的基因过表达.另外，在ND-4L/ND-4基因的片段（10 736～11 449）上发现了三处同型单核苷酸置换（10 872 T→C, 11 001 A→G, 11 346 A→G），在COX-2/Lys-tRNA/ATP-8/ATP-6基因片段（8 011～8 589）上发现了一处单核苷酸缺失（8 380 A）.氨基酸序列分析表明，在NO诱导的EC109中可能存在着一种结构异常的ATP-8肽链（一条在N端被截短的只有11个氨基酸残基的肽链，而正常的ATP-8肽链为68个氨基酸残基）.这些研究结果为深入揭示NO对肿瘤细胞的作用机制提供了新的重要线索.

摘要:为了探讨细胞周期蛋白D₁(Cyclin D₁)在鼻咽癌变多阶段病变组织中的蛋白质表达与鼻咽癌变的关系，应用组织微阵列（tissue microarray）技术，采用免疫组化方法检测Cyclin D₁在鼻咽癌旁粘膜上皮单纯性增生/化生(simple hyperplasia/ metaplasia,SH/SM)、异型增生/化生(atypical hyperplasia/metaplasia,AH/AM)和鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的蛋白质表达，阳性表达率分别为30.0%（3/10）、90.0%（18/20）和62.9%（39/62），其中在异型增生/化生中呈“一过性增高”.表明Cyclin D₁高表达可能为鼻咽癌发生过程中的早期事件；异型增生/化生可能是鼻咽癌变的重要“关卡”.

摘要:根据同源性分析设计引物，通过RT-PCR方法从大连蛇岛蝮蛇毒腺总RNA中合成扩增出类凝血酶基因，之后将该基因克隆到表达载体pPIC9K中，经电激转化后整合至毕赤酵母细胞基因组中.经筛选得到甲醇快速生长型转化子His⁺Mut⁺在500 ml摇瓶中培养,甲醇诱导分泌表达.上清液中重组类凝血酶是通过两步柱层析得到：Q Sepharose FF和Benzamidine-Sepharose 4BCL.与天然蛇毒类凝血酶一致，分泌表达的重组类凝血酶具有较强的酯酶活性，但精氨酸甲酯如TAME的水解活性较弱.此重组类凝血酶在37℃中性溶液中保存过夜将分解成小肽，但在0℃下很稳定.该酶的最适pH为8.0.

摘要:利用溶胶-凝胶技术，以四甲氧基硅（TMOS）和γ-氨丙基甲基二甲氧基硅烷（APMDMOS）为前驱体制成了一种功能化的材料——氨基化硅胶.并以戊二醛为交联剂，利用该氨基化硅胶为载体对葡萄糖氧化酶（GOD）进行交联固定化，研究了TMOS用量、戊二醛浓度、给酶量、温度和pH值等因素对固定化GOD活力的影响，并考察了固定化GOD的热稳定性和贮存稳定性.红外光谱验证了氨基化硅胶交联固定化GOD的可行性.确定出了优化的固定化条件：TMOS用量为10%，戊二醛的浓度2.0%，给酶量1 600 U，最适pH和最适温度分别为5.2和32℃.固定化GOD具有良好的热稳定性和贮存稳定性.

摘要:在回转模拟微重力条件下，研究了鸡胚负重软骨细胞骨架的微管系统和碱性磷酸酶活性两项指标的变化，以及1 mg/L亚硒酸钠和5 mmol/L Mg²⁺对这些指标的影响.流式细胞仪对微管含量的测定显示回转后微管蛋白含量的减少，说明微管系统受到不良影响.碱性磷酸酶活性比对照组明显降低，表明模拟微重力能降低软骨细胞的钙化能力.如果在回转前加入SeO^2-₃和Mg²⁺，发现SeO^2-₃可以在一定程度上拮抗模拟微重力引起的微管蛋白及碱性磷酸酶活性改变，而Mg²⁺基本上可以完全拮抗模拟微重力对这两项指标的不良影响.

摘要:利用cDNA微阵列检测了小鼠内毒素休克2 h及20 h肺组织基因表达谱的改变.发现内毒素休克2 h有128个基因表达上调，3个基因下调；内毒素休克20 h有51个基因表达上调，21个下调.并用RT-PCR进一步验证了结果的可靠性.初步分析了基因表达谱改变的意义.有助于从基因组水平阐明内毒素休克的分子机制.

摘要:为探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在内毒素(LPS)对内皮细胞NF-κB激活中的作用,以LPS刺激培养的ECV-304细胞为模型,运用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测了内皮细胞TLR4的表达及LPS对其表达的影响.同时利用基因转染和抗体阻断方法进一步观察了TLR4在LPS对内皮细胞NF-κB激活中的作用.研究发现，LPS能明显上调内皮细胞TLR4的表达，呈一定的时间和剂量依赖性.转染TLR4的功能突变体和运用抗TLR4单抗能明显抑制LPS对内皮细胞NF-κB的激活.提示TLR4介导了LPS对内皮细胞NF-κB激活，可能在LPS对内皮细胞激活/损伤效应中具有重要的地位.

摘要:对人类的728个基因，按其编码区中GC的含量分成四组(从GC＜0.43到GC＞0.58)，分别考察了这四组样本对同义密码子偏好的特征，发现在全部样本中都呈现NTG(N代表四种碱基中的任一种)特受偏爱和NCG尽量避免的特征.基因环境中GC含量与C3/G3含量(密码子第三位C和G的含量)的相关分析，以及四组样本对密码子的偏好都支持以C结尾的密码子在编码中有特殊的优势，这种优势有利于保证翻译的准确性.还考察了各种氨基酸含量随编码区GC含量不同而变化的趋势.

摘要:克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析，与国际标准毒株Rice株相比，两者之间核苷酸序列同源性为98%，推导氨基酸序列同源性为97%.利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹均证明了表达产物为71 ku的GST-gD融合蛋白，其产量占细胞不溶蛋白量的20%左右.以GST-gD融合蛋白作为抗原进行小鼠免疫保护实验，结果表明表达的GST-gD融合蛋白具有较好的免疫原性，不仅能诱导小鼠产生血清抗体（1∶128），还能部分地保护小鼠免受伪狂犬病病毒Su强毒株的攻击.

摘要:将基因工程菌株E.coliBL21(DE3) pET22b-mETIa高密度发酵,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa)蛋白在E.coli中得到较高水平表达，表达量占菌体总蛋白的40%以上.经菌体破碎、包涵体变性、复性,二步柱层析纯化得到电泳纯的rETIa蛋白.测得rETIa对t-PA突变体(NTA)的抑制平衡常数K_i为8.72×10^－8 mol/L.据此利用纯化的rETIa蛋白制备rETIa-Sepharose 4B亲和层析柱.直接一步纯化NTA复性液,纯化的NTA纯度达90 %以上,收率为96.2 %,纯化倍数为13.2,比活为(565.7±71.3) U/μg.

摘要:以海洋生物日本鬼鲉毒腺为材料，应用SMART^TM cDNA Library Construction技术，构建以真核表达载体pcDNA3.0为基础的日本鬼鲉毒腺cDNA表达文库.通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析，获得94个日本鬼鲉毒腺新表达序列标签（ESTs），其中已确定全长cDNA的克隆有35个，包括溶细胞素基因、类短链神经毒素蛋白、C型凝集素、巨噬细胞迁移抑制因子、致病相关基因等，这些基因在日本鬼鲉中绝大多数为首次发现.日本鬼鲉毒腺cDNA表达文库的成功构建，为深入研究日本鬼鲉毒腺的组分及其分子作用机理奠定了基础.

摘要:通过RT-PCR从人外周血白细胞中钓取血管生成素(angiogenin,Ang)cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS-2-1-Ang，对其自身转录激活活性进行鉴定后，通过酵母双杂交系统筛选人肝细胞cDNA文库，获得两个双阳性克隆.序列分析和同源检索表明所获候选蛋白分别为人上皮细胞素和λ晶体蛋白.构建Ang及候选蛋白标签融合表达载体并共转染COS-7细胞，利用免疫共沉淀和蛋白质印迹方法在哺乳动物细胞中验证了Ang与候选蛋白间的相互作用.为阐明Ａng促血管新生的分子机制创造了条件.

摘要:Rab5B类蛋白因为其编码产物的N端具有特殊结构而被认为是一类特殊的蛋白质.水稻rab5B基因Osrab5B是这类蛋白质基因在单子叶植物中的首例发现.将Osrab5B基因的编码序列按正确读码框重组到具有谷胱甘肽硫转移酶（glutathione S-transferase, GST）融合标签的pGEX-4T1表达载体中，转化大肠杆菌，获得了稳定表达目标融合蛋白的菌株，经GSTrap^TM柱纯化，获得了纯化的目标融合蛋白.GTP结合试验表明，在原核细胞中表达出的GST-OsRab5B融合蛋白具有体外结合GTP的能力.

摘要:采用Atlas^TM Rat cDNA Expression Array建立遗传性癫痫易感性P77PMC大鼠和正常对照Wistar大鼠的海马与大脑皮质基因表达谱，用Eagle EyeⅡStill Video System(Stratagene)图象分析仪分析两者基因表达谱差异.结果发现海马和大脑皮质中各有15个差异表达基因.海马组织中，12个基因在P77PMC大鼠中高表达而在正常对照Wistar大鼠中低表达，3个基因在正常对照Wistar大鼠中高表达，而在P77PMC大鼠中低表达；大脑皮质中，13个基因在P77PMC大鼠中高表达，而在正常对照Wistar大鼠中低表达，2个基因在正常对照Wistar大鼠中高表达，而在P77PMC大鼠中低表达. 结果说明，P77PMC大鼠与正常对照Wistar大鼠海马和大脑皮质存在多个差异表达基因，这些差异表达基因可能在癫痫的发生中扮演了重要角色.

摘要:应用RT-PCR方法，扩增人VEGF₁₂₁ cDNA基因片段，与酵母表达载体pPIC9K重组，获得表达质粒p9KVEGF₁₂₁.该质粒转化毕赤酵母菌GS115，用G418-YPD平板筛选高拷贝转化子，PCR鉴定VEGF₁₂₁ cDNA与酵母染色体整合状态，高拷贝转化子用甲醇诱导表达.工程菌用5 L发酵罐发酵,表达产物r-hVEGF₁₂₁占培养液中总蛋白量70%以上.纯化产物促进牛毛细血管内皮(BCE)细胞增殖，并强烈促进血管通透.

摘要:探讨了电转移中蛋白质的透膜现象及其对蛋白质印迹结果的影响.采用抗凋亡抑制蛋白-Survivin的抗体，对细胞裂解液进行蛋白质印迹.与常规操作方法不同之处是：在电转移的凝胶“三明治”中，重叠放置两张硝酸纤维素膜.电转移后，对两张膜同时进行免疫印迹.在特定的转移条件下，两张膜的免疫印迹都出现了Survivin蛋白的特异印迹带，证实了电转移中存在着蛋白质的透膜现象.转移时间、电流强度和蛋白质的分子质量，都是影响蛋白质透膜的相关因素.电转移中蛋白质的透膜，可以产生“印迹复制失真”的效应，从而最终影响蛋白质印迹定性和定量的结果.所得实验结果和结论，揭示了蛋白质印迹技术方法学中一个需要加以充分关注的问题，对于科学掌握和应用该技术具有积极作用.

摘要:采用3 3′-二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术，用乙基3-（3-二甲氨基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）和N-羟基磺基琥珀酰亚胺（NHS）偶联剂将亲和素固定于金电极上，联于生物素标记的探针，制备成压电DNA传感器的检测电极，和杂交液中的待检葡萄球菌肠毒素B的ssDNA进行杂交，通过频率信号检测DNA杂交的量，达到检测的目的.采用不同长度的基因片段进行了研究，制作的传感器一致性、特异性都较好;杂交后的电极，电极再生后，传感器可以重复使用.

摘要:为开展高效毛细管电泳技术对STR位点的检测，通过建立毛细管电泳-短小串联重复序列（STRs）多态性的检测方法，实现了利用毛细管电泳快速检测人凝血因子ⅩⅢB（F13B）STR位点PCR产物的长度多态性，结果F13B-STR基因型分型正确，图谱清晰.方法的建立可简化常规多态性检测，实现快速、准确分离.

摘要:建立了微量材料(1 μg RNA)系列性基因表达分析技术（minimal serial analysis of gene expression, miniSAGE），并用miniSAGE技术对冠心病（coronary artery disease, CAD）患者和正常人成纤维细胞的基因表达谱进行了分析，合成了两个高质量的SAGE库，比较了两个库的SAGE标签，为CAD发病机理的研究提供了大量表达异常基因的资料.从而为后续分离与CAD发病相关的新基因打下了基础.miniSAGE技术是一种有力的基因表达分析方法，可用于微量RNA（1 μg）材料的基因表达分析，为多因素复杂疾病的研究提供了有力的基因表达分析工具.

摘要:p75神经营养素受体在视网膜的发育以及再生过程中发挥着重要的作用，而在人类视网膜中的分布状况尚未被研究. 利用免疫组织化学方法，在光镜水平下确定了p75在人胚胎发育5、6和7个月的视网膜中的分布情况. 在视网膜神经节细胞层出现最强的p75免疫阳性反应，在其他各层也有较弱的免疫阳性反应. 在胚胎6、7月的视网膜中，主要由Müller细胞的终足构成的内界膜上出现了比较强的p75表达. p75在人胚胎视网膜中的分布情况与大鼠视网膜中很类似，主要表达在Müller细胞, 在神经节细胞上也可能有表达.

摘要:以重组人钙调素（rhCaM）、亲环素（rhCyP）、心磷脂和双链DNA（dsDNA）为包被抗原，建立了检测针对上述4种抗原自身抗体的间接ELISA方法，并对聚苯乙烯微孔板（PS）紫外线（UV）辐照前后进行了对比研究.结果发现：PS板经UV-辐照后，可显著改善酶免疫分析的测定效果，自身抗体的测定敏感度和重复性均有显著提高.原子力学显微镜（AFM）表征结果则提供了改善酶免疫分析的直接证据，抗原分子均匀平铺于UV-辐照的PS基底表面，而未经辐照的PS板则抗原分子的吸附率低，且分布不均并有成团聚集现象.X射线光电子能谱（XPS）分析表明，PS板经UV-辐照后，基底表面发生了氧化并引入了含氧的活性基团，O/C元素比较辐照前提高了6.9倍，改善了对抗原生物分子的亲水和化学反应性能，此亦即UV-辐照PS板改善对抗原分子固定效果的主要原因.

摘要:为研究人肾素基因在体内的功能和建立其药物干预实验的动物模型，采用显微注射法，将纯化的人肾素基因导入小鼠受精卵，再培育成转基因小鼠.通过DIG DNA印迹和PCR分析，进行转基因整合检测.在出生的13只子代鼠中，得到一只转基因阳性鼠.整合率为7.7%，有效率0.3%，转基因已稳定传代.RT-PCR显示转基因阳性鼠的肾、心和肺组织中有肾素基因表达，而在肝脏与骨骼肌中则未检测到.阳性鼠血浆肾素活性较对照鼠明显升高，而肾与心脏组织的肾素活性则无明显变化.人肾素转基因小鼠可用于研究循环或组织的RAS中肾素基因的功能及有关其药物抑制实验.

摘要:采用紫外可见吸收光谱技术和闪光光解技术，初步观察了细菌视紫红质(BR)分子在宽pH范围（2.1～12.3）内的特征吸收峰以及M₄₁₂的相对浓度和M₄₁₂的慢成分半衰期的变化，并对其结构和光循环功能进行了讨论.紫外可见吸收光谱实验结果显示：pH=5.0～10.0时，BR最大特征吸收峰值约为568 nm；pH＜5.0时，BR最大特征吸收峰发生红移；pH＞10.0时，BR最大特征吸收峰发生蓝移.闪光动力学光谱结果显示：pH为7.3～9.5时，M₄₁₂的相对浓度(M₀)基本稳定在0.038左右；pH＜7.3时，M₀逐渐减小；pH＞9.5时，M₀明显上升，在pH=11.8时达到最大值0.1355,随后又快速下降.pH为2.1～7.3时，M₄₁₂的慢成分半衰期(t^s_1/2)值在(4.1±1.1)ms左右；pH＞7.3时，t^s_1/2值急剧延长到40 677.4 ms.推测在高pH条件下，BR分子的光循环有新的路径和机理.

摘要:随着人类基因组测序的顺利完成及其他相关领域如机械制造、微电子加工技术及生物信息学方面所取得的进展，以蛋白质为研究对象的蛋白质组学愈显重要，高通量的蛋白质与抗体阵列芯片分析技术正日益为人们关注.对蛋白质分析策略及以阵列为基础的蛋白质芯片分析原理、相关的制备方法与检测技术及其在生物学研究、医学与实验诊断应用方面进行了阐述，并对现阶段该技术存在的不足与发展前景进行了讨论.

摘要:细胞色素c氧化酶的固态薄膜仍具有电子传递活性、其分子内金属活性中心的结构特点及其氧化还原和配位循环变化、光谱特征、物理性控制电子供体或物理性电子供体、开关特性等，使得它适合于分子电子学研究和纳米分子器件的研制，如可擦写纳米存储器.