摘要:Neuronatin(Nnat)是最近克隆的脑特异表达的新基因，在大脑发育过程中被选择性地剪接.人Nnat基因全长3 973 bp，含有3个外显子和2个内含子.Nnat mRNA有α和β两种剪接形式，分别编码81个和54个氨基酸，两者具有同一相位的开放阅读框架，差别在于β形式中间的外显子被剪切掉.人Nnat是单拷贝基因，定位于染色体20q11.2～12.小鼠Nnat基因定位于2号染色体末端.该基因是印记基因(imprinted gene)，仅在父本来源的等位基因表达，而母本来源的等位基因则被甲基化不能表达.该基因在胚胎期及出生后早期大量表达，而在成年和衰老动物大脑中表达明显降低，因此推测该基因与大脑的发育和分化密切相关.成年动物中垂体前叶是Nnat mRNA唯一强表达的地方.推测其蛋白质产物具有疏水N端和亲水C端，是跨膜蛋白，其确切功能尚属未知.

摘要:基质金属蛋白酶 (MMPs) 及其组织抑制因子 (TIMPs) 参与调控胞外基质 (ECM) 的降解与重建，二者的协同作用以及表达的动态平衡保证组织的生理/病理形态结构建成，并完成生长、分化、维持、降解的往复周期. 转化生长因子-β(TGF-β)通过对MMPs和TIMPs家族成员因细胞类型而异的基因表达调控作用，表现出调节ECM重建的生物学效应. TGF-β可通过激活Smad通路、促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 通路，以及刺激激活蛋白-1(AP-1)复合体的形成，完成对MMPs和TIMPs基因表达的调控功能.

摘要:艾滋病（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）侵染表达CD4表面抗原（CD4⁺）的T淋巴细胞而引起的.艾滋病病毒进入CD4⁺T淋巴细胞首先是通过病毒与细胞膜的融合来完成的.该融合过程涉及到病毒表面膜蛋白（gp120和gp41）与细胞表面受体蛋白（CD4和CCR5等）之间的相互作用.根据对这些蛋白质分子结构及作用机制的认识，从破坏病毒与细胞的融合入手，设计新型的抗艾滋药物及疫苗，已成为目前药物开发的新热点.

摘要:由于组蛋白被修饰所引起的染色质结构的改变，在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用，这些修饰主要包括甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等，其中组蛋白乙酰化尤为重要.组蛋白乙酰转移酶（HAT）和组蛋白去乙酰化酶（HDAC）参与决定组蛋白乙酰化状态.HAT通常作为多亚基辅激活物复合体的一部分，催化组蛋白乙酰化，导致染色质结构的松散、激活转录；而HDAC是多亚基辅抑制物复合体的一部分，使组蛋白去乙酰化，导致染色质集缩，并抑制基因的转录. 编码这些酶的基因染色体易位易于导致急性白血病的发生.另一方面，已经确定了一些乙酰化修饰酶的基因在染色体上的位置，它们尤其倾向定位于染色体的断裂处.综述了HAT和HDAC参与的组蛋白乙酰化与癌症发生之间关系的最新进展，以期进一步阐明组蛋白乙酰化修饰酶的生物学功能以及它们在癌症发生过程中的作用.

摘要:目前，糖尿病的基因治疗主要分为替代基因治疗、免疫基因治疗和调节基因治疗三部分.近年来，随着人们对糖尿病本质的深层次揭示和现代分子生物学手段的发展，糖尿病基因治疗的内容不断增加.如：对K细胞的新认识，发现了胰腺十二指肠同源异形盒基因1(PDX-1)的新价值及单链胰岛素类似物基因的构建成功等.另外，还利用各种方法来提高转染效率，增加安全性.如使用腺病毒(HD)载体，应用电穿孔法(electroporation)等.

摘要:骨骼由骨和软骨共同构成.最近的研究表明，转录因子Cbfa1不仅控制骨的形成和生长，还影响软骨组织成熟，并且可能与破骨细胞分化和软骨血管侵入有关.

摘要:DNA错配修复(mismatch repair, MMR)系统广泛存在于生物体中.从原核生物大肠杆菌到真核生物及人类，MMR系统有不同的组成成分和修复机制.人体内MMR基因缺陷会造成基因组的不稳定并诱发遗传性非息肉型直肠癌以及其他自发性肿瘤.大肠杆菌MMR系统中的MutS蛋白可特异识别错配或未配对碱基，目前已经发展了多种基于MutS蛋白的基因突变/多态性检测技术.

摘要:综述了近年来霍乱弧菌的致病性和流行性的研究进展，并讨论了流行性和致病性的关系.编码霍乱毒素CT的基因ctxAB并不是霍乱弧菌基因组自身的成分，而是CTXΦ噬菌体基因组的一部分.CTXΦ能特异性地感染并整合至霍乱弧菌的基因组，成为CTX原噬菌体；携带有CTX原噬菌体的霍乱弧菌在环境因素的诱导下，也能向外界分泌CTXΦ噬菌体.RS1基因元件与CTX基因元件在染色体位置上紧邻，它们在功能上也紧密相关，RS1元件能利用CTXΦ的基因形成一个丝状噬菌体RS1Φ，并能向细胞外分泌，进行水平传播；VPI来源于VPIΦ，VPIΦ能在霍乱弧菌的菌株之间传播；VPI是霍乱弧菌获得CTX基因元件的桥梁.最近，又发现了两个与霍乱大流行相关的两个基因区域,VSP-Ⅰ和VSP-Ⅱ.

摘要:“睡美人 (Sleeping Beauty,SB) ”转座系统是Tc1/mariner转座因子超家族中的一员，是目前唯一取材于脊椎动物的具有活性的转座系统.对近年来有关“睡美人”的研究进展作一个综述，并针对存在的问题提出相应的解决方案.

摘要:促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的十肽激素，是神经、免疫、内分泌三大调节系统互相联系的重要信号分子，对生殖调控具有重要意义.GnRH类似物是近年来应用最广的多肽类激素新药之一.就GnRH及其受体的结构及分布、GnRH在垂体和性腺水平调控生殖的一系列证据、影响GnRH释放的因素等进行了综述，并展望了GnRH研究的发展趋势及应用前景.

摘要:脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质及蛋白质的微区.小窝是脂筏的一种类型，由胆固醇、鞘脂及蛋白质组成，以小窝蛋白为标记蛋白.脂筏的组分和结构特点有利于蛋白质之间相互作用和构象转化，可以参与信号转导和细胞蛋白质运转.一些感染性疾病、心血管疾病、肿瘤、肌营养不良症及朊病毒病等可能与脂筏功能紊乱有着密切的关系.

摘要:人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCGβ)除了在正常的妊娠滋养层细胞中分泌外，在许多肿瘤细胞也大量分泌,是防治hCGβ依赖型癌症的有效目标分子之一.通过RT-PCR方法克隆全长的hCGβ基因，成功构建了PCR3.1-hCGβ DNA疫苗，其能够在HeLa细胞中高效表达hCGβ蛋白，表达的hCGβ蛋白主要存在于细胞内.将20 μg PCR3.1-hCGβ质粒DNA通过普鲁卡因盐酸盐(bupivacaine-HCl)药物诱导后接种小鼠肌肉，小鼠能够吸收质粒DNA，并表达编码的hCGβ蛋白抗原，表达的hCGβ被小鼠的免疫系统识别，同时激发hCGβ抗原特异性的体液免疫和细胞免疫反应，抗体滴度最高可超过1∶8000，并且这两种类型的免疫应答均能够在体外作用于HeLa细胞, 诱导其发生细胞凋亡，表明PCR3.1-hCGβ DNA疫苗激发的免疫反应在体外具有抗肿瘤作用.

摘要:hhlim是从胎儿心脏中新近分离和克隆得到的与心脏发生相关的基因，其表达产物作为转录因子参与多种基因的转录调控和细胞的发育与分化过程.用细胞转染方法将外源性hhlim基因导入处于分化过程中的小鼠成肌细胞C2C12,发现该基因强制性表达可使C2C12细胞体积明显增大.RT-PCR和蛋白质印迹结果表明，hhlim促细胞肥大与诱导α-肌动蛋白(α-actin)过表达及重新启动胚胎基因BNP表达有关.用绿色荧光蛋白-hhlim融合蛋白表达载体转染处于分化过程的C2C12细胞，发现转染不同时间，表达产物的亚细胞定位发生动态变化，表现为先在胞核和胞质中均有分布，而后定位于胞质的变化规律.应用免疫共沉淀证实，hhlim在胞质中以与α-actin 相互缔合的方式存在.

摘要:以50 μmol/L H₂O₂作用体外培养的人胚肺二倍体成纤维细胞4次，使之出现不可逆的衰老表型.提取年轻细胞及H₂O₂处理早老细胞的mRNA，以荧光物Cy3标记年轻细胞cDNA,Cy5标记H₂O₂处理的细胞cDNA，并与点有4 096条人类基因的芯片杂交，利用计算机数据处理判断基因是否存在表达差异.结果显示：有123种基因的表达变化较显著，这些基因参与细胞周期进程、细胞代谢及蛋白质修饰、细胞外基质及细胞骨架蛋白的形成和调节、炎症反应、调节受体酪氨酸蛋白激酶和G蛋白耦联受体信号转导.

摘要:建立核因子-κB(NF-κB)反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白(d2EGFP)报告系统，作为筛选NF-κB拮抗药物及研究其相关信号转导途径的工具.分别以EGFP与d2EGFP为报告基因、neo^r为筛选基因,构建成4×κB基序为增强子、SV40为基本启动子的报告基因载体p4κB-EGFP和p4κB-d2EGFP.两载体分别与p65载体瞬时共转染HEK293细胞,通过比较不同时相点EGFP和d2EGFP的调控表达，证明p4κB-d2EGFP是较理想的NF-κB反应性绿色荧光蛋白(GFP)报告基因载体.将p4κB-d2EGFP稳定转染HEK293细胞，从而获得NF-κB反应性报告细胞株HEK-d2EGFP.应用NF-κB“圈套”寡核苷酸(TFD)与p65载体瞬时共转染HEK-d2EGFP，1 mg/L NF-κB和2 mg/L NF-κB TFD组对p65蛋白诱导调控表达的d2EGFP具有明显拮抗作用.结果表明，NF-κB反应性d2EGFP报告系统可特异、灵敏、动态地反映和监测NF-κB的活性变化.

摘要:突触结合蛋白Ⅰ是神经细胞突触囊泡上的一个膜整合蛋白，C2AB是其具有重要功能的胞质片段.近年的研究表明，突触结合蛋白Ⅰ在钙引发的神经递质快速释放过程中起到钙感受器的作用,它与神经细胞突触前膜的相互作用与其生理功能有关，但是其作用机制还不清楚.利用气/液单层膜技术结合荧光发射光谱和圆二色光谱技术，发现C2AB倾向于插入带负电荷的磷脂膜中(如磷脂酰丝氨酸)，而且插膜是钙依赖性的;对于不带电荷的磷脂不插膜.C2AB与膜之间的作用力主要为静电力.荧光发射光谱和圆二色光谱结果显示，它与膜相互作用时二级结构不发生显著变化.结果表明，突触结合蛋白Ⅰ钙依赖的插入负电荷膜特点，可以帮助解释其钙感受器的作用机制.

摘要:大肠杆菌碱性磷酸酶（E.coli alkaline phosphatase, EAP, EC 3.1.3.1）是一个非特异性二聚体磷酸单酯酶. 采用易错聚合酶链反应(error prone PCR)的方法，在原有高活力突变株的基础上，对EAP远离活性中心催化三联体的区域进行定向进化，经两轮error prone PCR，获得催化活力较亲本D101S突变株提高3倍、较野生型酶提高35倍的进化酶4-186，并对该酶的催化动力学特征进行了分析. 进化酶基因的DNA测序表明4-186含两个有义氨基酸置换：K167R和S374C，二者既不位于底物结合位点，也不位于酶的金属离子结合位点.

摘要:LIM结构域蛋白KyoT可与转录因子RBP-J相互作用而修饰Notch信号途径.以往发现KyoT在成年小鼠肺脏、肾脏和睾丸中有特异性表达，为进一步明确KyoT在小鼠胚胎阶段的表达，故分析了KyoT在小鼠不同胚胎阶段的表达水平变化和胚胎17天时各组织的表达分布.采用RNA印迹发现KyoT在小鼠胚胎的各阶段均表达，而且胚胎17天时表达水平最高.进一步RNA印迹和免疫组织化学检测发现，KyoT mRNA和蛋白质在胚胎17天小鼠的肺、肾以及肌肉中均有高水平的表达.上述结果提示，KyoT在小鼠胚胎发育过程中有特异性表达，且在胚胎17天时KyoT表达器官分布与成年小鼠相似，特异性定位于肺、肾和肌肉等脏器.

摘要:运用cDNA微阵列技术分析NAG7基因重表达对HNE1细胞基因表达谱的影响.抽提HNE1细胞和pcDNA3.1(+)/NAG7/HNE1细胞总RNA，分离polyA mRNA，将mRNA逆转录为cDNA，并在逆转录过程中用³³P-dATP进行标记，与含有16 150个基因和表达序列标签(EST)的cDNA表达阵列膜杂交，获得基因表达图谱.Array Gauge软件分析NAG7基因的重表达所导致的鼻咽癌细胞HNE1基因表达谱改变，并用RNA印迹对微阵列杂交结果进行验证.结果分析表明，2倍以上的差异表达基因或EST 179个，其中表达上调的91个，表达下调的88个；已明确基因表达产物的上调基因29个，下调基因37个.在差异表达基因中，涉及基因转录调控、信号转导、细胞生长、细胞代谢和细胞凋亡等基因.RNA印迹证实生长阻滞特异蛋白1（gas 1）基因表达上调.特别值得关注的是， 先前的蛋白质组研究结果亦发现NAG7基因可导致生长阻滞特异蛋白1表达上调，说明gas 1基因在NAG7重表达的HNE1细胞中具有重要作用，这为深入研究NAG7基因的作用环节和机理提供了重要的线索.

摘要:用基因重组方法制备人类β-淀粉样蛋白前体(APP)N端融合蛋白APP_28～123，应用荧光光谱和圆二色谱技术观测GM1对APP_28～123构象的影响.结果表明：APP_28～123与GM1水溶液和含GM1的脂质体孵育后，其荧光强度明显增强，最大发射峰位蓝移20 nm；APP_28～123在溶液中的二级结构以α螺旋为主，峰位在208 nm和222 nm，而APP_28～123与PC/GM1脂质体或GM1水溶液孵育后，其二级结构虽以α螺旋为主，但摩尔椭圆度(θ)值明显增强. 以上结果表明GM1改变了APP_28～123二级结构，提示GM1引起APP分子构象的改变，可能影响APP分子正常生理功能和跨膜转运过程.

摘要:蛋白质的磷酸化与去磷酸化调节方式在细胞信号传递过程中占有极其重要的位置. 建立鉴定蛋白质磷酸化的可靠方法具有重要意义. 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白(ataxia-telangiectasia mutated, ATM）是直接感受DNA双链断裂损伤，并起始诸多DNA损伤信号反应通路的主开关分子. 电离辐射（IR）细胞学反应中，ATM激酶可通过磷酸化活化p53蛋白，原核表达p53融合蛋白，免疫沉淀IR活化的野生型ATM蛋白，进行蛋白质的体外磷酸化反应. 实验验证了ATM对p53蛋白的磷酸化作用. 这一方法的建立可为研究细胞信号转导途径中蛋白激酶对底物的磷酸化作用及筛查激酶底物提供标准化的技术手段.

摘要:为研究Ndrg2基因在人类肿瘤发生发展中的作用，以不表达Ndrg2基因的胃癌细胞系HGC-27和表达Ndrg2基因的胃癌细胞系SGC-7901作为对比材料，以Ndrg2基因转染HGC-27胃癌细胞系，以及用Ndrg2的反义寡核苷酸封闭SGC-7901胃癌细胞系中Ndrg2基因的表达.发现Ndrg2可以抑制HGC-27胃癌细胞的软琼脂集落形成，有一定诱导细胞凋亡的作用，对细胞周期蛋白E的表达有明显下调作用.当封闭了SGC-7901胃癌细胞中Ndrg2基因表达的软琼脂集落形成受到抑制，流式细胞仪检测发现此时的SGC-7901细胞周期被阻滞在G1期，细胞周期蛋白D1和E表达下调.Ndrg2基因对两种肿瘤细胞中的细胞外信号调节激酶(ERK)和P38的表达也有不同的影响.

摘要:为阐明在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1，LMP1)激活的NF-κB信号转导通路中的靶分子，采用EBV阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1-LMP1细胞，利用噻唑蓝(MTT)法，观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对CNE1和CNE1-LMP1细胞生存率的影响.采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对NF-κB活性的作用.利用间接免疫荧光法，观察EGCG对NF-κB（p65）核移位的影响，再分别提取CNE1和CNE1-LMP1的胞浆及胞核蛋白，通过蛋白质印迹分析EGCG抑制NF-κB（p65）的核移位后胞浆及胞核蛋白中NF-κB（p65）的变化.采用蛋白质印迹分析EGCG对IκBα的磷酸化水平的影响.采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对EGFR启动子活性的影响，并用蛋白质印迹分析EGCG对EGFR自身磷酸化的作用.结果表明EGCG对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量依赖性，并可抑制NF-κB的活性.EGCG能抑制 NF-κB（p65）的核移位，并抑制IκBα的磷酸化.EGCG对NF-κB信号通路下游的靶基因EGFR的启动子活性及自身磷酸化都有抑制作用.由上述结果可以推断，EGCG对信号转导通路上的NF-κB、NF-κB（p65）、IκBα、EGFR多个靶点分子具有干预作用.LMP1是EB病毒编码的蛋白质，因此，EGCG抑制与病毒相联系的信号转导通路，可能是EGCG抑制与病毒相关的肿瘤的分子机制之一.

摘要:

摘要:采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）眼柄视神经节端髓X器官（MTXO）三种类型神经内分泌细胞对0.01～5mmol/L γ氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）的反应，并结合选择性拮抗剂和激动剂的使用进行了GABA受体研究.在电流钳模式下，依据不同Nernst Cl^－电位，三种类型细胞均对GABA产生去极化或超级化反应.在电压钳模式下，GABA激活Cl^－通道电流（I_GABA）.I_GABA在灌流GABA后约1 200 ms内激活，800 ms内达到峰值，没有明显的脱敏反应，反转电位接近Nernst Cl^－电位.I_GABA幅值呈浓度依赖性，激活阈值为0.01 mmol/L，约在0.5 mmol/L达到饱和.药理学实验结果表明，中华绒螯蟹眼柄神经内分泌细胞GABA受体是Cl^－通道蛋白，对Cl^－离子通道阻断剂Picrotoxin和Niflumic acid敏感，但是对GABA_A受体拮抗剂Bicuculline和GABA_C受体激动剂cis-4-aminocrotonic acid (CACA)和trans-4-aminocrotonic (TACA)均不敏感.

摘要:为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35-GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断，构建了可表达P35-GST的JM109细胞株.采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化，用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blot)分析所表达的蛋白质，并用纯化的重组蛋白进行IgM-酶联免疫吸附测定法(IgM-ELISA)检测不同病人血清中的抗-P35抗体. SDS-PAGE分析发现P35-GST重组蛋白的大小约60 ku，为一亲水性蛋白，蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应.利用P35-GST为抗原，对60例血清进行IgM-ELISA分析，发现P35-GST可明显区分近期感染和既往感染，在弓形虫的诊断上有很大的应用前景.

摘要:采用脂质体转染的方法，将含持续激活蛋白激酶B的真核表达质粒转染到SMMC 7721肝癌细胞中，研究蛋白激酶B对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响.用RNA印迹及蛋白激酶B测活鉴定,并获得稳定表达持续激活蛋白激酶B的细胞株，用MTT法、软琼脂克隆形成率及细胞周期测定等方法检测超表达蛋白激酶B的7721细胞增殖情况，结果显示超表达蛋白激酶B的7721细胞生长能力增强，软琼脂克隆形成率增高，S期细胞增多，p27^Kip1表达下降.用流式细胞术检测悬浮培养诱导的细胞失巢凋亡，发现超表达蛋白激酶B能抑制细胞失巢凋亡.上述结果提示蛋白激酶B能促进肝癌细胞增殖，抑制细胞凋亡.

摘要:介绍了用分子动力学模拟与热力学积分法相结合，模拟蛋白质与配体的绝对结合自由能的方法.通过分子转换法，使蛋白质分子（包括水分子）与配体小分子之间的相互作用逐渐减弱 （或增强）至完全消失（或完全出现）. 运用体约束方法，计算了配体与受体结合后平动、转动自由度的丧失即熵效应所引起的自由能变化.以胰蛋白酶双突变体（D189G/G226D）与极性配体苯甲脒为例，研究了蛋白质活性部位与极性配体的相互作用对结合自由能的影响，该复合物绝对结合自由能的模拟结果(－15.5 kJ/mol)与实验值(－10.5 kJ/mol)相近.

摘要:为对北京汉族D3S1358、vWA、FGA、D8S1179、D21S11、D18S51、D5S818、D13S317及D7S820等9个STR基因座的遗传多态性进行群体遗传学研究，利用荧光标记复合扩增及毛细管电泳自动荧光检测的方法，对236名无关个体获得9个STR基因座等位基因的分布频率，结果均符合Hardy-Weinberg平衡.计算了各基因座的杂合度（H）、个人识别能力（DP）、偶合率（PM）、非父排除率（EPP）和多态性信息总量（PIC）等群体遗传学数据.结果表明，这9个STR基因座多态性好，灵敏度高，可用于人类遗传分析及法医学中的亲子鉴定和个人识别.

摘要:指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一种新的组合化学技术.体外构建了一个长度为81 nt、含有35个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库，优化了ssDNA文库扩增为双链DNA (dsDNA)文库的PCR反应条件.通过对比不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果，确定了以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA.由于脱氧核糖核酸的疏水性导致ssDNA文库与硝酸纤维素滤膜的结合背景过高，因此选择以微孔板为介质，分离与靶蛋白结合的适配子.经过9轮循环筛选，随机ssDNA文库与丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(C蛋白)的结合率从0.5%上升到32.5%.

摘要:双向电泳是蛋白质分析的一门较为精确的技术.对电泳方法进行改良并采用普通垂直薄板等电聚焦技术，不仅大大降低了蛋白质双向电泳的成本，而且操作过程简单，是一种用于初步分析蛋白质的较好方法.在中华卵索线虫(Ovomermis sinensis)雌雄成虫可溶性差异蛋白的分析中获得了较满意的结果.这一改良方法的建立，可望促进双向电泳的广泛应用.

摘要:差异表达基因的检测与分析已成为研究具有差异的生物学表型的常规策略.对通过实验所获得的差异基因片段进行生物信息学分析，主要包括基于国际互联网的序列相似性分析、片段重叠群分析和全长cDNA序列分析，以及如何构建局域网并采用本地服务器进行规模化的数据分析，从而为研究人员提供可参考的生物信息学数据分析方案.