摘要:Prion病是指一类由蛋白质错误折叠导致的具有传染性的疾病.人类的纹状体脊髓变性病、库鲁病、脑软化病，和致死的家族性失眠症以及动物的羊瘙痒病和牛海绵状脑炎即疯牛病，都是致死性的神经退行性疾病，它们都属于传染性海绵状脑炎,统称Prion病.PrP^C是Prion蛋白在细胞内的正常形式，PrP^Sc是其致病形式.根据“protein only”假说，PrP^C向PrP^Sc的转化是致病的关键步骤.简要介绍了PrP蛋白的结构特征、PrP^C向PrP^Sc转化的可能机制、影响PrP^C向PrP^Sc转化的重要因素和PrP在细胞内的生物学过程等方面的研究进展，讨论了Prion疾病的诊断和治疗方法.

摘要:

摘要:孤啡肽(nociceptin或orphanin FQ)发现于1995年底, 它是阿片受体样受体(ORL1或LC 132) 的内源性配体，在痛觉调节、心血管系统、离子通道、依赖和耐受、学习和记忆等方面具有广泛的生物学活性. 最近几年, 对孤啡肽受体与相关配体构效关系的研究成为一个新的热点.对在研究构效关系过程中所发现的孤啡肽受体相关配体（片段、拮抗剂、激动剂、部分激动剂和阻断剂）的研究情况进行了介绍.

摘要:免疫系统的基本功能是“自己”与“非己”识别.对入侵物的识别是免疫防御的起始，最终引发效应物反应系统，包括吞噬作用、包被作用、激活蛋白酶级联反应和黑化作用以及诱导抗菌肽的合成等，从而清除或消灭入侵物.研究证明，这种“非己”识别是因为存在某些特异性的、可溶的或与细胞膜结合的模式识别受体，可以识别或结合微生物表面保守的、而在宿主中又不存在的病原相关分子模式.模式识别受体通过对病原相关分子的识别启动先天免疫防御.近年来这方面的研究进展很快,已经在无脊椎动物中确定了多种模式识别受体,包括肽聚糖识别蛋白、含硫酯键蛋白、革兰氏阴性菌结合蛋白、清除受体、C型凝集素、硫依赖型凝集素、Toll样受体和血素等，并对其性质和功能进行了研究.

摘要:表达载体的设计对于提高外源基因在哺乳动物细胞中的表达量十分重要.而表达载体中最为重要的元件是启动子.一些常用病毒来源的启动子，如巨细胞病毒即早期启动子(P_CMV-IE)仅在S期激活，应用这类启动子表达外源蛋白需要宿主细胞不停增殖，这对于连续持久大规模培养的宿主细胞不现实.而人延伸因子1α亚基启动子(P_EF-1α)不受细胞周期限制，且启动子强度高于P_CMV-IE，对于大规模外源蛋白的生产较为理想.首先构建了基于P_EF-1α启动子的哺乳动物细胞表达载体pED5，在增殖缓慢的CHO细胞中，此载体表达外源蛋白的能力是应用P_CMV-IE启动子表达载体的4.1倍.由于启动子一般仅能决定基因转录的本底水平，而转录激活因子(transcription activators)对基因转录的影响更大，所以另把两个人工转录激活结构域AH和VP2接到λ噬菌体cⅠ蛋白的C端，它们通过cⅠ蛋白结合于已插入到P_EF-1α启动子的TATA框上游约200 bp的λ噬菌体O_R2-O_R1序列上，而被“征募”到P_EF-1α启动子TATA框附近，从而促进基因的转录.把上述元件均整合进一个表达载体中，构建了两个新型表达载体pER-AH和pER-VP2.pER-AH表达外源蛋白的能力比不含转录激活因子的表达载体略高，而pER-VP2表达外源蛋白的能力则比不含转录激活因子的表达载体高2.7倍.

摘要:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象，观察干扰素-γ(IFN-γ)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响.以便探讨IFN-γ在动脉粥样硬化发生发展中的作用.采用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出, 高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量.运用逆转录-多聚酶链反应和蛋白质印迹分别检测ABCA1 mRNA与ABCA1蛋白质的表达, 采用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度.发现IFN-γ引起THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性增加, 而ABCA1 mRNA和蛋白质表达、细胞平均ABCA1荧光强度以及apoA-1介导的胆固醇流出呈时间依赖性减少, 细胞内胆固醇增多.结果表明IFN-γ抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出,同时增加细胞内胆固醇聚积.

摘要:一种分离自豆类的新型凝集素不仅具有凝集活性，还具有体外长期维持造血干/祖细胞的能力.由眉豆（Dolichos lablab）中分离得到了这种多亚基的凝集素——FRIL（Flt3 receptor-interacting lectin），并对它进行了核酸和蛋白质序列分析.免疫细胞分析显示，它的受体是CD34⁺造血干/祖细胞所特有的.在培养基中添加这种凝集素可长期维持CD34⁺细胞存活和增殖能力.以Flt3配基（FL）作为对照，在28天的培养时间内，相对于FL，FRIL可维持细胞较高的G0/G1期比例（80%以上G0/G1期）和长期培养中（14天以上）1.5倍以上的集落形成量.可见FRIL通过滞留造血干/祖细胞于G0/G1期而维持它们的自我更新潜能.

摘要:应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(GR)结合的蛋白JAB1，进一步验证JAB1与GR的结合作用并证明其对GR的影响.构建与Gal4-BD融合表达的载体pGBKT7-GR LBD，与构建于pACT2载体上的人骨髓cDNA文库杂交，在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp选择培养板上培养，经X-α-gal检测，阳性克隆片段插入pGEM^®-T Vector 载体，测序，再经酵母双杂交和GST pull down蛋白质结合实验验证其结合作用，应用反映GR转录活性的CAT报告基因检测JAB1对GR的调节活性.结果在人骨髓cDNA文库中,筛选到42个X-α-gal检测变蓝且含有pACT2质粒序列的克隆，其中有5个克隆的序列皆为Jun活性区结合蛋白JAB1的一部分.酵母双杂交和蛋白质结合实验表明，JAB1与COS7真核表达的GR-LBD在体外有结合作用.JAB1加强GR转录激活的能力.

摘要:利用生物信息学，遴选编码ＳＰＡ及ＳＰＧ蛋白的基因，进行密码子优化，将目的基因分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链，采用一步升温后T4 DNA连接酶连接的方法，合成了编码ＳＰＡ及ＳＰＧ蛋白的融合基因.将其克隆到pSK质粒进行扩增, 经测序、修正后再克隆到表达载体，高效表达了带His6的融合蛋白——蛋白ＡＧ.将蛋白ＡＧ共价结合到表面带羧基的磁粒上，形成蛋白ＡＧ磁粒复合物，用此复合物可在1 h内从大鼠、小鼠、人、猕猴、马、羊及猪等常用实验动物血清中纯化ＩｇＧ.

摘要:对本实验室克隆的小麦春化相关基因VER2编码蛋白的氨基酸序列进行软件分析，确定了具有免疫原性的一段（204～215位）含12个氨基酸的短肽，用化学法合成了该短肽并将其与牛血清白蛋白（BSA）相偶联，用偶联物作为抗原免疫家兔获得该12肽的抗体. 分别用VER2全蛋白抗体和该12肽抗体对VER2蛋白进行免疫细胞定位比较分析，两者所得结果一致，即二者在免疫组化检测蛋白质时的灵敏性和特异性方面具有一致的特性. 结果表明,化学法合成短肽制备的抗体可用于蛋白质的免疫组织细胞化学分析, 该方法快捷灵敏，且具有较高的特异性.

摘要:通过体外重组的方法，将asd基因插入重组表达质粒，使抗生素抗性失活，并与弗氏志贺氏菌FWL01构成宿主-载体平衡致死系统. 通过蛋白质印迹结果表明，在没有抗生素条件选择的情况下，可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6. 重组菌通过口服和鼻饲免疫小鼠后，可以诱生CS6血清IgG抗体；同时可以检测到分泌型IgA产生，表明重组菌可以诱导相应的黏膜免疫反应.

摘要:碱基错配致使PCR扩增产物中存在突变序列.大量模板PCR扩增时突变序列所占的比例较低，对随后进行的PCR产物分析影响不大，但当对微量甚至单个模板DNA扩增时，情况则完全不同.对单分子PCR产物的错误率进行了理论分析，结果表明：根据实验目的和条件，选择忠实性不同的聚合酶是十分关键的.

摘要:血凝素(HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质.根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列，设计合成了1对H9 HA特异引物，以AIV A/Chicken/Henan/1/1999/(H9N2)核酸为模板，通过RT-PCR扩增出1条1.6 kb cDNA片段.将HA基因插入pVAX1中，构建了真核表达质粒pVAX-H9.采用活体电击法免疫3周龄SPF鸡10只，剂量为50 μg/只，3周后加强免疫一次，5周后以100倍鸡胚感染剂量(EID)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒.其间每周检测抗体水平变化，6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离.结果为攻毒后免疫组鸡HI效价为9log2～10log2，对照组为2log2～4log2；免疫组病毒分离数为0/10，对照组为10/10.表明所构建的HA基因表达质粒可作为基因疫苗诱导鸡产生免疫保护反应.

摘要:Logistic确定型增长模型可被用来描述严重急性呼吸道综合症（SARS）的流行规律，通过对部分国家、地区及中国内地部分省市的数据进行拟合，及其对拟合结果的分析，揭示了各个地区SARS传染力不均匀的现象，以及在控制措施上的差异所带来的不同效果.同时，还对超级传播现象（SSEs）等问题进行了讨论.

摘要:提出一个简单有效的蛋白质设计方法，这一方法完全基于物理学原理. 与同类工作相比，该方法在很大程度上可节省对序列空间进行的搜索，是对同类工作的简化与发展. 对三个平面格子模型进行的检验表明该方法是成功的. 该方法可进一步用于真实蛋白质的三维非格子模型.

摘要:ARF(alternative reading frame)作为INK4a/ARF的β转录产物，能够稳定p53, 诱导细胞周期阻断或凋亡.利用高表达p14^ARF的人黑色素瘤细胞模型,探讨了ARF抑制细胞增殖的分子作用机理.研究发现p14^ARF高表达能将细胞周期阻断在G1和G2期, p53, p21^cip1和p27^kip1蛋白水平明显增强, 而p-ERK1/2,CyclinD1和CyclinE蛋白水平下降, 明显抑制细胞生长. 提示p14^ARF能通过ERK(extracellular signal-regulated kinase)信号通路相互协调作用抑制A375细胞增殖.

摘要:血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的PCR产物克隆于T载体上，经转化JM109感受态菌株后,随机挑取8个白斑菌落，混合后制成混合模板.采用3条引物，做两轮重叠PCR反应，获得了VEGF的突变基因，经PCR鉴定，酶切鉴定和测序分析表明所得基因为目的产物.实践证明这种突变方法简单快速，为下一步实验大量引入突变奠定了实验基础.

摘要:半导体量子点是无机纳米结晶，构成于硒化镉核心和硫化锌外壳.这种荧光标记物的发射光强是常用有机荧光染料的20倍，稳定性是其100倍.量子点的发射波长取决于核心粒子的大小，而每一种单色量子点的发射波长窄而对称.这些光学特性使量子点在医学诊断、药物的高速筛选以及基因和蛋白质的高通量分析方面具有广泛的应用前景.基于量子点的稳定性和生物相容性，有可能通过标记不同颜色的量子点到不同的分子，观察它们在活细胞内的运动.