摘要:氨酰tRNA合成酶是生命进化过程中最早出现的一类蛋白质，氨酰tRNA合成酶帮助氨基酸转移到相应的tRNA上，进而参与蛋白质的合成保证了生命体的严谨性和多样性.随着后基因组时代的到来，氨酰tRNA合成酶的结构和功能成为新的研究热点.结构生物学和生物信息学的研究结果表明,氨酰tRNA合成酶在真核生物体内以多聚复合物的形式行使功能，形成复杂的分子网络体系.最新的实验证据显示,氨酰tRNA合成酶不但是蛋白质合成过程中一类最重要的酶，而且参与了转录、翻译水平的调控、RNA剪接、信号传导和免疫应答等众多生命活动.

摘要:Rho是小分子质量GTP酶Rho家族成员，在细胞的一些信号转导途径中起着分子开关的作用.Rho能通过作用于肌动蛋白骨架系统引起轴突生长锥塌陷，从而抑制轴突生长.研究表明，Nogo-A、MAG、OMgp等髓鞘源性的轴突再生抑制分子均可通过激活Rho介导的信号转导途径抑制轴突再生.

摘要:单股正链RNA病毒种类繁多，其宿主涉及人、动物、植物，对人畜健康和农业经济生产都有重大的影响.病毒基因组3′UTR内的序列形成茎环、假结、TLS等高级结构，既可以作为顺式元件，又可以结合蛋白质反式因子，对病毒的转录、复制、翻译都有调控作用.简要介绍了单股正链RNA病毒代表种属的3′UTR内高级结构与功能的研究方法、主要进展和存在的问题.

摘要:漂白后荧光恢复和漂白荧光丢失技术是蛋白质动态变化研究中常用的两项技术.近年来，利用这两项技术对细胞核内蛋白质动态变化的研究表明：一些蛋白质在细胞核内是运动的，能和各自所在的区域快速结合和解离；并且这种运动主要以被动扩散的方式进行，不消耗代谢的能量；另外蛋白质的共价修饰可对某些蛋白质的运动产生影响.细胞核内蛋白质的动态变化对细胞核的结构组成和基因表达的调控都具有重要的意义，但详细的机制还有待于进一步的研究.

摘要:前期研究观察到一种现象, 在正常妊娠的胎盘中细胞粘附分子CD146选择性地表达在侵入性滋养层细胞中, 而在滋养层细胞侵入不足的先兆子痫病人的胎盘中CD146表达降低或缺失.本文进一步研究了CD146分子影响滋养层细胞侵入行为的作用机理.免疫荧光实验显示CD146分子选择性地表达在具有侵袭能力的中间滋养层细胞,而在非侵入性的细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞中不表达.细胞功能实验表明,影响滋养层细胞侵入性的两个关键要素,即细胞迁移和基质金属蛋白酶的分泌,都受到CD146特异抗体的显著抑制.这些研究结果提示，粘附分子CD146是影响细胞侵入行为的关键分子.这为深入研究胚胎植入和肿瘤浸润的分子调控机理提供了一个关键的分子模型.

摘要:转移性和侵袭性是恶性肿瘤的重要特征，与基因和蛋白质水平上一系列改变密切相关.应用mRNA抑制性消减杂交技术和双向电泳结合肽质量指纹分析技术，对涎腺腺样囊性癌高、低转移细胞系的mRNA和蛋白质表达谱的差异性进行比较研究.实验结果显示，在抑制性消减杂交中，分别以两个细胞系为测试子，共获得差异片段34个，其中高转移株细胞中高表达的基因序列有6个，低转移细胞系中有28个，其中包括两个新的表达序列标签（EST）.对这些基因序列，进一步以RNA 斑点杂交对这些基因的表达状况进行验证并排除假阳性结果，结果发现,32个基因在mRNA水平上有不同程度的表达量改变，改变趋势与消减杂交结果一致.以蛋白质等电聚焦结合SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的双向电泳技术获得的总蛋白质分离,经PDQuest2DE软件分析结果表明, 高转移细胞系表达谱的平均蛋白质点数为(978±38), 低转移细胞系的平均蛋白质点数为(996±27).其中高转移细胞与低转移细胞相比,其蛋白质点有355个未被匹配 ,低转移细胞相比高转移细胞有222个未被匹配.对其中10个差异较明显的蛋白质点,进一步进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF-MS)测定肽质量指纹图谱,用Peptident软件对SWISS PROT数据库比较分析,结果显示,Stratifin、Symplekin和乳腺癌相关抗原NY-BR-20等蛋白质在高转移细胞中表达，在低转移中未被检测到,B7蛋白质在低转移细胞中高表达，在高转移细胞中低表达.结果表明涎腺腺样囊性癌高转移特性与多种基因、蛋白质相关，这些基因或蛋白质参与血管生成、蛋白质合成、信号传递、细胞周期调控、分子伴侣以及免疫共刺激等多种生理活动.同时在mRNA和蛋白质水平上进行表达谱分析使结果更全面，具有明显的互补性，这些结果为进一步探索腺样囊性癌肿瘤转移分子机理以及肿瘤控制和基因治疗提供了重要的依据.

摘要:通过导入特定基因的dsRNA特异性地关闭该基因的功能，由此产生的现象为RNA干涉.为在家蚕胚胎发育时期建立有效的RNAi技术体系，在前人的基础上以家蚕第三白卵基因Bmwh3为材料,建立了有效的RNAi技术体系，结果表明，成功诱导第三白卵突变表型的有效注射时间为产卵后8 h内，wh3dsRNA的有效浓度须大于2.0 g/L.在发育胚胎的第三天注射wh3dsRNA，同样可诱导第三白卵突变的另一表型——半透明蚁蚕，根据实验结果初步推测,Bmwh3不仅参与眼色素和卵浆液膜色素前体的转运，还可能参与胚胎体壁色素前体的转运.

摘要:蛋白质分子向细胞外分泌的过程有赖于信号肽的介导.基因陷阱是功能性基因克隆的一种有效方法，经典的基因陷阱以geo作为报告基因，对所克隆的基因类型没有选择性.将绿脓杆菌外毒素、2A序列、IL-2受体穿膜区以及新霉素磷酸转移酶的基因依次融合构建新型报告基因——peo，该报告基因能够特异性地甄别具有信号肽编码序列的基因.为验证peo对信号肽编码序列的特异性甄别作用，以peo为报告基因，构建了3种质粒载体，分别模拟用基因陷阱载体进行筛选时可能出现的3种情况，通过转染HeLa细胞、G418筛选以及碱性磷酸酶检测，证明peo能够有效地区分信号肽和非信号肽编码序列，以peo为报告基因改造的基因陷阱载体可以用于分泌蛋白基因的筛选.

摘要:肝细胞生成素（HPO）具有复杂的生理功能，在睾丸中的高表达提示其在生殖活动中的重要性，而不仅局限于肝再生.构建了酵母表达载体pGBKT7-HPO，采用酵母双杂交系统，以HPO为诱饵蛋白，从人睾丸cDNA文库中寻找能够与HPO相互作用的蛋白质.经过筛选、验证阳性克隆，并进行PCR、测序和序列比对，得到4种相互作用蛋白质：NADH脱氢酶1、钠/钾ATP酶β3亚基、磷脂酶C δ1以及附睾分泌蛋白.提示HPO可能参与了细胞的蛋白质合成，能量代谢等.通过对候选蛋白的研究，为探讨HPO对睾丸组织细胞功能的调节机制提供了重要的线索.

摘要:微管蛋白（tubulin）是一蛋白质超家族，其中α-，β-微管蛋白是主要的微管蛋白，而γ-微管蛋白主要在微管组装中起作用. 我们利用蛋白质印迹和激光共聚焦技术研究了γ-微管蛋白在猪卵母细胞成熟、受精和活化中的分布. γ-微管蛋白存在于猪卵母细胞中，并且在减数分裂成熟各个时期的量保持不变. 它聚集在微管上，特别是中期纺锤体的两极和后末期的中板. 体外受精和孤雌活化后，γ-微管蛋白聚集在雌雄原核的周围.另外它也存在于精子的顶体帽和颈部.在早期卵裂中，γ-微管蛋白聚集在胚胎的细胞核周围.实验结果表明，γ-微管蛋白在猪卵母细胞、精子和胚胎的微管组装中起重要的调节作用，在猪受精过程中，精子和卵子都向受精卵贡献中心体物质.

摘要:为探讨磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶2(PEMT2)过表达抑制大鼠肝癌细胞增殖的机制,构建了PEMT2高表达细胞克隆,并采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞仪技术,研究了PEMT2过表达对PI3K/Akt信号转导途径的影响.实验结果显示，PEMT2过表达可抑制细胞PI3K和Akt的表达，并诱导细胞凋亡.这一结果提示，PI3K/Akt信号转导途径下调可能是PEMT2抑制肝癌细胞增殖的部分机制.

摘要:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(MM-LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)在此过程中的作用.MTT法测定细胞存活率；相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡；³H-花生四烯酸(³H-AA)预标法测定PLA₂活性；蛋白质印迹检测cPLA₂磷酸化；激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化.结果表明，MM-LDL(100～300 mg/L)作用后的HUVECs呈现凋亡典型的形态特征，凋亡率随MM-LDL浓度的增加而上升.MM-LDL能引起胞内钙离子浓度增加，cPLA₂的活化及磷酸化.15 μmol/L AACOCF₃和5 mmol/L EGTA在抑制cPLA₂活性的同时，部分抑制MM-LDL诱导的HUVECs凋亡.加入外源性AA(50 μmol/L)能逆转AACOCF₃引起的凋亡抑制.结果提示，cPLA₂参与了MM-LDL诱导HUVECs凋亡的信号传递.

摘要:利用cDNA微阵列技术快速筛选具有较强降解木质纤维素能力的白腐真菌粗毛栓菌(Trametes gallica)的表达基因.利用木质素生物降解模式菌株黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）的cDNA制备研究所用微阵列.在含有2 596个cDNA片段的芯片上共检测到172个阳性克隆，其中有165个克隆的荧光信号比值（Cy-5/Cy-3）在0.5和2.0之间，占所检测阳性克隆数的95.9％.对应于在限氮条件下生长５天和12天的粗毛栓菌培养物，分别有３个和４个时序特异性差异表达基因.随机挑取122个克隆进行测序和序列比对，发现所测序列中有118个能够很好地定位于黄孢原毛平革菌的基因组上.结果显示，粗毛栓菌与黄孢原毛平革菌在表达序列上存在较大差异，表明这两种真菌之间存在着较远的亲缘关系.通过同源性比对分析，发现２个令人感兴趣的克隆，一个对应于黄孢原毛平革菌过氧化物酶基因lpoB的部分片段，另一个为编码一种热激蛋白的基因.

摘要:利用双向电泳技术,对人源巨噬细胞U937感染异烟肼耐药结核分枝杆菌前后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析，发现其中产生差异的有32个蛋白质斑点，利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术,对其中5个表达明显上调的蛋白质斑点进行分析鉴定，获得5个明确的肽质量指纹图谱，通过在数据库中进行检索分析，确定这5个蛋白质分别为热休克蛋白105_β、凋亡抑制蛋白-1、磷酸甘油酸变位酶1、组织蛋白酶B、桥粒胶蛋白3.上述发现有助于了解耐药结核分枝杆菌入侵早期导致的巨噬细胞蛋白质组表达变化，为深入研究耐药结核分枝杆菌-宿主相互作用提供了探索方向.

摘要:为了研究免疫毒素发挥生物学作用的全过程，构建了两种不同形式的基于假单胞菌外毒素(Pseudomonas exotoxin A,PE)的抗癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）免疫毒素CEA(Fv)/PE38/KDEL和PE35/CEA(Fv)/KDEL.用流式细胞术经间接免疫荧光法测定免疫毒素的抗原结合活性.免疫毒素的内化(internalization)通过间接免疫荧光标记的方法在激光共聚焦显微镜下进行检测，采用流式细胞术进行免疫毒素内化的定量分析.细胞凋亡采用FITC-annexin V/PI双荧光染色方法进行分析.用噻唑蓝(MTT)法测定免疫毒素的靶细胞杀伤功能.对两种形式的免疫毒素在各个功能阶段的性质进行研究和比较，全面展现了免疫毒素发挥生物学功能的过程及各个生物作用过程之间的相互影响，为详尽的机制研究和免疫毒素的进一步优化改造提供了重要的依据.

摘要:随着转基因植物种类的增多，转基因植物的检测也成了当今的热门话题.电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合，实现了检测的高效、准确、无毒害.电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合起来，用于检测CaMV(cauliflower mosaic virus)35 S启动子，从而判断其是否含有转基因成分.PCR产物与生物素标记的探针杂交，可以起到筛选的作用；与三联吡啶钌标记的探针杂交则可用于电化学发光检测.两种探针同时与转基因样品PCR产物杂交，使结果避免假阳性的影响而更加准确.实验表明：此方法可以准确地检测到35 S启动子的存在.该方法灵敏度高，可靠性强，操作简便，结果准确，有望成为一种高效的转基因检测方法.

摘要:蛋白质是各种生命活动的主要执行者，因此构建蛋白质相互作用的网络图对于准确理解蛋白质功能、揭开各种细胞活动的奥秘十分重要.串联亲和纯化（TAP）,是近年来发展出来的一种能够快速研究在生理条件下蛋白质相互作用，揭示蛋白质复合体相互作用网络的新技术，已成为研究蛋白质组学的一个重要工具.随着该技术的不断完善，TAP技术在认识蛋白质相互作用的过程中必将发挥越来越重要的作用.