摘要:概述了血浆蛋白的研究现状、难点和策略.血浆是血液中无形的液体成分，是一种十分复杂和多样化的基质，包含数百万种蛋白质和小分子多肽、盐、类脂、氨基酸和糖等.血浆蛋白参与机体免疫、凝血-抗凝血、物质运输、营养和对生长信号调节等多种重要的生理功能.人体器官的病理变化可导致血浆蛋白在结构和数量上的改变，这种特征性的变化对疾病诊断和疗效监测具有十分重要的意义.然而，迄今为止人类对血浆蛋白的了解还十分有限，只有很少一部分血浆蛋白被用于常规的临床诊断.全面而系统地认识健康和疾病状态下血液循环中血浆蛋白的性质，会极大地加速对具有疾病诊断和治疗监测作用的血浆标志蛋白的研发.国际人类蛋白质组组织于2002年首先选择了血浆蛋白质组作为人类蛋白质组首期执行计划之一，其初期目标是：a.比较各种蛋白质组分析技术平台的优点和局限性；b.用这些技术平台分析人类血浆和血清的参考样本；c.建立人类血浆蛋白质组知识库.

摘要:脂肪组织不仅是能量的储备器官，也是一个重要的内分泌器官.它协助神经系统和其他内分泌器官维持机体的内平衡.近年来，一些研究表明脂肪组织与免疫反应有着密切的联系.人们发现脂肪细胞分泌的瘦素不仅调节机体的能量代谢和控制脂肪的积累，还参与调节单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能，是一种作用广泛的细胞因子.脂肪细胞分泌的其他因子如脂联素也有免疫调节作用.免疫刺激还会作用于淋巴结周围的脂肪组织，引起这些脂肪细胞发生脂解作用.脂肪组织与免疫系统的相互作用，进一步表明生命是由各系统组成的一个有机统一体.随着对这一领域的研究不断深入，可能为某些疾病的治疗提供新的途径.

摘要:核开关是一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA元件.它位于特定的mRNA区域，可以不依赖任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响该mRNA的活动.核开关在特定细菌中，参与调控包括维生素B₁₂和甲硫氨酸生物合成等在内的代谢途径.核开关的发现，尤其是其可以特异性紧密结合特定配体，从而精确调控生物基本代谢途径的特征，使人们开始关注它在科研和医学上的应用潜力.核开关的研究进展、主要特点和作用机制已经引起了人们的关注和思考.

摘要:为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用，采用酵母双杂交技术，选择p93 N端第101～372位氨基酸构建诱饵质粒，筛选成人心脏cDNA文库，寻找与之相互作用的蛋白质，结果得到蛋白peroxiredoxin 3（PRX 3）.采用体外结合实验和免疫共沉淀等方法，证实了原核和真核表达的p93确实可与PRX3相互作用，通过双重荧光共定位，为二者的相互作用提供了定位依据.研究提示p93可能参与心肌细胞中与PRX3有关的各种生理病理过程，如生长、分化、发育、凋亡、氧应激等.

摘要:A类清道夫受体（scavenger receptor，SR-A）是一种主要位于巨噬细胞膜表面的同源三聚体糖蛋白，能够结合和摄取多种配基并介导内移.在清道夫受体胞浆域有几个潜在的磷酸化位点，有关这些磷酸化位点与受体功能之间的确切关系目前尚所知甚少.为深入探讨A类清道夫受体胞浆域与磷酸化之间的关系,以及受体胞浆域磷酸化对受体功能的影响，实验以含有SR-A cDNA质粒为模板,采用PCR方法扩增不含胞浆域序列的清道夫受体，同时扩增全长清道夫受体作为对照.PCR产物经纯化酶切后，进一步亚克隆到PcDNA3.1/HisB中，测序结果表明,重组产物能够编码正确的氨基酸序列.重组产物经脂质体Lipofectamine(LF2000)介导转化入CHO细胞中，在含G418选择性培养液中培养筛选14天后，分离阳性克隆, 继续培养.采用流式细胞计数仪（FACS）鉴定转化筛选后细胞能否表达具有功能的清道夫受体.结果发现,转化的CHO细胞可以稳定表达SR-A的蛋白质，但受体胞浆域去除后,摄取配基的能力明显弱于全长组（1∶1.337）.用荧光DiI标记乙酰化低密度脂蛋白(DiI-AcLDL),37℃孵育转化细胞5 h后,激光共聚焦显微镜下观察到：全长受体转化组细胞荧光散在分布于细胞膜和细胞器，而去除胞浆域组荧光只局限于细胞膜，说明SR-A胞浆域可能起着介导受体内移的作用.进一步比较蛋白激酶C抑制剂星形孢菌素(staurosporine，STA）对两组细胞受体功能的影响，发现经STA处理后，全长组受体与配基的结合及摄取明显增高，而胞浆域去除后受体不受STA的调控.从而证明磷酸化药物可能是通过改变SR-A胞浆域磷酸化水平而发挥作用，受体胞浆域磷酸化可能决定着受体的内移，并参与调节受体的活性.

摘要:分析了来自同一细胞系的体细胞克隆牛甜甜、庆庆、浒娃及来源同一培养转基因体细胞系转基因体细胞克隆牛九妹、乐娃和1个妊娠8个月转基因流产胎牛8C2以及随机抽取的1头鲁西黄牛(LX)、1头褐斯坦牛(HS)在24个微卫星位点标记牛的基因型.结果表明24个多态位点均表现出多态，等位基因数为1～5个，平均为3.17个.根据网上公布的数据，按其最高频率计算，甜甜、庆庆、浒娃、九妹、乐娃、8C2与培养细胞系、转基因细胞系间匹配概率为1.17×10^－36，根据本研究观察到的数据计算，匹配概率为1.90×10^－23；而与随机抽取的1头鲁西黄牛及褐斯坦牛的基因型分别在23和20个位点上完全不同.

摘要:针对基因功能分类体系Gene Ontology的层次结构特点，修改关联规则挖掘算法Apriori，开发“挖掘与基因差异表达关联的GO功能组合”软件(RuleGO).RuleGO以基因表达谱上的差异表达基因集合和不差异表达基因集合为输入，输出组合特征功能类与基因差异表达现象的关联规则，有助于解释基因差异表达现象的本质原因，如疾病发病机制、药物作用机理等.将RuleGO 和OntoExpress应用在结肠癌和腺癌表达谱数据集上，结果显示,RuleGO比OntoExpress能发现更多的与差异表达现象关联的特征功能类，更能看到在OntoExpress上不能发现的组合特征功能类.另外，结果显示,将规则的置信度和支持度要求设置较高时，一般只有组合功能类才能满足要求，这提示在基因表达谱分析中不宜采用单个角度的单个功能分类单元，考虑功能分类单元的组合可能更有意义.

摘要:人类天然抗体可以与猪细胞抗原表位Gal-α1，3-Gal结合，触发超急性排斥反应（HAR），HAR是猪器官移植至人体时的首要障碍.阻断人的天然抗体，阻止其与猪细胞表面特异性抗原的结合，是防止超急性排斥的有效措施.利用噬菌体展示技术，从XCX₁₅随机肽库中筛选与西非单叶豆凝集素(GS-I-B₄）特异性结合的噬菌体展示肽.得到一个小肽序列为SCTALSFPSFAFLARGT,其与人血清中天然抗体的结合可以被蜜二糖（melibiose）竞争性地抑制，同时该小肽还能抑制人类天然抗体介导的猪红细胞的凝集反应.因此，筛选到的小肽能作为人天然抗α-Gal抗体的抑制肽.

摘要:幽门螺杆菌(Hp)是导致胃炎、消化道溃疡和胃癌的的主要病原菌.利用基因重组技术，成功将Hp的ure B和hsp A基因融合.将ure B-hsp A融合基因成功构建到腺病毒载体上.检测结果表明,该重组腺病毒具有侵染真核细胞能力，且能在真核细胞中表达目标抗原.以血清中IgG和新鲜粪便中sIgA，评价其免疫效果，结果显示,该重组腺病毒载体双价疫苗能在小鼠体内激发体液免疫和黏膜免疫反应.

摘要:帕金森氏病(PD)是由于多巴胺能神经元变性、坏死，导致黑质-纹状体系统的多巴胺含量下降而引起的一种神经系统退行性疾病，目前还没有一种很好的方法能使之治愈.Neurturin（NTN）能特异地作用于中脑多巴胺能神经元，对该类神经元具营养和保护作用.经静脉注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导恒河猴产生帕金森氏病模型，并在NTN治疗组，注射MPTP之前48 h脑室内注射重组毕赤酵母表达的人NTN 1 mg. 结果表明：模型组猴均逐渐出现了PD症状，而NTN治疗组猴，PD症状比较轻或不明显；荧光分光光度法测定MPTP模型组猴黑质、壳核和尾状核多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量结果与正常对照组相比均显著降低，NTN治疗组猴的黑质、壳核和尾状核中的DA、5-HT和5-HIAA与对照组相比无显著性差异，而与模型组相比，DA、5-HT和5-HIAA含量均明显增加；光镜检查MPTP模型组猴黑质神经元细胞明显脱失，而NTN治疗组猴黑质神经元细胞丢失不明显，与正常对照组猴无差别.上述结果表明，制备的重组人NTN在恒河猴体内能保护中脑黑质多巴胺能神经元不受MPTP的损伤，使其DA含量及多巴胺能神经元维持正常，在MPTP存在下没有发生PD症状.

摘要:为探讨细胞因子信号传导抑制因子-3（suppresso of cytokine signaling-3, SOCS-3）在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系.通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组，取左、右侧皮层，左、右侧海马及下丘脑，以RT-PCR法间接测定SOCS-3 mRNA水平.结果表明：a.在左利鼠右侧皮层中,SOCS-3基因表达水平显著高于左侧皮层(P＜0.05)；右利鼠左侧皮层SOCS-3表达显著高于左利鼠左侧皮层(P＜0.05).b.海马中SOCS-3表达：左利鼠右侧海马SOCS-3表达显著高于左侧海马(P＜0.05)；右利鼠左侧海马SOCS-3表达显著高于左利鼠左侧海马(P＜0.05).c.右利鼠下丘脑中SOCS-3显著高于左利鼠(P＜0.05).上述研究结果提示，Balb/c小鼠脑中SOCS-3表达与脑不对称性有关.

摘要:FP-TDI (fluorescence polarization template-directed dye-terminator incorporation）是一种操作简单、实验投入少、适于高通量反应的单核苷酸多态等位基因分型技术.使用两种评价分型图像质量的数值指标，可以有效地对分型结果进行评价，使该技术得到了改进.在此基础上优化了实验条件，并应用该技术，对人类基因组3号染色体上随机选取的337个单核苷酸多态性位点进行了高通量分型，反应的一次成功率达到59.94%.

摘要:Factor C是鲎血细胞中的一种丝氨酸蛋白酶原，因其能以高亲和力结合脂多糖(LPS)，在医药产品的内毒素检测中起着重要的作用.以往研究表明处于N端的3个Sushi结构域对Factor C的LPS结合活性起着关键作用, 而Factor C N端的其他3个结构域，包括Cys-rich结构域、EGF-like结构域和Lectin-like结构域对LPS结合活性的影响尚不清楚.利用Bac-to-Bac昆虫细胞表达系统可使rFactor C及其4个截短的片段rCES123L，rCES123，rS123L 和rS123获得表达，并且可采用亲和层析柱将这5个重组表达产物纯化.通过测定5个重组表达产物的LPS结合活性及抑菌活性，可以确定Factor C的LPS结合位点位于S123区域.尽管Cys-rich结构域、EGF-like结构域和Lectin-like结构域中不存在LPS结合位点，但当这3个结构域同时存在时,可提高Factor C或CES123L的LPS结合能力，因此rCES123L具有与rFactor C非常相近的LPS结合能力.实验结果表明,rCES123L在昆虫细胞中的表达量比rFactor C高出4倍，预示出rCES123L在医药领域的应用前景.

摘要:分别构建了含cry3A和cry3A+vhb基因的植物表达载体pBCry3A和pBC₃Vhb,并通过根癌农杆菌介导转化了马铃薯. 对转化再生植株进行PCR和DNA印迹分析表明，外源基因已整合到马铃薯基因组中, 且连续三代无性繁殖后转基因仍存在. ELISA分析表明cry3A基因在转基因植株中得到了高效表达, 在单转cry3A植株中最高表达量达0.1%, 转cry3A与vhb双基因株系中为0.065%. 水涝试验显示，转双基因且vhb mRNA的RT-PCR呈阳性的马铃薯植株,对低氧胁迫有较好的耐受性, 表明获得的上述转双基因马铃薯株系可能会具有很好的抗虫和耐涝性能.

摘要:在酿酒酵母中分别引入真菌和细菌的木糖代谢关键酶，木糖还原酶基因XYL1、木糖醇脱氢酶基因XYL2和木糖异构酶基因xylA. 并在此基础上以共转化策略超表达下游关键酶木酮糖激酶基因XKS1. 与亲本菌株相比，用pMA91和YEp24质粒表达XKS1的重组菌株，木酮糖激酶（xylulokinase，XK）活性分别提高了14和6.7倍. 在限氧条件下，重组菌株对木糖和葡萄糖的共发酵结果显示，表达XYL1，XYL2以及XKS1的重组菌株HSXY-251木糖消耗为12.4 g/L，提高了120.9%，乙醇产量达到9.4 g/L，提高了36%，副产物木糖醇产量为0.7 g/L，下降了84.9%.

摘要:为研究黄瓜花叶病毒(CMV)弱病毒株的基因组RNA和卫星RNA的含量变化，将一个卫星RNA介导的CMV弱病毒株NDM-1与CMV强毒株在4种寄主系统上进行对照实验.采用RNA点杂交方法，检测从早期接种病毒到大田释放阶段（病毒接种后5到40天），寄主植物叶组织中的基因组RNA和卫星RNA的相对含量变化.结果显示：弱病毒株NDM-1基因组RNA和卫星RNA负荷量具有寄主效应和时间效应，趋势一致但程度不同.它们在番茄上的变化规律不同于其他寄主而且病毒的致弱效果最明显：在接种后的5～10天 (生产上接种育苗的保护期) ，基因组RNA和卫星RNA相对含量上升，到40天(大田释放期) 时回落至最低.比较NDM-1于不同时间在各寄主上的卫星RNA和基因组RNA的相对比值：在40天时，寄主番茄上的相对比值达15.8，与在其他寄主上和其他时间段比较均有显著差异,即此时卫星RNA达到含量优势.说明弱病毒NDM-1在番茄上的致弱机制为:卫星RNA的大量复制对CMV基因组RNA产生抑制作用.此弱病毒株在烟草和心叶烟中的变化规律基本一致.

摘要:为了高通量地检测大量培养细胞中基因原位表达, 发明了一种制作细胞微阵列的新方法，成功地制作含20种细胞系共100个供体细胞石蜡混合物点阵的细胞微阵列.免疫组化检测P53, P21, PTEN、P16基因在细胞微阵列中的蛋白质表达.原位杂交检测BRD7、NGX6 基因在细胞微阵列中mRNA原位表达.建立了P53、P21、PTEN、P16蛋白和BRD7、NGX6 mRNA 在不同培养细胞中的原位表达谱.细胞微阵列为基因功能研究提供一种新的高通量工具.细胞微阵列可广泛用于DNA、RNA和蛋白质水平上的基因原位表达研究.细胞微阵列还可用于筛选药物作用靶标的研究.

摘要:大规模平行测序技术（massively parallel signature sequencing，MPSS）是以DNA测序为基础的大规模高通量基因分析新技术，通过标签库的建立、微珠与标签的连接、酶切连接反应和生物信息分析等步骤，获得基因表达序列.MPSS具有能测定表达水平较低、差异较小的基因，不必预先知道基因的序列，自动化和高通量等特点，是值得推广的技术.