摘要:果蝇由于遗传易操作性而成为一个研究昼夜节律分子机制的理想模式生物 . 到目前为止，通过遗传学和生物化学方法已经鉴定到 10 多个时钟基因 (clock genes) 和许多时钟相关基因，包括时钟输入基因和钟控基因 . 这些时钟基因以及它们的相应产物组成两个互相依赖的转录 / 翻译反馈环路，从而调节行为和生理的昼夜节律 . 果蝇这种核心钟的工作原理同样见于哺乳动物 .

摘要:多细胞生物机体内，蛋白质糖基化是一个重要后修饰事件 . 蛋白质的糖链不仅仅是区别细胞种类的标志，且与众多的生物现象有关，如细胞发育、分化、形态、肿瘤转移、微生物感染等 . 糖组学的内容主要涉及单个个体的全部糖蛋白结构分析，确定编码糖蛋白的基因和蛋白质糖基化的机制 . 综述了糖组学的分离和结构鉴定技术及其最新进展 .

摘要:20 世纪 90 年代初， Iijima 等从麻蝇幼虫血淋巴分离出一种具有抗真菌活性、能抑制 C.albicans 生长的蛋白质 . 到目前为止，已发现 150 多种肽具有抗真菌的特性，随着被发现的抗真菌肽数目不断增多，人们对抗真菌肽的抗真菌机理也进行了大量的研究，抗真菌肽对真菌的作用方式主要有：阻止、破坏真菌细胞壁的合成；与膜作用，在质膜上形成孔洞，使重要的内容物外泄；与真菌细胞内线粒体、核酸大分子等重要细胞器相互作用；最终导致真菌的死亡 .

摘要:筛选间隙连接蛋白 31 (connexin31 ， Cx31) 相互作用蛋白并研究其在 Cx31 运输中的功能 . 运用制备的抗 Cx31 多克隆抗体免疫沉淀， SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，蛋白质条带回收，蛋白质胶块酶解，电喷雾 - 四极杆 - 飞行时间质谱分析，数据库扫描筛选可能相互作用蛋白，可能互作蛋白经免疫共沉淀、细胞免疫共定位等证实，确定 actin 为 Cx31 相互作用蛋白 . 用药物处理细胞，抑制 actin 的功能，观察 Cx31 定位与间隙连接通道的通透性，确定 actin 在 Cx31 运输中的功能 . 当药物抑制 actin 的功能时， Cx31 很少能到达细胞膜上形成间隙连接通道， Cx31 主要分布在胞质中；当药物抑制 tublin 的功能时， Cx31 能到达细胞膜上形成间隙连接通道，细胞免疫荧光实验显示间隙连接斑有增多的现象，但染料转移实验表明细胞膜上间隙连接通道并没有增加 . Actin 在 Cx31 运输至细胞膜上形成间隙连接通道的过程中具有重要作用 .

摘要:胚胎植入和胎盘形成涉及细胞外基质的降解和重建，以及细胞的增殖、凋亡、迁移和分化，基质金属蛋白酶 (MMPs) 是参与这些事件的主要蛋白水解酶系统 . MMP-26 是近年来发现的 MMPs 家族的新成员，但其功能所知甚少 . 通过半定量 RT-PCR 、免疫组织化学、荧光免疫细胞化学等手段，发现人胎盘中 MMP-26 主要定位于绒毛滋养层细胞，在绒毛间质细胞中也有少量表达 . 妊娠早期，胎盘中 MMP-26 表达水平较高，至妊娠中期降至最低，但在足月胎盘中其表达又有显著提高，提示 MMP-26 可能参与妊娠早期滋养层细胞的侵润和分娩时的胎盘剥离 . 体外培养的妊娠早期人细胞滋养层细胞能产生一定水平的 MMP-26 ，而其表达受到激活素 A 的剂量依赖性刺激，表明滋养层细胞中存在 MMP-26 表达的自分泌 / 旁分泌调节 .

摘要:Syntaxin 1A (Syn1A) 和 Munc18a 蛋白在囊泡转运和分泌中起着至关重要的作用，然而它们在细胞中分选和转运的分子机制目前尚不清楚 . 我们用绿色荧光蛋白 (EGFP) 和红色荧光蛋白 (TDimer2) 分别标记 Syn1A 和 Munc18a ，并用荧光显微技术观察它们在 BHK-21 和 HEK293 细胞中的转运和定位 . 实验结果表明 Syn1A 主要定位在细胞质膜上，而 Munc18a 主要分布在胞浆中，但是与 Syn1A 共表达时能定位到细胞质膜上 . 删除胞浆部分的 Syn1A 蛋白不能上膜，提示其胞浆结构域在分选和定位过程中起着重要的作用 .

摘要:用鸡胚成纤维细胞对来自野外的 5 个传染性法氏囊病毒株 (IBDV-JD1 、 JD2 、 NB 、 HZ1 、 HZ2) 进行分离，测定理化特性、致病性，同时进行血清亚型测定及 A 片段基因组的克隆分析 . 试验所用 5 个法氏囊组织悬液在鸡胚成纤维细胞盲传 2~14 代后适应细胞并产生细胞病变 . 细胞适应的 IBDV 毒株的理化和形态特征与经典传染性法氏囊病毒株一致 . 除 IBDV-HZ1 、 HZ2 属经典 IBDV 血清型外， IBDV-JD1 、 JD2 和 NB 毒株分属不同的血清亚型 . 人工感染实验结果显示，分离的 IBDV 毒株产生与野外病例相似的临床症状和病变，出现法氏囊滤泡髓质的淋巴细胞变性、坏死和消失 . 基因组序列分析显示， IBDV-NB 毒株 A 片段由 3 264 个核苷酸组成，编码由 145 个氨基酸残基组成的 VP5 和由 1 012 个氨基酸残基组成的多聚蛋白 . 与来自 GenBank 的 IBDV Ⅰ型毒株比较， NB 毒株 A 片段编码的多聚蛋白与 JD1 毒株的同源性最高，达 99.5% ， VP2 与 JD1 、 CEF94 、 D78 的同源性为 99.8% ， VP3 与 JD1 的同源性为 99.2% ， VP4 与 JD1 的同源性为 100% ， VP5 与 JD1 ， HZ2 ， P2 ， CEF94 ， CT ， Cu-1 和 D78 毒株的同源性为 99.3%. NB 毒株 VP2 蛋白的第 253 、 280 、 284 位氨基酸残基与 IBDV 变异毒株和经典毒株一致，但不同于 IBDV 超强毒株 . 这些结果暗示 IBDV 的抗原表位是构象依赖性表位， IBDV 血清亚型的形成与 IBDV 弱毒疫苗病毒株密切相关 .

摘要:酵母基因上游与内含子可能存在的转录协同作用

摘要:为探讨甲基 - 苯基四氢吡啶 (MPTP) 注射后脑不对称小鼠纹状体内多巴胺降低程度，及纹状体内细胞因子水平变化， C57BL/6J 小鼠经过伸爪取食试验，筛选为反映脑不对称的左利鼠和右利鼠，并接受 25 mg/kg MPTP 腹腔注射连续 5 天，检测注射后的第 1 天，第 3 天和第 14 天纹状体内多巴胺及代谢物含量和细胞因子 IL-1 β、 IL-6 的动态水平 . 结果表明，无论在左利鼠还是右利鼠，纹状体内多巴胺含量在 MPTP 注射后每个检测时间点都显著降低，纹状体内 IL-1 β水平在第 1 天显著降低，纹状体内 IL-6 水平在 MPTP 注射后每个检测时间点也显著降低 . 实验结果同时表明，左利鼠和右利鼠 IL-1 β和 IL-6 的基础水平有显著不同 . MPTP 注射后，与右利小鼠相比，左利小鼠有较高的多巴胺翻转降低和较低的细胞因子表达，而且，纹状体内多巴胺水平与纹状体内 IL-6 水平呈正相关 . 这些结果提示， MPTP 诱导多巴胺丢失伴随着黑质纹状体系统内细胞因子水平的改变，而且，脑不对称有可能通过影响纹状体内细胞因子水平而进一步影响 MPTP 诱导的多巴胺降低的程度 .

摘要:最近的研究发现，褪黑素对花萼海绵诱癌素 (calyculin A ， CA) 引起的骨架蛋白神经细丝异常过度磷酸化有保护作用 . 为进一步探讨褪黑素对骨架蛋白τ异常过度磷酸化的保护作用及其机制，分别用 CA, CA+ 褪黑素或 CA+ 维生素 E 处理鼠野生型成神经瘤细胞 (N2awt) ，采用 MTT 法测定细胞存活率，用免疫印迹法测定τ蛋白磷酸化水平，用 ³²P- 特异底物标记技术检测 GSK-3 和 PP-2A 活性，并进一步测定了细胞内脂质过氧化产物丙二醛含量，细胞内过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性 . 结果显示：褪黑素不仅对 CA 引起的抗氧化酶活性降低和脂质过氧化的保护作用强于经典抗氧化剂维生素 E ，而且对τ蛋白磷酸化的保护作用也强于经典抗氧化剂维生素 E ；褪黑素可同时激活 PP-2A 又抑制 GSK-3 ，而维生素 E 同时抑制两种酶的活性 . 研究提示：褪黑素既通过抗氧化作用，也通过调节细胞内磷酸化平衡对抗 CA 对神经细胞的毒性作用 .

摘要:ATPase 与植物的耐寒性密切相关 . 运用 mRNA 差异显示技术 (DDRT-PCR) 从耐寒植物川草 2 号老芒麦 (Elymus sibiricus L. cv. ‘ chuancao No.2 ' ) 中获得了受冷抑制的 atpA 基因表达序列标签 (EST) 序列，通过 5 ′ cDNA 末端快速扩增 (RACE) 获得了 atpA 基因全长 cDNA 为 1 754 bp ，开放阅读框 (ORF) 长 1 518 bp ，编码 505 个氨基酸 . 氨基酸序列与小麦、水稻、玉米 atpA 基因分别具有 95 ％、 94 ％、 94 ％的相似性 . 对 2 ℃低温胁迫及解除胁迫后恢复过程中共 13 个时段的 RNA 印迹分析表明， atpA 基因在低温胁迫 12 h 转录受到强烈抑制，在低温胁迫开始后的 4 ～ 8 h 及解除胁迫后的 16 ～ 24 h ，其转录水平明显强于对照 . 实验结果为揭示 CF₁α亚基对调控 ATPase 在植物御冷性反应的作用，以及α亚基在植物低温信号转导中的作用提供了新的线索 .

摘要:淋巴毒素 (lymphotoxin ， LT) 通过 TNFR1 受体传递凋亡信号，从而发挥抗肿瘤活性 . 对 LT 的受体结合区域进行多点随机突变，利用噬菌体展示重组人淋巴毒素 (rhLT) R46 ， S106 ， L130 三点随机突变组合文库和 S106 ～ F110 区域随机突变体库 . 噬菌体库与固相化 TNFR1 受体进行亲和筛选，富集了能与 TNFR1 受体结合的 rhLT 突变体 . 随机挑选 20 个单克隆噬菌体进行 ELISA 受体结合鉴定，其中 80 ％的克隆与 TNFR1 受体特异性结合，有 4 个克隆与 TNFR1 受体的结合能力高于野生型序列的 rhLT. 将这 4 个结合力高的突变体克隆于 pET32a(+) 载体，经过大肠杆菌表达和纯化操作后，检测这些突变体蛋白与 TNFR1 受体的结合活性和对 L929 细胞的杀伤活性，发现 3 个克隆的受体结合性质与其展示于噬菌体上时基本吻合，其中 C199 克隆与 TNFR1 的结合活性比野生型序列的 rhLT 提高了近 30 ％，且其对 L929 细胞的杀伤活性提高了近 90%. 应用噬菌体展示技术对淋巴毒素进行体外进化研究的尝试，为下一步的蛋白质结构和功能研究提供了思路，可成为大分子药物开发的有效工具 .

摘要:磷酸化 tau 是阿尔茨海默病 (Alzheimer's disease ， AD) 的特征性病理改变———神经原纤维缠结 (neurofibrillary tangles ， NFTs) 的主要组成部分 . 最近的研究显示： NFT 存在 Glu391 和 Asp421 位点被截断的 tau 片段，然而， tau 蛋白的磷酸化是否会影响 caspase-3 的切割作用尚不清楚 . 首先纯化重组 tau 蛋白，然后利用蛋白激酶 A (PKA) 、钙 / 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMK Ⅱ ) 和乳鼠海马组织抽提液对其磷酸化，并用 caspase-3 对不同磷酸化的 tau 蛋白进行切割，比较 caspase-3 对非磷酸化和不同蛋白激酶磷酸化的 tau 蛋白的切割特性 . 结果显示：除切割非磷酸化 tau 蛋白外， caspase-3 在体外可分别切割被 PKA 、 CaMK Ⅱ和乳鼠海马组织抽提液磷酸化的 tau 蛋白 . 这一结果提示：磷酸化修饰的 tau 蛋白仍然是 caspase-3 的底物 .

摘要:在非盐依赖层析操作中，吸附介质的成分、结构、密度等性质得到改进，所以料液离子强度的变化不会明显影响吸附 . 与常用的离子交换层析、疏水层析、亲硫层析等方法相比，该类技术能够降低对料液预处理的要求，提高蛋白质的稳定性，同时简化层析操作、降低纯化成本，具有大规模分离纯化蛋白质的潜力 . 近年来开发的多种非盐依赖层析介质与方法，都已在蛋白质纯化中得到应用 .