摘要:RNA干涉现象以一种非常明确的方式抑制了基因表达，对于基因表达的调控、病毒感染的防护、控制跳跃基因具有重要的意义. 它已被作为一种强大的“基因沉默”技术被用于全球的实验室，而且，会推动新的医疗技术的出现.

摘要:用X射线晶体学方法测定的一系列RNA聚合酶Ⅱ复合物结构揭示了真核转录的分子机制.

摘要:鼻咽癌是一种多基因遗传性肿瘤，在中国南方和国外中国南方移民及后裔中发病率极高，严重危害了我国南方地区人民生命健康. 对于这样一种具有明显民族聚集现象和地域差异的恶性肿瘤，目前认为其病理发病机制与遗传和环境因素的共同作用密切相关. 现主要阐述鼻咽癌作为一种多基因遗传性肿瘤的病因发病机制，初步建立鼻咽癌易感基因群的概念和鼻咽癌发生发展过程中易感基因群主导的多阶段性多米诺骨牌效应分子机制假说，为寻找鼻咽癌遗传易感风险因子，筛选鼻咽癌高危人群以及探索鼻咽癌靶向性及个体化的诊断和治疗手段奠定实验与理论基础.

摘要:细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白 (FADD-like interleukin-1β converting enzyme inhibitory protein，c-FLIP)，是一类含有死亡效应结构域 (the death effector domain，DED) 的天然存在的caspase抑制蛋白，在病毒、真核生物、哺乳动物等物种中广泛存在. 近年发现，c-FLIP参与了细胞凋亡的调控，其过量表达能抑制Fas、TRAIL-R等死亡受体介导的细胞凋亡. 随着对c-FLIP作用机理及其分子调节机制的深入研究，发现c-FLIP具有多种生物学功能，并与多种疾病的发生、发展相关.

摘要:蛋白质异常修饰导致错误折叠的机制目前尚不清楚. 提出如下设想：细胞内的蛋白质分子可能发生多种异常修饰，引起蛋白质选择性错误折叠和聚积而导致神经退行性疾病.

摘要:疏水作用是决定生物分子的结构和性质的重要因素，特别是在蛋白质的折叠，药物分子与受体 (蛋白质、DNA等) 的相互作用中起着关键作用. 分子疏水性的强弱决定于分子内非极性基团的含量. 在一定的实验条件下，电喷雾所获得的信号与多肽分子内非极性基团的面积呈现良好的相关性. 因此，采用电喷雾飞行时间质谱法，在数分钟之内快速测定了不同多肽之间的疏水性，所获得结果与色谱法结果一致.

摘要:溴区包含蛋白7(BRD7)是采用cDNA代表性差异分析方法克隆的一个新基因. 研究证实了BRD7能够与乙酰化的组蛋白3结合，其识别位点在组蛋白3的14位氨基酸；并且证实了溴区结构域(Bromodomain)缺失型的BRD7突变体失去了与乙酰化组蛋白3的结合能力. Bromodomain是在进化上高度保守的功能结构域，该结构域在空间构象上具有鲜明的特征：包括4个左手、呈反向平行排列的“螺旋(α_z, α_A, α_B, α_C)”以及2个“连结环”(ZA loop，BC loop). 通过生物信息学等综合分析，预测BRD7可能具有上述特征. 依据上述分析结果，构建了BRD7的Bromodomain相关缺失突变体，通过肽段结合实验分析上述突变体与乙酰化组蛋白3结合的能力. 结果表明，ZA loop与BC loop的完整性对于BRD7结合乙酰化的组蛋白3有着重要的意义. 同时通过免疫荧光分析，证实了ZA loop与BC loop的完整性能够影响BRD7的亚细胞定位. 最后，证实了BRD7与CBP可能存在交互作用. CBP不仅具有乙酰化转移酶活性(HATs)，能够对组蛋白末端进行乙酰化修饰，并且作为一种重要的细胞转录因子广泛参与细胞的各种生物学活动.

摘要:尽管Runx2 和Osterix 都是成骨细胞分化途径中关键的转录因子，但是Runx2 是否能够调控Osterix，还不为所知. 研究发现，在非成骨细胞系，无论是间充质干细胞还是已分化的细胞，以及成骨细胞系中，Runx2都能诱导Osterix的表达. 同时Runx2 能够上调3.2 kb人的Osterix基因启动子活性. 进一步实验证明，在这一段启动子中存在Runx2功能性的结合位点. 因而，实验结果有力地支持了这样一个假设，即Runx2参与了Osterix基因的表达调控. 瞬时转染和荧光素酶双报告分析结果显示，在非成骨细胞中，Osterix 明显上调2.3 kb的Ⅰ型胶原蛋白启动子活性，但Runx2 却不能. 这样的差别暗示，在成骨细胞分化过程中位于Runx2下游的转录因子Osterix是刺激Ⅰ型胶原蛋白基因表达所必需的.

摘要:环境雌激素严重危害人类的健康. 为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染，构建了一种转基因斑马鱼，在这种鱼的体内，利用卵黄蛋白原1 (vitellogenin1，vtg1) 的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白 (enhanced green fluorescent protein，EGFP)的表达. 用1 ng/L的17α-炔雌醇 (17α-ethynylestradiol，EE2) 诱导4天后，仔鱼肝脏中出现绿色荧光. RT-PCR和整体原位杂交实验证实，仔鱼体内EGFP和vtg1的时空表达模式相同. 通过在显微镜下观察转基因鱼的绿色荧光，可以直观判断水环境中是否含有雌激素活性物质. 该研究为环境雌激素的监测提供了一种简便直观的新型工具.

摘要:Wnt信号在中枢神经系统发育过程中起重要的作用，控制着细胞的生长及分化. Wnt3a 是Wnt家族的成员之一，对神经干细胞的增殖及分化有一定的调控作用. 将重组Wnt3a腺病毒转入神经干细胞中，研究Wnt3a在定向诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化过程中的作用. 将神经干细胞分为4组，对照组(不加任何诱导因子组)、抗坏血酸诱导组(AA组)、Wnt3a重组腺病毒诱导组(Wnt3a组)以及Wnt3a重组腺病毒加抗坏血酸诱导组(Wnt3a＋AA组). 结果显示，Wnt3a组细胞中的多巴胺能神经元前体细胞特异性标志Nurr1表达量显著增多，Wnt3a ＋ AA组多巴胺能神经元明显多于AA组，酪氨酸羟化酶(TH)在mRNA水平上的表达是AA组的1.86倍. 蛋白质印迹及免疫细胞化学染色显示，各诱导组均有TH的表达， Wnt3a组和AA组多巴胺能神经元阳性细胞数比例分别为 (5.76±3.34) %和 (37.42±2.54) %，与Wnt3a＋AA组 (73.96±2.61) %比较，差异有统计学意义(P<0.05). 利用高效液相色谱法检测到诱导后的细胞可分泌多巴胺. 结果表明，Wnt3a可促进神经干细胞向多巴胺能神经元前体细胞分化，再通过抗坏血酸的诱导作用，在体外可获得大量的多巴胺能神经元，这些神经元有分泌多巴胺的功能.

摘要:探讨幽门螺杆菌重组蛋白脂质体疫苗的免疫预防作用及可能的免疫机制. 用逆向蒸发法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的重组蛋白和/无免疫佐剂的口服疫苗，并用透射电镜测定其粒径. BALB/c小鼠分为6组，分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、UreB重组蛋白+CT、 脂质体包裹UreB重组蛋白、脂质体包裹UreB重组蛋白和CT、脂质体包裹(UreB+Kat+CT)，每周1次共4次，末次攻击2周再用活幽门螺杆菌(Hp)攻击3次，5周后处死小鼠，行胃组织快速尿素酶试验、Hp的定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分. RT-PCR检测小鼠脾淋巴细胞中γ-干扰素 (INF-γ) 和白细胞介素-4 (IL-4)表达. 脂质体疫苗电镜下负染，显示粒径为 (0.7±0.2) μm. PBS组、空白脂质体组、UreB重组蛋白+CT组、脂质体包裹UreB重组蛋白组、脂质体包裹UreB重组蛋白和CT组、脂质体包裹 (UreB+Kat+CT) 组的免疫保护率分别为0(0/11)、 0(0/11)、58.3%(7/12)、54.5%(6/11)、63.6%(7/11)、75.0%(9/12)，UreB重组蛋白+ CT组免疫保护率与脂质体包裹UreB重组蛋白组比较无显著性差异 (P>0.05)，脂质体包裹UreB重组蛋白+CT组免疫保护率与脂质体包裹 (UreB+Kat+CT) 组比较有显著性差异 (P<0.05). 各疫苗组Hp定植评分均明显低于PBS和脂质体对照组 (P<0.01)，且UreB+Kat双价疫苗组较三个单价疫苗组比较也有显著性差异 (P<0.05). 疫苗组不仅能降低Hp的定植，而且能减轻Hp造成的小鼠胃黏膜的局部慢性炎症反应 (P<0.05)，但各疫苗组间比较未见显著性差异(P>0.05). Hp攻击后，与对照组比较，各疫苗组脾淋巴细胞INF-γ mRNA水平较低 (P<0.05)，而IL-4 mRNA水平则较高 (P<0.05)，各疫苗组间比较未见显著性差异(P>0.05). 研究表明，在小鼠Hp感染模型中脂质体能部分代替霍乱毒素的免疫佐剂作用，在Hp攻击后，未经免疫小鼠体内诱导以Th1为主应答，免疫小鼠体内则诱导以Th2为主的免疫应答.

摘要:通常细菌间环型质粒的接合转移过程中，单链质粒DNA在质粒内部“oriT”接合转移起始位点发生缺刻，接下来，打开的单链质粒DNA通过细胞膜的Ⅳ型分泌系统转移到受体菌中。但是，链霉菌中的接合型线型质粒带有游离3’端，5’端与末端蛋白结合，因而不能以细胞-细胞间方式转移单链缺刻DNA。报道了变铅青链霉菌线型质粒SLP2衍生的环型质粒，与SLP2一样可以高频高效接合转移，并鉴定了接合转移功能区。质粒有效的接合转移功能区包含6个共转录的基因，分别编码一个Tra样的DNA转移酶，胞壁水解酶，2个膜蛋白（可以与ATP结合蛋白相互作用）和一个功能未知的蛋白质。从SalⅠR-/M- 向 SalⅠR/M宿主转移的质粒频率下降表明线型和环型的质粒都是以双链的形式转移的。上述研究结果表明SLP2衍生的线型质粒和环型质粒以相似的与细胞膜/胞壁功能相关的机理进行接合转移。

摘要:利用亚硫酸氢盐测序法分析Holstein奶牛胎儿成纤维细胞 (FFB) 和输卵管上皮细胞 (FOV) 来源的克隆囊胚Xist基因 DNA甲基化状况，以体外受精囊胚 (IVF) 和供体细胞作对照. 克隆囊胚Xist基因处于较低程度的DNA甲基化状态，其中，FFB来源的克隆囊胚Xist基因DNA甲基化程度为43%，而FOV来源的克隆囊胚仅为17%. 在体外受精囊胚中, Xist基因DNA甲基化处于中等状态，为49%. 然而，在体细胞中，Xist基因的甲基化程度较高，FFB为66%，FOV为63%. 这些结果说明，Xist基因DNA甲基化是可以被重编程的，所检测的CpG岛可能调节Xist基因的表达. 结合已发表的实验数据，在同一个体中，FFB来源的克隆囊胚发育率比FOV的低，但其克隆牛胎儿的妊娠率和产犊率比FOV的高，这暗示不同供体核克隆囊胚的重编程是有差异的，并可能影响到胚胎及个体的发育.

摘要:真核生物RNA聚合酶Ⅱ的持续合成能力对基因转录过程中每一个阶段，包括启动子脱离、转录暂停、转录终止以及转录偶联DNA损伤修复过程的调节至关重要. 在RNA聚合酶Ⅱ介导的转录延伸过程中，其和模板DNA及转录产物RNA紧密结合，形成一个非常稳定的延伸三维复合物 (elongation complex，EC). 此特征性“泡”状结构的形成是RNA聚合酶Ⅱ持续合成能力所必需的. 在不依赖启动子及众多转录起始因子的条件下，利用人工合成的RNA与DNA寡核苷酸，在体外组装形成具有功能转录活性的延伸复合物. 结果表明，长度为9个核苷酸的RNA与模板DNA形成的杂合分子对转录延伸复合物的形成是必需的，而非转录模板DNA链的加入导致最终活性转录“泡”状复合物的形成，并可转录形成与模板相关的转录产物，进一步通过在模板DNA的特定位置引入一个乙酰氧乙酰氨基芴修饰基团，可特异性地阻断转录延伸过程，从而显示该系统在研究真核基因转录及转录偶联DNA损伤修复机制中的潜在应用价值.

摘要:RNA干扰 (RNA interfering，RNAi) 现象是动植物体内的一种序列特异性的、转录后基因沉默的过程. 在哺乳动物细胞中，19～25个核苷酸长短的双链siRNA (small interfering RNA) 可有效地抑制基因表达. 利用pBS/H1SP载体，它表达的双链RNA的转录产物可以用来抑制特异性HIV-1基因的表达. 在siRNA实验中，为了比较由H1启动子转录的siRNA在细胞内的作用，使用以绿色荧光蛋白 (EGFP) 为报告基因的载体——pEGFP-C1质粒，在荧光显微镜下，很容易地看到EGFP在细胞中表达. 将HIV-1 siRNA表达载体与表达相应EGFP-HIV融合基因的质粒，共转染人胚肾293细胞，结果表明，和对照质控载体相比，转染了pHIV-siRNA质粒的细胞中EGFP-HIV的表达得到显著抑制. 通过该途径，筛选出能抑制HIV-1基因表达的有效siRNA. 此外，还在同一载体上表达两种或三种siRNA，分别针对不同的HIV基因，获得了良好的抑制效果.

摘要:帕金森病 (Parkinson's disease，PD) 动物模型研究的目的是揭示多巴胺能神经元特异性损伤的机制，进而探索针对这种损伤的神经保护方法或治疗方法. 由神经毒素MPTP 损伤的小鼠PD模型，广泛应用于散发性PD的研究中. 根据注射总剂量、两次注射间隔时间、注射方式的不同，制成了适合于不同研究目的的各种小鼠PD模型. 关于MPTP导致的PD模型动物神经损伤的评价方式也是多层面、多指标并存的. 对MPTP动物模型的起源和MPTP导致多巴胺能神经元损伤途径进行了较为系统的概述，并对MPTP小鼠PD模型的制作方法与评价指标进行较为详细的归纳.