摘要:将病毒逃避RNAi策略的最新进展做一综述．RNA干扰(RNAi)是一个有效的抗病毒系统，并且病毒特异性小干扰RNA (siRNA) 是非常有希望的抗病毒抑制剂．然而，许多病毒已经进化出了高超的策略来干扰siRNA和微RNA(miRNA)介导的沉默通路．深入理解病毒利用的逃避策略将为开发避免病毒逃逸的有效RNAi疗法奠定基础．

摘要:LRRC4是一个脑组织相对特异性表达基因，是采用表达序列标签(EST)介导的定位-候选克隆策略结合5′- RACE技术从染色体7q31～32区域克隆出来的一个富亮氨酸重复(LRR)超家族的新成员．LRRC4是神经系统发育与轴突生长的功能基因．LRRC4的表达与胶质瘤的级别进展呈负相关，其表达缺失参与脑胶质瘤进展的晚期事件．LRRC4能够下调一系列神经生长因子或受体(如IGF，EGF，PDGF，CNTF，bFGF，GDNF和BDNF等)的表达，通过调控多种信号转导通路(K-Ras/c-Raf/ERK/MAPK，PI-3K/AKT/NF-κB，p70S6/PKC，STAT3以及JNK2/c-Jun/mp53等)将U251细胞阻滞在G1晚期，抑制脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭，而且这种抑制作用依赖于它的LRR结构域．LRRC4不能诱导胶质瘤细胞的凋亡，而是诱导胶质瘤细胞向胶质样细胞分化．

摘要:生长抑制因子 (inhibitor of growth, ING) 家族成员是候选的抑癌基因．ING蛋白参与磷脂酰肌醇介导的脂类信号转导通路及激素介导的通路，能够与组蛋白乙酰转移酶、去乙酰化酶等结合参与染色质的重构，调节基因的转录，与p53协同作用，抑制细胞生长，诱导细胞凋亡和DNA损伤修复. ING家族成员通过对基因表达的表观遗传学调控将细胞周期、细胞凋亡和衰老等生物学过程有机联系起来．

摘要:RNA沉默在机体防御病毒入侵和调控基因表达中发挥着重要的作用，目前已成为一种有效的工具应用于基因功能研究和疾病治疗等领域．RNA沉默现象普遍存在于真核细胞中，然而在宿主与病毒漫长的进化过程中，病毒已经演化出一系列逃逸或抑制RNA沉默作用的方法和途径，使RNA沉默效果显著降低，另一方面，哺乳动物体细胞自身也存在调节RNA沉默功能从而使生命活动的调节更加精细完善.为了使RNA沉默发挥它的潜在效应，人们设计出一系列的策略针对抑制RNA沉默效应以达到弱化抑制的目的．全面总结抑制RNA沉默机制及其应用，从而使人们充分认识到使用RNA沉默技术时应考虑到存在的不利因素．

摘要:真核生物的基因组由基因和基因间区组成. 基因转录时，从转录起始点开始到该基因的转录终止点结束，形成独立的转录单元. 然而有少量的文献表明，转录有时会通读基因间区，产生包含上游基因、基因间区和下游基因的融合基因转录本.融合转录本经基因间剪接而成为有功能的成熟转录本.对真核生物转录诱导融合基因的基因间剪接方式、产生机制和意义进行了综述.

摘要:利用细胞核移植技术将NIH3T3细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球，分别移植到去核MⅡ期受体卵母细胞中，通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附植前各时期胚胎DNA甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与DNA甲基化的相互关系．利用Real-time PCR技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附植前各时期胚胎中，印记基因U2afbp-rs基因以及非印记基因eIF-4C基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控．结果表明，克隆胚供体核基因组DNA在核移植后并没有发生主动去甲基化．孤雌桑椹胚核移植后重组胚中U2afbp-rs基因和eIF-4C基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用．

摘要:用基因产物直接测序法对2个遗传性胰腺炎家系中胰腺炎患者 (共有4例成员) 的胰蛋白酶原基因(cationic trypsinogen，PRSS1) 5个外显子进行测序，并分析其各自的临床特征．在4例胰腺炎患者中均出现了PRSS1基因杂合突变，但两家系PRSS1基因突变的位点不同，且临床表现差异较大，其中家系1出现6例糖尿病患者且发病年龄较家系2明显延迟，平均发病年龄为29岁，分析其PRSS1基因发现3号外显子336位碱基存在G→A杂合性突变，为中性突变，表达的氨基酸从赖氨酸(Lys)→赖氨酸 (Lys)，同时在同一外显子的361位碱基还存在另一个G→A杂合性突变，造成121位的丙氨酸 (Ala) 被苏氨酸 (Thr) 所取代，胰蛋白酶原的空间结构发生改变，其与抑制因子的结合位点消失，“保护失败”而产生有活性的胰蛋白酶，造成胰腺自身的消化．而家系2未发现糖尿病患者，其胰腺炎患者的血清肿瘤标志物不增高，先证者 (Ⅲ8) 在胰腺炎发病过程中表现为CD4⁺T /CD8⁺Tcell和乙肝表面抗体 (anti-HBs) 随病程进展逐渐降低，而Ⅲ7不表现出此现象，分析其PRSS1基因发现3号外显子361位碱基同样存在G→A (c.361 G→A) 突变，而且在415位还存在一个杂合性突变点T→A(c.415 T→A)，其中c.415 T→A不存在于Ⅲ7．胰蛋白酶原基因存在多种形式的突变，而且与临床表型相关．

摘要:以来源于成都大熊猫繁育研究基地和中国保护大熊猫研究中心的34只圈养大熊猫(分为a群体和b群体)和7只圈养野生大熊猫(圈养野生群)作为研究对象，利用AY161177～AY161218、Ame-μ5～Ame-μ70和g001～g905 等30个微卫星标记对其遗传多样性现状进行分析，并探讨保持圈养大熊猫遗传多样性的方法．微卫星数据表明，30个微卫星标记多态性好(PIC=0.621～0.640)，圈养大熊猫遗传多样性水平(a群体：A=5.48，Ho=0.475，He=0.696；b群体：A=5.24，Ho=0.453，He=0.719；圈养野生群：A=3.80，Ho=0.514，He=0.725)高于6个濒危物种(Ho=0.210～0.390，He=0.150～0.430)但低于3个非濒危物种(Ho=0.620～0.710)，圈养大熊猫遗传多样性水平都保持在较高水平，但圈养群遗传多样性水平与圈养野生群相比有所降低．F统计量及基因流Nm分析结果证明，a、b两群体间遗传分化程度不高(Nm=2.610，Fst=0.087 4 ，Fit=0.411 6)，存在个体交换和一定程度的近交，b群体近交程度高于a群体(a群体Fis=0.322 1，b群体Fis=0.398 3)．因此，现阶段圈养大熊猫的管理重点是避免近交和遗传多样性丧失，将圈养大熊猫种群作为同一管理单元，把纠正大熊猫系谱中的错误、科学选择大熊猫个体进行群体间交流作为关键点，利用微卫星技术保持和提高大熊猫种群的遗传多样性水平．

摘要:研究了原子氧自由基阴离子(O^－)对大肠杆菌的失活作用和形貌变化的影响．实验所用的O^－ 自由基由新研制的O^－ 发生器制备, 其中[Ca₂₄Al₂₈O₆₄]⁴⁺·4O^－ (缩写为C12A7-O^－)材料是O^－ 发生器中发射O^－ 的部分． 实验结果表明, 大肠杆菌的失活率随O^－ 强度的变化而变化，在O^－ 强度为1.5 μA /cm² 时，细胞的死亡率大大加强，作用120 min后，细胞死亡率超过3个对数量级．通过场发射扫描电子显微镜观察发现O^－ 对细胞结构具有破坏作用．通过丙二醛 （MDA）的形成证实了O^－ 诱导大肠杆菌发生脂质过氧化反应过程的存在，这可能是大肠杆菌死亡的潜在原因． 当1.5 μA /cm²的O^－ 流通入到大肠杆菌悬浊液后，丙二醛浓度开始升高，15min后达到最高值1.2 μmol/g，然后缓慢下降．结果显示，原子氧自由基阴离子能失活大肠杆菌，诱导脂质过氧化反应，这对发展一种新的净化微生物污染方法和研究微生物与原子氧自由基阴离子相互作用具有潜在的意义．

摘要:运用蛋白质组学方法比较研究3个野生大豆 (Glycine soja) 和3个栽培大豆 (Glycine max) 的种子贮藏蛋白差异情况．结果发现，在考马斯亮蓝染色的双向电泳pH 4～7的胶上，经过PDQuest图像分析软件平均可检测到550个左右的蛋白质点．进一步分析发现，表达量变化2.5倍以上的点有10个，其中大部分蛋白质仅在栽培大豆中检测到．对这10个蛋白质点进行了胶内酶解，用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定均得到了肽质量指纹图谱．搜索大豆UniGene库和NCBI库共鉴定出5个蛋白质，主要是与大豆抗性、抗营养以及种子萌发相关的蛋白质，包括大豆血凝素，种子成熟蛋白PM24，糖结合蛋白，胰蛋白酶抑制剂p20以及成熟多肽．对这些蛋白质可能的作用进行了讨论．

摘要:植物液泡膜Na⁺/H⁺ 反向运输体可将细胞质中的Na⁺转运到液泡内储存，以减少胞内Na⁺的毒性.但木本植物如杨树是否有同样的机制目前还不清楚．以欧洲山杨的愈伤组织为材料，捣碎破碎愈伤组织细胞，经过差速离心和不连续蔗糖梯度离心得到纯化的欧洲山杨液泡微囊．通过液泡V-ATPase建立质子梯度，该液泡能够利用此梯度调控Na⁺的转运，表明液泡膜上存在Na⁺/H⁺ 反向运输体活性 (表观米氏常数K_m是11.4 mmol/L)．Na⁺/H⁺ 反向运输体的抑制剂——氨氯吡嗪咪能明显抑制转运体的活性．该Na⁺/H⁺ 反向运输体也可以转运K⁺，但亲和能力比Na⁺低30%．该结果首次证明木本植物的液泡膜上存在Na⁺/H⁺ 反向运输体．初步功能研究表明，愈伤组织在盐胁迫条件下，Na⁺/H⁺反向运输体活性明显下降，提示该机制可能与山杨不耐盐有关．

摘要:细胞周期依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5, Cdk-5)及蛋白激酶A( protein kinase A，PKA)是调节Tau蛋白磷酸化的重要激酶，其对糖尿病(diabetes mellitus, DM)大鼠脑内Tau蛋白磷酸化的作用如何，目前尚不明确．为探讨胰岛素缺乏的DM大鼠海马Cdk-5及PKA对Tau蛋白磷酸化的作用, 用链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)建立DM大鼠模型， Fura-2负载及荧光测定细胞内游离Ca²⁺浓度, 免疫沉淀法测定Cdk-5活性, 放射性配体结合实验检测PKA的活性，蛋白质印迹检测Tau蛋白磷酸化的水平．结果提示：在DM大鼠海马神经元, Ca²⁺浓度升高，Cdk-5及PKA活性升高，Tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202和Ser396/Ser404位点的磷酸化增强．Cdk-5的特异性抑制剂roscovitine可降低DM大鼠Cdk-5活性，但不能降低PKA活性，使Tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202位点磷酸化水平降低，但不降低Ser396/Ser404位点的磷酸化，roscovitine处理正常大鼠后，上述酶的活性及Tau蛋白的磷酸化无明显变化．首次从整体水平上证实DM大鼠海马Cdk-5及PKA活性升高，协同促进Tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202位点和Ser396/Ser404位点的磷酸化，神经元内游离Ca²⁺浓度升高可能起重要作用．

摘要:利用稳定表达绿色荧光蛋白的高度恶性膀胱癌细胞株 BTT-T739-gfp建立皮下肿瘤模型，对比分析在常规免疫抑制剂量下，环孢素、雷帕霉素在肿瘤发展和转移方面的不同效应及其可能的作用机制．24只T739小鼠随机分为对照组、环孢素组、雷帕霉素组．环孢素、雷帕霉素剂量分别为10 mg/(kg·day)、1.5 mg/(kg·day)，腹腔注射．观察荷瘤小鼠生存情况，计算荷瘤容积变化，以及肿瘤在肺和肝脏的转移情况，分析其作用的可能机制．结果显示，常规免疫抑制剂量下，与对照组和环孢素组比较，雷帕霉素具有明显的抗肿瘤效应．雷帕霉素可显著提高荷瘤小鼠的生存，观察期末，对照组、环孢素组及雷帕霉素组小鼠荷瘤生存率分别为62.5%、50%、100%，环孢素组与雷帕霉素组差异显著，在观察期内与对照组、环孢素组比较，雷帕霉素可显著抑制负荷肿瘤的容积．雷帕霉素应用后，肿瘤内血管显著减少，肿瘤细胞分泌VEGF的能力明显降低，与肿瘤血管形成有关基因VEGF、HIF-1α的转录活化明显受到抑制．结果证实雷帕霉素具有显著的抗肿瘤效应，这一作用与其抑制肿瘤内血管形成明显相关．抑制VEGF-A、HIF-1α等促进血管形成因子的转录、表达是其主要的作用方式之一．

摘要:斑马鱼(zebrafish, Danio rerio)是生物学领域中公认的研究脊椎类生物的模式生物．胸苷酸合成酶(thymidylate synthase, TS)是DNA从头合成的限速酶，多年来一直作为肿瘤化疗的重要靶酶．前期的研究表明，人和大肠杆菌中TS能与自身的mRNA结合，在翻译水平上具有反馈抑制自调控现象．斑马鱼作为药物模型的研究已成为热点研究领域，为了探讨斑马鱼的胸苷酸合成酶的调控规律，以及与人TS的相关性，利用原核表达，纯化获得高均一性斑马鱼TS蛋白，采用凝胶迁移研究了TS和其mRNA的体外结合，采用免疫共沉淀：RT-PCR技术研究了它们在体内的相互作用，实验结果表明，斑马鱼的TS在体内外均与自身的mRNA存在特异性的相互作用．研究说明，斑马鱼和人的TS具有高度生物学过程相关性，为构建斑马鱼抗肿瘤药理模型提供了理论基础．