摘要:piRNA (Piwi-interacting RNA) 是最近从哺乳动物睾丸组织中发现的一类能与PIWI蛋白质相互作用，且长度分布在26～31 nt 的新型小分子单链RNA，主要综述piRNA的相关研究进展.

摘要:最近发表于《科学》杂志 (Science)的“人类乳腺癌和结直肠癌共有编码序列”一文，是继人类基因组计划完成后，对人类疾病状态下基因组改变的首次无偏倚系统性分析. 对如何利用该研究发现的候选癌基因获得肿瘤治疗药物的新靶标作初步分析，并介绍这些候选癌基因在识别肿瘤高危人群和依据分子机制更新肿瘤分型方面的潜在应用价值.

摘要:蛋白质的磷酸化是一种可逆性的蛋白质翻译后修饰，在生物体内起着极为重要的作用. 近年来蛋白质翻译后修饰日益成为蛋白质组研究的热点之一. 定量磷酸化蛋白质组学方法和技术的快速发展为研究蛋白质磷酸化时空动态变化，更好地了解生物学功能调节网络奠定了坚实的基础. 作为蛋白质组学研究的一个重要组成部分，定量磷酸化蛋白质组学因其磷酸化蛋白质所具有的独特特征，在技术和方法研究方面将面临更为严峻的挑战. 综述了磷酸化蛋白质组学定量的一些分析技术和方法的发展现状、优缺点以及未来的发展趋势.

摘要:在许多肿瘤组织中均有表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)的过表达，它的失调与肿瘤对化疗和放疗的耐受以及不良预后相关，为肿瘤的治疗提供了一个理想的分子靶点. Cetuximab (C225) 是特异性EGFR单克隆抗体，与化疗或放疗联合应用时具有协同作用，具有毒副作用少、靶向性好等优点. Cetuximab (C225) 已被批准用于对伊利替康抵抗的结直肠癌和头颈部鳞癌的治疗，对非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌等具有EGFR高表达肿瘤治疗的临床试验正在进行之中，为肿瘤治疗开辟了一个全新的领域.

摘要:Nav1.5电压-门控钠通道 (VGSC) 被认为是心肌的特异性通道，但最近的研究发现，该通道在脑组织尤其是边缘系统中亦广泛分布. 此前，在对人神经母细胞瘤细胞钠通道的基因克隆中，发现Nav1.5/SCN5A基因的第6A外显子参与编码该通道. 采用人及鼠脑组织，通过RT-PCR法对Nav1.5钠通道基因进行克隆发现：Nav1.5/SCN5A基因中的第6A外显子参与编码了该通道，而心肌等其他组织却是第6外显子参与编码该通道. 人Nav1.5/SCN5A基因的第6A 和第6外显子都定位于3号染色体，共有92个碱基，都可以编码产生30个氨基酸，但却有7个氨基酸不同. 人和鼠脑组织Nav1.5/SCN5A基因的第6A外显子仅有一个碱基不同，却产生相同的氨基酸序列. RT-PCR法证实第6A外显子在鼠脑的不同部位表达不同， 第6外显子在大鼠不同组织中的表达也不同，这为深入研究不同系统中Nav1.5钠通道的功能提供了基础.

摘要:骨质疏松以及动脉钙化均是危害极大的临床常见病变，骨保护素 (OPG) 可能是联系两者的分子之一. 构建替换型载体pXpPNT-OPG，利用同源重组，将编码前3个蛋白质结构域的小鼠Opg基因组第二外显子序列剔除掉. 通过胚胎干细胞 (ES) 基因打靶获得了正确重组的ES细胞克隆，ES细胞显微注射后获得嵌合体小鼠，交配传代获得杂合子和纯合子小鼠. RT-PCR和蛋白质印迹实验结果显示，纯合子小鼠没有Opg基因的表达. 纯合子小鼠骨量丢失明显，骨生物力学指标明显下降，发生严重的骨质疏松，此外，还有50%以上的纯合子小鼠在早期出现动脉中层钙化. 小鼠破骨功能亢进，与此同时，成熟成骨细胞数量增加，矿化功能强于野生型. Opg基因缺失小鼠骨中钙和磷大量流失，而血清中水平没有变化，这提示钙磷代谢异常不是OPG缺失导致动脉钙化的原因. 对建立的Opg基因敲除小鼠模型进一步深入的研究，将有助于说明动脉钙化和骨质疏松症相互联系的分子机制，为防治骨质疏松症和动脉钙化的并发提供理论基础支持.

摘要:胰岛素样生长因子结合蛋白-7 (IGFBP-7) 已经证实在人的妊娠过程中起了重要作用，但在大鼠中尚未见报道. 在过去的研究中曾利用抑制消减杂交 (SSH) 方法分析了植入前和植入期的基因表达谱，发现IGFBP-7存在差异表达. 通过RNA印迹和原位杂交，分析了IGFBP-7部分序列 (编码区531～928 nt，称作IGFBP-7′) 在大鼠妊娠早期子宫中的时空表达模式. 用RT-PCR方法检测了其在不同组织器官及假孕、人工诱导蜕膜化和延迟着床激活大鼠子宫中的表达模式. 结果显示：在大鼠妊娠第5天IGFBP-7′mRNA的表达量开始增加，第5.5和6天表达量显著高于植入前期. IGFBP-7′mRNA主要表达于子宫腔上皮和腺上皮. IGFBP-7′ mRNA表达无组织特异性，在大鼠的下丘脑、垂体、卵巢、子宫、心、肝、脾、肺、肾等器官均有表达，在假孕的D1～D6大鼠子宫中均有表达，但无显著性差异，诱导蜕膜化后IGFBP-7′mRNA的表达量也无明显变化，但在延迟着床激活的大鼠子宫中表达显著增加. 这些结果提示，在植入期IGFBP-7′的表达增加主要是由胚泡引起的，而非蜕膜化. 在大鼠妊娠早期，IGFBP-7′的表达增加可能有利于胚胎植入的发生.

摘要:为鉴定大鼠胚胎海马神经干细胞 (NSCs) 是否表达功能性的L-型钙通道，L-型钙通道是否参与了对大鼠胚胎NSCs增殖和分化调控. 分离孕15天Wistar大鼠胚胎海马组织，制成单细胞悬液，利用无血清培养技术，在添加bFGF、EGF、N-2和B27 supplement 的DMEM/F12培养液中进行培养. 采用细胞免疫荧光法对原代至第5代细胞进行鉴定,均有巢蛋白 (nestin) 的表达，第3代nestin阳性细胞比例达97%. 把培养的细胞诱导分化5天后，这些细胞表现为神经元和星形胶质细胞的形态,且分别呈Ⅲ型β-微管蛋白 (Tuj1) 阳性和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 阳性；细胞免疫印迹结果显示，NSCs表达L-型钙通道的Cav1.2α₁C亚单位，而无Cav1.3α₁D亚单位的表达；利用全细胞膜片钳技术在NSCs上记录到了L-型钙电流，证明了NSCs所表达的L-型钙通道具有功能. 进一步对细胞进行药理学干预，发现L-型钙通道的激活不仅可以促进胚胎NSCs的增殖，而且使增殖的NSCs向神经元分化的比例显著增加. 以上结果表明，Wistar大鼠胚胎海马NSCs表达功能性的L-型钙通道；L-型钙通道参与了胚胎NSCs增殖和分化的调控.

摘要:采用双向凝胶电泳和质谱技术对日本血吸虫单性感染雄虫和双性感染雄虫蛋白质表达谱进行分析，并在mRNA水平进行验证；观察差异表达SJCHGC蛋白重组真核表达质粒pEGFP-C1/SJCHGC在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位，并分析其表达产物的抗原性. 成功鉴定了9个日本血吸虫雌雄合抱差异表达蛋白，其中在日本血吸虫雄虫合抱前表达上调的蛋白质有6个；而有3个蛋白质在日本血吸虫雄虫合抱后表达明显上调. 大多数差异蛋白功能涉及血吸虫的生长发育、生殖、营养、运动、信号传递等过程. 重组质粒pEGFP-C1/SJCHGC 融合基因真核表达载体在真核细胞COS-7中获得了表达,可用荧光显微镜直接观察其表达情况及亚细胞定位,细胞所表达的融合蛋白具有血吸虫抗原性. 研究结果为揭示日本血吸虫雌雄合抱机制、研制抗血吸虫雌雄合抱疫苗提供了理论依据.

摘要:RNA沉默技术作为探索基因功能的实验手段应用于多种生物. 以编码酿酒酵母NADPH依赖型醛糖还原酶的GRE3基因为对象，检测酿酒酵母双链RNA介导的基因沉默效应. 以pESC-LEU为骨架，构建重组质粒psiLENT-GRE3并用于转化酿酒酵母YPH499. 用RT-PCR检测到诱导1 kb RNA双螺旋和136 bp loop结构引起的GRE3基因表达下调. 结果表明，双链RNA介导的基因沉默技术，能够用作降低酿酒酵母某一特定基因表达水平的工具. 并有助于理解芽殖酵母的RNA干扰现象.

摘要:作为阐明一种从富硒灵芝中得到的蛋白(Se-GL-P)结构与功能关系的基础性工作，Se-GL-P的结构在此得到了初步表征. 分子质量通过电泳和分子筛两种方法进行了测定，通过高效液相色谱、毛细管等电聚焦电泳、原位胶内酶切和Edman降解等方法分别测定了蛋白质的氨基酸组成、等电点、肽图以及N端氨基酸序列等方面的性质，并对其同源性进行了鉴定. 结果表明，该蛋白质的相对分子质量为36 600，等电点为4.01，N端20个氨基酸序列为DINGGGATLPQKLYLTPDVL. 实验得到结论：Se-GL-P是一种新的硒蛋白，并属于功能性DING蛋白家族的一员.

摘要:超凝集DNA是质粒DNA的一种特殊拓扑结构形式，最初在大肠杆菌SD108 (topA⁺ gyrB225)细胞中被发现. 现在大肠杆菌DM800(topA^－ gyrB225)细胞中也发现了这种结构，这说明超凝集DNA的形成与细胞内旋转酶活性降低有直接关系，而与拓扑异构酶Ⅰ的存在与否无关. 体外实验的结果显示，具有很强的正超螺旋松弛活性的拓扑异构酶Ⅳ可以将超凝集DNA完全松弛，这也证明质粒DNA的超凝集结构与超螺旋结构在细胞内是可以互变的. 使用原子力显微镜对分离到的pBR322 DNA超凝集结构进行分析，并与普通超螺旋进行比较，结果表明，超凝集DNA分子的结构发生了巨大的变化，其分子长度比正常超螺旋分子缩短了约30%，宽度和高度则增加了60%，结构更接近于A型DNA. 另外，原子力显微镜研究结果表明，氯喹的嵌入并非改变了超凝集DNA的超螺旋状态，而是使其打结并最终压缩成一团.

摘要:金纳米微粒对可见光的强吸收特性使得光能可以高效地转换为热能. 由于金纳米微粒的尺度在几十纳米范围，并且很容易与其他生物体结合，因此可以在局部范围进行激光选择性加热，这非常适合作为分子或细胞的靶向. 采用这种金纳米微粒辅助激光热作用方法，对牛肠碱性磷酸酯酶 (alkaline phosphatase aP) 的选择性破坏，细胞膜的通透性提高以及对细胞的选择性灭活进行了试验并得到了很好的结果. 此外，还讨论了用这种方法进行基因转染以及选择性光热治疗一些疾病的可能性.

摘要:HIV蛋白酶 (protease，PR) 耐药突变的大量出现严重地影响了AIDS的治疗. 应用突变PR对展示HIV PR 靶序列随机文库的噬菌体进行切割筛选，可获得突变PR的敏感噬菌体，该噬菌体可用于针对 HIV PR耐药突变株的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor，PI) 新药筛选. 为了探索这一可能性，将包含HIV PR靶位点P2/NC序列的Gag蛋白CAP2NC片段展示于噬菌体表面，并在该片段的N端连接一可与人免疫球蛋白分子特异结合的固相化标签序列LD3，将该噬菌体固定于人免疫球蛋白包被的酶标板上，用HIV SF2 PR进行切割，用抗M13噬菌体酶标抗体ELISA法检测未被切割的剩余噬菌体以反映切割效果. 结果表明，所构建的噬菌体能被HIV PR有效切割，最大切割效应可达80%以上，其ELISA检测值明显下降，并且该切割效应与HIV PR呈明显的量效关系，能被PI 类药物Indinavir (IDV) 特异抑制. 首次成功构建了展示HIV Gag CAP2NC片段的噬菌体蛋白酶切割模型，不仅可为研究HIV PR的耐药性变异及其靶序列的适应性变异提供一新的研究平台，同时也为构建一种全新的PI类药物，尤其是针对耐药的PI类药物大规模体外噬菌体筛选模型打下基础.

摘要:通过平板流动腔装置对大鼠成骨细胞施以流体剪应力，研究剪应力作用对成骨细胞中骨保护因子(osteoprotegerin， OPG)，破骨细胞分化因子 (osteoclast differentiation factor，ODF) 基因表达的影响. 分别考察了剪应力大小和作用时间，以及单一水平和梯度变化的剪切力加载方式的影响. 运用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测OPG、ODF mRNA和蛋白质表达的变化，结果显示，剪切力作用下OPG的表达得到促进，ODF的表达受到抑制，mRNA与蛋白质表达的变化一致，这种影响与剪切力的大小和作用时间有关. 1.0和1.5 N/m²的剪应力作用效果比0.5 N/m²明显，梯度变化的作用方式在作用效果上与最后一个梯度水平相当的恒定剪应力单独作用没有显著差异，在加载的24 h内剪应力对OPG、ODF表达的影响始终存在. 这种影响使得OPG/ ODF的平衡向着OPG占优的方向发展，这种变化意味着骨吸收会受到抑制，提示力学刺激可能通过OPG/ODF调控系统对骨代谢平衡进行调控.