摘要:综述了脂质组学的研究现状和发展趋势．脂质组学是对生物体、组织或细胞中的脂质以及与其相互作用的分子进行系统分析的一门新兴学科．脂质具有多种重要的生物功能，脂质代谢异常可引发诸多人类疾病，包括糖尿病、肥胖症、癌症以及神经退行性疾病等．目前，脂质组学研究已成为一个前景广阔的热门领域，并广泛地应用到包括药物研发、分子生理学、分子病理学、功能基因组学、营养学以及环境与健康等重要领域．

摘要:炎症复合体(inflammasome)是胞浆内一组复杂的多蛋白复合体，是胱天蛋白酶(caspase)-1活化所必需的反应平台，调控白介素(interleukin, IL)-1β、IL-18、IL-33等促炎细胞因子的加工及活化，参与天然免疫系统的激活．核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptors, NLRs)是胞浆内重要的模式识别受体，能感知胞内病原微生物产物及代谢性应激，起始炎症复合体的组装，是构成炎症复合体的核心成分．综述了炎症复合体和NLRs研究现状及其在炎症反应中的作用．

摘要:近年来，内皮细胞的应用价值不断提高，应用领域不断拓宽，但其来源有限，成为研究应用的主要障碍．胚胎干细胞在体外可分化为多种组织细胞系，有可能成为获取内皮细胞的另一来源．就人胚胎干细胞向内皮祖细胞分化、分离方法、相关分子机制及内皮祖细胞应用价值等进行阐述，以期能够引起更多的关注，推动其研究的进展．

摘要:叶酸缺乏可导致胚胎先天性发育异常，二氢叶酸还原酶是叶酸生物学作用通路中的关键因子，其功能阻抑将抑制叶酸生物学作用的发挥．咽弓是脊椎动物胚胎发育中头面部结构、心脏流出道等的共同前体．在模式生物斑马鱼中，利用基因表达阻抑以及过表达技术，探讨二氢叶酸还原酶基因(DHFR)在斑马鱼咽弓发育过程中的作用．石蜡切片以及软骨染色结果显示，DHFR表达阻抑导致斑马鱼咽弓以及腭发育明显异常，而DHFR过表达可部分挽救上述发育异常表型．TBX1和HAND2在咽弓发育中有重要作用．通过胚胎整体原位杂交以及Real-time PCR技术检测TBX1和HAND2表达水平．DHFR表达阻抑后TBX1和HAND2的表达降低，DHFR过表达可使TBX1和HAND2的表达增加．上述结果表明，DHFR在斑马鱼咽弓发育过程中扮演重要角色，DHFR通过影响TBX1和HAND2的表达而调控咽弓的形成和分化．

摘要:为探索阿尔茨海默症(AD)中β淀粉样肽(Aβ)对线粒体功能的影响，比较了稳定表达人野生型淀粉样前体蛋白(APP)的细胞和同时转入人Swedish突变APP及ΔE9突变PS1的双转细胞(swe. Δ9)的线粒体功能．结果发现，swe. Δ9细胞的线粒体膜电位、细胞色素c氧化酶活性、线粒体膜流动性、ATP含量均明显低于APP细胞，而APP细胞又明显低于对照的转入空质粒的细胞．在转基因小鼠上也得到类似结果：同时转入人Swedish突变APP和人PS1 M146V敲入的双转小鼠的细胞色素c氧化酶活性和ATP含量比只转入Swedish突变APP的Tg2576小鼠更低．结果证明了AD模型中线粒体功能损害程度与Aβ产量的正相关关系．

摘要:Tau外显子10的可变剪接产生含3个微管结合片段或4个微管结合片段的tau蛋白变异体(3R-tau和4R-tau)．正常成年人脑中，3R-tau和4R-tau的表达水平相近，这种比例对于维持正常脑功能非常重要．9G8是剪接因子SR蛋白家族中的成员之一，参与多种基因转录产物的剪接调控，它的功能和活性受磷酸化高度调节．糖原合酶激酶(GSK)-3β是体内重要的蛋白激酶，已有研究显示它参与调节tau外显子10的可变剪接．利用微型tau基因研究了9G8在不同细胞系中对tau外显子10 可变剪接的作用以及GSK-3β对9G8介导的tau外显子10可变剪接的影响．结果显示，过表达9G8抑制tau外显子10的表达，GSK-3β在体外可催化9G8的磷酸化，GSK-3β可以被9G8 从大鼠脑匀浆中沉降(pull-down)，提示它们之间可能存在相互作用，在培养的细胞中，GSK-3β与9G8之间存在共定位，过表达GSK-3β抑制9G8对外显子10可变剪接的作用，有利于4R-tau的产生．这些结果显示GSK-3β影响9G8介导的tau外显子10的剪接．

摘要:为研究鼻咽癌相关新基因NPCEDRG的功能，探讨其对鼻咽癌细胞生长特性的影响，利用Tet-on 调控系统，建立受强力霉素(deoxycycline，Dox)诱导NPCEDRG基因表达的CNE2细胞系．运用RT-PCR选择背景表达低、诱导活性高的细胞克隆，以不同浓度Dox诱导CNE2/Tet/TRE-NPCEDRG细胞，确定Dox的最佳诱导浓度．借助形态学观察、细胞生长曲线、软琼脂克隆形成试验和流式细胞仪分析等方法，对Dox诱导NPCEDRG高表达后CNE2细胞的生物学行为进行了检测．结果显示，NPCEDRG高表达后CNE2细胞增殖速度显著减慢(P < 0.05)，克隆形成能力显著降低(P < 0.01)，瘤细胞群体中处于G0/G1 期细胞数增加，S期细胞数减少，细胞阻滞于G0/G1 期．Tet 调控NPCEDRG基因表达CNE2 细胞系成功建立，恢复NPCEDRG表达能部分逆转CNE2的恶性表型，证明NPCEDRG 是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因．

摘要:以α1, 2-岩藻糖转移酶基因转染前后卵巢癌细胞RMG-I、RMG-I-H为细胞模型，用细胞免疫荧光方法检测转染前后细胞p38MAPK和p-p38MAPK的细胞内定位，RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白质两个水平检测转染前后细胞p38MAPK表达的变化；以兔抗人IgG抗体处理组为对照，分别利用RT-PCR和Western blot方法检测Lewis y单克隆抗体处理前后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA和蛋白质表达水平的变化；以0.1% DMSO为对照，用流式细胞仪(FCM)检测p38MAPK特异性抑制剂SB203580处理后RMG-I-H凋亡比率的变化，并利用RT-PCR和Western blot方法检测caspase-3的mRNA和蛋白质水平的变化；用RT-PCR方法检测卡铂和SB203580处理后p38MAPK 及caspase-3表达的变化．结果表明，RMG-I与RMG-I-H的p38MAPK蛋白主要定位在细胞质，p-p38MAPK蛋白定位在细胞核，转染后p38MAPK的mRNA水平明显高于转染前(P < 0.05)； Lewis y单克隆抗体处理后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA水平降低(P < 0.05)，不同浓度SB203580(0.1 mmol/L，1 mmol/L，10 mmol/L)作用下RMG-I-H细胞的凋亡率分别为(15.927±0.861)%、(18.187±0.481)%及(33.565±0.912)%，明显高于空白组和对照组(P < 0.05)，SB203580处理后caspase-3的mRNA和蛋白质水平均明显高于空白组和对照组(P < 0.05)，卡铂处理后p38MAPK 及caspase-3 mRNA水平均增加，SB203580处理后，caspase-3mRNA水平增加．说明Lewis y抗原介导的卵巢癌细胞凋亡与p38MAPK信号通路有关，可能通过p38MAPK信号通路抑制卵巢癌细胞凋亡，引起耐药性．

摘要:在细胞周期检测点信号传导通路中， Chkl和Chk2起着重要作用，主要参与G2/M期细胞周期检测点信号传导．首先采用RNAi技术在BGC823细胞中将Chk1、Chk2基因沉默，Chk1、Chk2 siRNA转染BGC823细胞后24 h加入15 mg/L二烯丙基二硫(diallyl disulfide，DADS)，接着通过Real-time PCR、Western blot分析Chk1、Chk2基因在转染前后的表达差异， 然后运用流式细胞术和Western blot分析Chk1、Chk2基因沉默后对DADS诱导的细胞周期G2/M期阻滞作用及相关周期蛋白CDC25C和cyclinB1表达的影响．实验结果表明，与未转染对照组相比，转染Chk1、Chk2 siRNA后BGC823细胞中Chk1、Chk2 表达明显被抑制，二者的mRNA表达分别下降84.7%和69.0%，蛋白质水平分别下降73.4%和78.5%．流式细胞术分析结果发现，Chkl siRNA转染的BGC823细胞在15 mg/L DADS处理24 h后，G2/M期比例由单纯DADS处理组的58.1%降至10.4% (P < 0.05)．但Chk2 siRNA转染后加入15 mg/L DADS，与单独15 mg/L DADS作用相比，细胞周期G2/M期比例差异不明显(P > 0.05)．Chk1和Chk2下游分子的改变显示，DADS可抑制BGC823细胞中CDC25C和cyclinB1表达(P < 0.05)，但Chk1基因沉默后加入DADS，CDC25C和cyclinB1表达却不被抑制(P > 0.05)，Chk2基因沉默后对DADS抑制CDC25C和cyclinB1表达的作用无影响．由此得出结论， Chkl基因沉默可消除DADS诱导BGC823细胞G2/M期阻滞作用，DADS阻滞G2/M期可能是通过Chk1/CDC25C/cyclinB1信号通路起作用．

摘要:三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)是体内胆固醇逆向转运的关键环节．对氧磷是广泛使用的有机磷农药的活性代谢产物．研究发现，对氧磷能增加巨噬细胞中胆固醇的堆积，但具体机制还不清楚．以RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象，观察对氧磷对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达和胆固醇流出的影响并探讨其机制．结果显示，对氧磷以时间和剂量依赖的方式增加RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞中总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯水平，降低ABCA1表达和胆固醇流出，同时对氧磷降低细胞中环磷酸腺苷(cAMP)的水平及腺苷酸环化酶(AC)的活性和增加磷酸二酯酶(PDE)的活性，而cAMP的类似物双丁酰环腺苷酸(dBcAMP)能够阻断对氧磷降低ABCA1表达和部分阻断对氧磷降低胆固醇流出，对氧磷导致的cAMP水平的降低也可被AC激动剂福斯高林(Forskolin)和PDE抑制剂3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)所阻断．以上结果表明，对氧磷通过cAMP信号通路下调RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达，降低细胞内胆固醇流出和增加细胞内胆固醇堆积．

摘要:为了获得高效的脂肪酶毕赤酵母表面展示系统，利用来自酿酒酵母絮凝素蛋白Flo1的N端874个氨基酸残基(FS)和C端的1 101个氨基酸残基(FL)作为锚定蛋白分别构建了2套载体系统．带有前肽的米黑根毛霉脂肪酶(ProRML)克隆到构建的2套展示载体中，使米黑根毛霉脂肪酶(RML)分别以N端锚定或C端锚定的方式实现在毕赤酵母细胞表面的展示．利用RML C端的Flag标签，通过流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜检测2套系统中RML在酵母表面的展示情况．研究发现，N端锚定于酵母表面的展示酶FSR以pNPC为底物时，水解活力达到了105.3 U/g，大约为C端锚定的展示酶FLR活力的2倍．同时FSR比FLR具有更宽的温度、pH作用范围和更好的热稳定性．与游离酶和固定化酶相比，展示酶FSR也表现出更为优良的热稳定性．结果提示，基于Flo1 N端锚定的展示系统更适合展示活性中心近C端的脂肪酶，推动了展示酶的进一步研究和开发．

摘要:传统表达谱数据分析方法集中于寻找差异表达基因和共表达基因集合，没有考虑基因表达产物之间已知的相互作用．近年来在系统生物学的研究中发展了将基因表达谱与蛋白质相互作用网络进行整合分析的方法．现有方法未能综合考虑基因表达差异性和相关性信息，容易导致辨识结果中重要功能分子缺失且生物学功能相关度不高．提出一种融合表达谱差异性和相关性信息的激活子网辨识算法，能够在蛋白质相互作用网络中辨识高功能相关度的激活子网．应用到人免疫缺陷病毒HIV-1感染过程的研究，结果表明，该算法可以有效避免仅考虑基因表达差异性所引入的偏差，揭示了高相关性低表达差异基因在相关通路中的关键性作用．

摘要:描述了一种微流控芯片电泳快速分离血清高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)亚类的方法．利用自制的微流控芯片，结合激光诱导荧光检测系统，40 mmol/L Tricine、50 mmol/L甲基葡胺(MEG)、0.2 mmol/L SDS (pH 8.5)为样品缓冲液，40 mmol/L Tricine、50 mmol/L MEG、0.01 mmol/L SDS (pH 8.5)为分离缓冲液，4 min内HDL₃和HDL₂两种亚类得到基线分离．该法操作过程简单，重复性较佳，测试费用低廉，在临床HDL亚类的检测中具有较好的应用前景．

摘要:综述了ICP-MS法应用于蛋白质定量技术方面的研究进展．蛋白质定量研究已成为蛋白质组学研究领域的热点，它是解析生物体蛋白质功能的重要途径．基于同位素标记和生物质谱分析技术是蛋白质定量最常用的方法之一，近年来，随着质谱技术的发展，电感耦合等离子体质谱( ICP-MS) 技术成为元素测量的重要手段，这使其在蛋白质定量中具一定的应用前景.