摘要:囊膜病毒与宿主细胞的膜融合是病毒入侵宿主细胞的重要过程，这一过程涉及到病毒囊膜表面糖蛋白与宿主细胞表面受体之间的相互作用和构象变化．疱疹病毒有多个糖蛋白及不同类型的细胞作用受体，相应的受体-糖蛋白复合体构成方式也有多种，其引致的膜融合机制被认为是目前病毒融合机制研究中最复杂的，近年来被广泛研究并取得突破性进展．从病毒糖蛋白与相应受体的结构与功能、受体-糖蛋白复合体的形成与入侵途径，以及膜融合模式几个方面，全面综述疱疹病毒膜融合的分子机制，并展望了未来研究趋势．

摘要:阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)是老年人中最常见的神经退行性疾病之一，但目前对于AD发病机制尚不清楚．越来越多的研究表明，β淀粉样蛋白 (β-amyloid，Aβ)引起的线粒体结构异常和功能损伤在AD的发病过程中发挥重要作用． Aβ引发线粒体损伤的机制主要为诱导线粒体能量代谢中几种关键酶的活性下降、线粒体分裂/融合平衡的破坏以及线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore, mPTP)开放．综述了Aβ引发线粒体损伤的以上几方面机制在近年来取得的进展．

摘要:雌激素的非基因组调节模式在雌性生殖系统中广泛存在．雌激素通过基因组、非基因组及两种调节模式的整合在不同组织中行使多种生理功能．卵巢中雌激素能通过非基因组效应对卵细胞起到保护作用．子宫中雌激素对多种基因的表达都是通过非基因组模式．对雌激素非基因组效应的研究将有利于进一步了解雌激素的作用机制．

摘要:p16^INK4a通过抑制CDK4/6的活性而在细胞周期进行中发挥重要的作用，研究发现，组蛋白乙酰转移酶p300能促进p16^INK4a启动子活性，而组蛋白去乙酰化酶HDAC3/4能够逆转由p300介导的p16^INK4a启动子活性的增加，HDAC3/4能够降低p16^INK4a mRNA和蛋白质的水平．染色质免疫沉淀(ChIP)实验结果表明转染p300表达质粒能够逆转由HDAC3/4介导的p16^INK4a启动子组蛋白的低乙酰化状态．此外，免疫荧光实验结果表明HDAC4的核质穿梭起着重要的作用．免疫印迹和染色质免疫沉淀实验证明HDAC的抑制剂丁酸钠盐(NaBu)能通过诱导组蛋白的高乙酰化而促进p16^INK4a的表达．基于这些实验结果，推测出可逆的组蛋白乙酰化参与p16^INK4a基因转录调控的模型．

摘要:尝试运用限定因子融合蛋白建立猪的诱导多能性干细胞．试验采用Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc四种限定因子经慢病毒表达载体系统介导感染猪胎儿成纤维细胞，对表达外源限定因子的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代，逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆，细胞集落生长状态稳定、核型正常、碱性磷酸酶检测为阳性，免疫细胞化学检测显示，Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤．结果证实分离培养的细胞克隆为猪诱导多能性干细胞，为进一步完善诱导方案和深入研究应用猪诱导多能性干细胞奠定了基础．

摘要:视觉感知的一系列研究都支持大范围拓扑感知的理论．拓扑性质作为整体性质，是视觉感知的基础．视觉对图形拓扑特征差异的感知要优先于对局部特征差异的感知．采用Y迷宫研究了小鼠对不同拓扑性质图形的识别．训练小鼠学习识别圆环和实心矩形这一对拓扑性质不同的图形，之后用拓扑特征相同或不同的其他图形测试小鼠，这些图形包括空心矩形、实心圆、缺口的圆环、缺口的空心矩形．实验结果表明，学会识别圆环(奖励)和实心矩形(无奖励)的小鼠无法区分实心圆和实心矩形以及圆环和空心矩形，但是能够分别从缺口圆环、缺口的空心矩形、实心圆与空心矩形组成的图形对中识别出空心矩形．因此证实了小鼠的视觉系统能够感知拓扑特征的差异并且具有对拓扑性质的概括能力．结果为拓扑知觉对视觉系统来说是基本的这一假设提供了证据．

摘要:立足US28的广谱趋化因子结合活性，寻找拮抗剂多肽的先导物．通过预测US28的结合模拟位设计多肽序列，合成相关多肽，再利用自建的25种趋化因子随机构成的噬菌体12肽库筛选结合模拟位，竞争性ELISA方法验证，从而获得30个阳性克隆，测序并推导氨基酸序列，得到7种序列：GSESLNAHCALW、EIDGFNAHCALL、VIARLNAHCALR、ATECLNAHCALW、VIESLNAHCALW、DNGSINAHCALL及VKKTLNAHCALR．所有序列富含疏水氨基酸，其中8个克隆有LNAHCAL保守序列．采用趋化抑制实验检测多肽对生理性趋化因子引起的细胞迁移活性的影响，流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度变化．结果表明，利用人源趋化因子序列构建肽库并筛选有效序列的方法取得成功，筛选出的阳性克隆保守序列LNAHCAL可以模拟Human MIP-1β与US28 N端的结合位，从而与合成多肽H22结合，多肽H22可以阻断受体结合生理性趋化因子形成的趋化作用，本身不引起趋化运动，不影响胞内信号转导和细胞自然活性，具有广谱趋化因子拮抗剂的可能性．

摘要:MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO) 是一种蛋白酶体抑制剂，它可逆地抑制蛋白酶体活性，从而抑制泛素-蛋白酶体通路所介导的蛋白质降解，诱导细胞凋亡．实验研究MG132抑制肝癌细胞Bel-7404生长的机制．采用不同浓度梯度和时间梯度，通过荧光显微镜、透射电子显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测、AnnexinⅤ/PI流式细胞术、Western blot分别检测MG132 对Bel-7404细胞的形态学变化、细胞内质网压力变化、自噬泡形成、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡水平、凋亡及自噬信号途径中相关蛋白质表达的影响．结果显示，MG132能明显抑制Bel-7404细胞生长．通过增加内质网压力激活Caspase-12，也可通过线粒体途径调节Bcl-2/Bax水平，促进细胞色素c的释放，两者皆可激活下游效应Caspase-3，剪切PARP，诱导细胞凋亡．同时，MG132可诱导Beclin 1 和LC3B的上调，促使Bel-7404细胞发生自噬，可在透射电镜下观察到自噬泡形成．上述结果表明，MG132作用Bel-7404细胞涉及两类细胞程序性死亡途径：细胞凋亡和自噬．

摘要:凋亡在癫痫发生机制中起重要作用，但其在难治性癫痫耐药机制中的作用尚不清楚．为研究X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein， XIAP)反义寡核苷酸对K562/Dox(阿霉素诱导)耐药细胞及难治性癫痫大鼠耐药性的影响，首先建立耐药的K562/Dox细胞株，比较XIAP在耐药细胞株和正常K562细胞株的表达情况，观察转染XIAP反义寡核苷酸后，线粒体膜电位变化以及对卡马西平和苯妥英钠耐药性的影响．另外，建立慢性杏仁核点燃癫痫模型，筛选出耐药组和药物敏感组，通过侧脑室注射XIAP反义寡核苷酸，对照组注射生理盐水．观察其对各组大鼠后放电阈值(after discharge threshold，ADT)、后放电时程(after discharge duration，ADD)等电生理指标的影响．结果发现，XIAP在K562/Dox耐药细胞上的表达明显高于正常K562细胞，XIAP反义寡核苷酸转染K562/Dox耐药细胞后，XIAP的表达明显下降．导致了K562/Dox细胞线粒体跨膜电位的下降，而且对苯妥英钠和卡马西平的耐药性明显下降，IC₅₀分别由(1 978.2 ± 90.3) mg/L和(1 875.6 ± 83.2) mg/L，降低到(1 123.5 ± 54.2) mg/L和(1 084.5 ± 60.6) mg/L，逆转倍数分别为1.76和1.73．同时动物实验发现，耐药组大鼠在给予XIAP反义寡核苷酸后，ADT明显高于对照组(P < 0.05)， ADD时程也明显缩短．上述结果证明，XIAP在耐药的K562/Dox细胞株存在高表达，下调XIAP在K562/Dox细胞株表达可以改善K562/Dox对卡马西平和苯妥英钠的耐药性．而且下调XIAP表达可以协助AEDs改善耐药大鼠的电生理活动，提示XIAP参与了难治性癫痫的耐药．

摘要:探讨高静水压培养对内皮脂酶表达的影响及其机制．分大气压(0 mmHg)和高于1个标准大气压的递增压力(120、150、180 mmHg)培养人脐静脉内皮细胞，用蛋白酶体抑制剂MG132进行干预．RT-PCR检测内皮脂酶 mRNA的表达，间接免疫荧光技术和流式细胞术检测内皮脂酶蛋白的表达．结果显示，高静水压培养明显促进内皮脂酶mRNA和蛋白质的表达，180 mmHg培养24 h内皮脂酶mRNA的表达较对照组上调2.2倍(P < 0.001)，内皮脂酶蛋白表达较对照组上调2.54倍(P < 0.001)．蛋白酶体抑制剂MG132干预明显抑制180 mmHg培养诱导的内皮脂酶 mRNA的表达，MG132干预组内皮脂酶mRNA表达约为180 mmHg培养组的50% (P < 0.05)．结果说明，高静水压上调内皮脂酶 mRNA和蛋白质的表达，其机制可能与核因子-κB活化有关．

摘要:茶树花富含多糖，是茶树生长过程中的产物，然而目前茶树花多糖(tea plant flow polysaccharide, TFP)尚未被充分利用．因此，认为茶树花多糖有着和茶叶中的多糖相似的功能效果．研究目的是通过系列的体内和体外实验系统来评价茶树花多糖的抗肿瘤以及免疫调节的活性．利用S180(sarcoma 180)荷瘤小鼠模型，系统地研究了灌胃不同剂量茶树花多糖对荷瘤小鼠的肉瘤抑制率、存活率以及细胞免疫的影响．结果显示，连续灌胃10天茶树花多糖，能显著抑制S180肉瘤的生长，延长荷瘤小鼠的存活时间，增强迟发型超敏作用(delayed-type hypersensitivity, DTH)，促进血液白介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)的分泌，增强巨噬细胞的吞噬作用，改善T淋巴细胞亚群CD4⁺数量以及CD4⁺/CD8⁺的比值，表明茶树花多糖能增强机体对肿瘤的防御，在一定程度上归功于其对免疫调节作用．

摘要:运用定点突变技术研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)的作用位点，先后构建了R45A-aBTI 和R45F-fBTI 两个突变体．抑制活性测定显示，aBTI 和fBTI 均丧失了胰蛋白酶抑制活性，却分别增加了对弹性蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的抑制活性，确定Arg⁴⁵为野生型rBTI 的作用位点．稳定性分析表明，rBTI、aBTI 和fBTI 均具有很高的热稳定性及酸碱稳定性．采用MTT 比色法分别检测野生型和突变型抑制剂对肿瘤细胞生长的抑制作用．结果表明，突变前后的3种抑制剂对HL-60 和EC9706 细胞的生长均显示出很强的抑制作用，并且具有明显的浓度依赖性和时间依赖性．通过研究不仅确定了rBTI 的作用位点，而且获得了两种新型蛋白酶抑制剂，且作用位点的改变并不影响其对肿瘤细胞的生长抑制作用．为进一步研究胰蛋白酶抑制剂的结构与功能的关系以及抗肿瘤药物的研制提供了新的思路．

摘要:解析基因的剪接加工机制是了解植物形态建成、生长发育和逆境胁迫应答的重要环节．与动物相比，植物中相应的研究进展较为缓慢．利用农杆菌介导的烟草瞬时表达系统，分别对单子叶植物水稻BADH2和双子叶植物拟南芥GR7基因片段在烟草叶片中的转录后剪接加工进行分析．结果表明，一些重要剪接调控元件在植物中保守存在，而烟草瞬时表达系统可以作为研究高等植物剪接调控的重要工具，快捷灵敏地检测基因的剪接加工方式．

摘要:植物需要利用太阳光能进行光合作用，因而不可避免地受到紫外线-B(UV-B) 辐射的影响．为了鉴定水稻WRKY转 录因子OsWRKY89基因启动子中的UV-B反应相关元件，分析了转启动子不同缺失片段与gus融合基因的水稻幼苗，发现在该启动子中存在UV-B反应元件，位于基因翻译起始位点上游-1 213～-1 188之间的25 bp区域，碱基序列为AAGATCTACCATTGCTCTATAGCTT．结合OsWRKY89和UV-B诱导上调表达基因启动子序列分析发现，该元件区在水稻UV-B反应基因启动子上具有高度的保守性，而且与已知保守的光反应元件位置邻近，表明该区域在水稻UV-B反应的转录调控中可能具有重要功能．

摘要:脓毒症是近年来的医学难题之一，迫切需要探讨新的治疗手段．以往研究发现，骨髓间充质干细胞具有免疫调节作用，免疫细胞因子白介素10(IL-10)是细胞因子分泌的抑制因子，具有很好的抗炎作用．因此构建了携带小鼠IL-10(mIL-10)的腺病毒载体，用它来感染骨髓间充质干细胞(BMSC)，并通过载体上的绿色荧光蛋白来筛选过表达mIL-10基因的骨髓间充质干细胞(BMSC-mIL-10)．随后，运用盲肠结扎穿孔法在小鼠体内建立脓毒症模型，并观察BMSC-mIL-10在脓毒症中的治疗作用．研究发现，和单纯BMSC治疗组相比，BMSC-mIL-10可以明显降低脓毒症老鼠体内炎症因子的产生，这包括TNF-α、IL-6、IL-1α和 IL-1β等，同时，BMSC-mIL-10治疗组小鼠的肺部和肾脏炎症反应减轻，体重丢失下降，死亡率明显降低．为进一步探讨BMSC-mIL-10治疗机制，运用Western blot和免疫荧光染色方法发现BMSC-mIL-10组上清液可以抑制巨噬细胞和中性粒细胞中LPS引起的NF-κB的激活．上述结果表明，骨髓间充质干细胞过表达IL-10有望成为脓毒症治疗的潜在手段之一．

摘要:作为人体的重要激素之一，褪黑激素具备重要的生理功能．不适当的夜间光照会造成人体生物钟节律的异常，进而导致褪黑激素内分泌的抑制．夜间光照引起的褪黑激素抑制与光的波长和色温关系密切．此前尚仍缺乏一个夜间光照对褪黑激素抑制效果的量化计算方案．提出了一种夜间光照对褪黑激素抑制的量化算法，拟合了人体血液褪黑激素抑制率的相对光谱灵敏度归一化曲线，建立了夜间光照与褪黑激素抑制量化计算的算法模型．研究结果为室内安全光照环境的设计提供了理论依据和计算方法，并可在光污染的控制、夜间安全环境照明标准的制定等方面得到应用．