摘要:就原发性震颤(essential tremor, ET)的遗传学基础作一探讨．ET是最常见的神经疾病之一，其临床表现复杂多样，病因机制尚不清楚．常有家族史，目前已定位3个疾病基因位点，最近发现多巴胺受体D3(the dopamine receptor D3 gene，DRD3) 和LINGO1基因变异可能与ET发病相关．

摘要:药物靶点通常是在代谢或信号通路中与特定疾病或病理状态有关的关键分子．通过绑定到特定活动区域抑制这个关键分子进行药物设计．确定特定疾病有关的靶标分子是现代新药开发的基础．在药物靶标发现的过程中，生物信息学方法发挥了不可替代的重要的作用，尤其适用于大规模多组学数据的分析．目前，已涌现了许多与疾病相关的数据库资源，基于生物网络特征、多基因芯片、蛋白质组、代谢组数据等建立了多种生物信息学方法发现潜在的药物靶标，并预测靶标可药性和药物副作用．

摘要:炎症反应是机体正常组织对感染和损伤的应答，然而过度的炎症反应往往会引起急性和慢性疾病的发生．最近研究发现，由n-3多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸代谢产生的resolvins和protectins两类化合物，具有很强的抗炎和炎症修复活性．综述了resolvins和protectin D1的来源、抗炎作用和抗炎机制，为进一步开展n-3多不饱和脂肪酸及其代谢产物的抗炎作用研究、为炎症的防治提供新的思路．

摘要:综述了目前关于纤维小体组装模式、纤维小体结构多样性及人工设计纤维小体等方面的研究进展．纤维小体是某些厌氧菌产生的由多个亚基共同组装而成的大分子机器，是致力于组织、协调多种酶组分协同高效催化降解木质纤维素的胞外蛋白质复合体．纤维小体是厌氧微生物水解纤维素的主体，具有非常高效的打破结晶纤维素的结晶结构和降解纤维素链的作用．纤维小体对木质纤维素降解的高效性来自于其自发组装而成的复杂的高级结构，其结构的复杂性因不同的厌氧微生物而有所不同．

摘要:钙调素作为真核细胞的重要信号蛋白，在真核生物正常及逆境条件下的生长发育中发挥着重要作用．研究报道钙调素可促进离体培养的高等动植物细胞的增殖，但有关钙调素蛋白在植物体内的细胞增殖功能尚未见报道．特别是拟南芥基因组中存在7个编码经典钙调素亚型的基因，多数编码基因的功能有待进一步探究．首先借助常用的钙调素拮抗剂W7进行药理学实验，结果表明，野生型拟南芥幼苗根的生长受到了明显的抑制，根尖分生区的面积变小、细胞数目明显减少，根尖分生区中细胞分裂标记基因CYCB1;1的表达受到了明显抑制，这表明在根尖分生区W7可能通过对活性钙调素的抑制作用影响了根尖分生区域的细胞增殖，而根尖分生区正常的细胞增殖需要一定量活性钙调素蛋白的存在．脱落酸(ABA)是植物逆境下的重要激素，在植物种子萌发及幼苗生长发育中发挥着重要作用，W7存在下的拟南芥幼苗对ABA的敏感性下降．借助反向遗传学手段获得了拟南芥中三个编码典型钙调素蛋白基因的三重缺失突变体cam234，蛋白质印迹结果表明三重缺失突变体中钙调素蛋白的含量明显降低．相同培养条件下与野生型相比，三重突变体幼苗根长变短，并且幼苗对ABA敏感性也表现下降趋势，暗示着这三个基因编码的钙调素蛋白可能参与了根分生区域细胞增殖过程及幼苗对脱落酸的敏感性反应，讨论了钙调素的细胞增殖功能及与幼苗对脱落酸的敏感性反应间的关系．

摘要:为了探讨亚毒性剂量有机磷酸酯杀虫剂毒死蜱对高脂饮食诱导的动脉粥样硬化的影响及其机制，32只健康雄性新西兰兔随机分为对照组、毒死蜱组、高脂组、高脂+毒死蜱组．每天以20 mg/kg亚毒性剂量的毒死蜱灌胃处理6个月．动物处死后检测血脂水平和血清胆碱酯酶活性．收集腹腔巨噬细胞，测定其胆固醇流出率．苏丹Ⅳ染色观察胸主动脉粥样硬化斑块，定量分析动脉粥样硬化斑块占血管内表面积的百分比．颈总动脉石蜡切片，观察动脉粥样硬化斑块．采用实时定量PCR和蛋白质印迹检测，分别检测肝脏、血管和腹腔巨噬细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1) mRNA和蛋白质的表达．结果显示：与对照组相比，高脂饮食升高了血清总胆固醇和脂蛋白水平，主动脉和颈总动脉出现明显的动脉粥样硬化斑块，其肝脏、主动脉和腹腔巨噬细胞ABCA1的表达升高，腹腔巨噬细胞中胆固醇流出增加；与对照组相比，毒死蜱组血清胆碱酯酶活性降低，但没有出现明显的中毒症状和肝肾功能损伤，血清中高密度脂蛋白(HDL)水平降低，ABCA1的表达降低，腹腔巨噬细胞中胆固醇流出减少；高脂+毒死蜱组与高脂组相比，血清胆碱酯酶活性降低，也没有出现明显的中毒症状和肝肾功能损伤，ABCA1的表达降低，腹腔巨噬细胞中胆固醇流出减少，主动脉和颈总动脉粥样硬化斑块更加明显．结果提示长期暴露于亚毒性剂量的毒死蜱可加速高脂饮食的致动脉粥样硬化作用,其机制可能与毒死蜱降低体内ABCA1的表达和胆固醇流出有关．

摘要:环指蛋白RING1能结合DNA并抑制基因的转录．采用酵母双杂交方法从人骨骼肌文库中筛选出了与A型核纤层蛋白(lamin A)结合的RING1蛋白，回复杂交酵母能在缺陷培养基上生长．RING1与绿色荧光蛋白融合载体转染HEK293细胞，激光共聚焦显微观察发现RING1能与带红色荧光蛋白的lamin A蛋白在细胞核周围共定位．免疫共沉淀结果证明RING1与lamin A能够相互作用．结果证明了一个新的lamin A结合蛋白，为揭示lamin A影响基因表达乃至细胞衰老提供了依据．

摘要:从北京腹泻婴儿粪便提取的轮状病毒(rotavirus，RV)(T114株)的RNA中，克隆到轮状病毒结构蛋白基因vp4，vp6和vp7的全长cDNA，对它们编码的蛋白质序列和可能的抗原表位肽进行了预测，选择了RV主要抗原蛋白VP7、VP6和VP4的4个抗原表位肽，通过人工合成DNA的方式将这些抗原表位肽基因串联融合成一个阅读框RME (rotavirus multiple epitopes, RME)并构建原核表达载体．大肠杆菌表达的RME在ELISA反应中可被RV多克隆抗体识别，纯化的RME蛋白注射免疫小鼠可诱导特异性免疫应答，产生高滴度的同源氨基酸序列特异抗体和人RV抗体，其中针对RME的IgG抗体滴度达到l∶40 000，针对单个抗原表位EV7、EV6和EV4的IgG抗体滴度达l∶10 000～l∶20 000，针对RV Wa株的IgG抗体滴度较低为l∶2 500，但能特异地中和该病毒对MAC145细胞的侵染．上述结果为新型RV基因工程疫苗的研发提供了论据和基础．

摘要:vWF(von Willebrand factor)是一种超大分子质量的血浆多聚体糖蛋白，在血栓形成和生理凝血过程中发挥重要作用，其质和/或量的缺陷导致血管性血友病(VWD)，由于VWD为单基因病，且vWF为分泌性蛋白，基于基因转移的基因治疗无需特异的靶器官，因此VWD特别适合于基因治疗，但vWF基因过大(8.4 kb)，难以为多数病毒载体特别是优点较多的腺相关病毒(AAV)载体承载．运用内含肽(intein)的蛋白质反式剪接功能，研究了三重载体真核细胞共转断裂3段的vWF基因，以期通过转基因翻译后的蛋白质剪接作用形成完整的功能性vWF蛋白．将vWF的cDNA于满足剪接所需的保守性氨基酸Cys¹⁰⁹⁹、Ser²⁰⁰⁴的密码子前断裂为3段，分别与2种不同的内含肽即Ssp DnaE内含肽和Ssp DnaB内含肽编码序列融合，构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)，得到3个分别融合内含肽的vWF片段基因真核表达载体，共转染培养的293细胞，通过瞬时表达，电泳观察培养上清中的vWF多聚体形态，分析vWF蛋白量和凝血Ⅷ因子(FⅧ)结合力；通过共转FⅧ基因，分析了培养上清中的FⅧ蛋白量及生物活性．结果显示，通过内含肽的蛋白质反式剪接作用，共转内含肽融合的三片段vWF基因细胞上清，表现与正常人血浆和转vWF基因阳性对照细胞相似的vWF多聚体模式和FⅧ结合力，而且可明显提高转FⅧ基因后表达的FⅧ蛋白的分泌量和活性，提示剪接vWF蛋白的FⅧ载体功能的恢复．结果表明，内含肽可作为一种有效的技术手段进行三重载体共转断裂的vWF基因，为进一步基于内含肽的三重AAV转断裂vWF基因应用于VWD基因治疗研究、克服AAV的容量限制提供了依据．

摘要:查尔酮合成酶(chalcone synthase, CHS)是类黄酮类物质生物合成途径中的第一个关键酶，其控制基因chs为超家族基因．根据前人报道的矮牵牛查尔酮合成酶基因A (chsA)启动子的保守序列设计1对特异性引物，从矮牵牛基因组DNA中通过1次PCR同时扩增出长为550 bp和354 bp的启动子(分别命名为PchsA-L和PchsA-S，GenBank登录号：EF199747和EF199748), 其中PchsA-L与PchsA-S相比，除个别碱基有差异外，在88～269 bp多出一段182 bp的序列，其中103～201 bp含有典型的内含子特征．应用DNAStar软件分析表明2条序列均含有普通启动子的保守序列TATA box、CCAAT box、cap site (CCATAA)，并含有花中特异表达启动子的特征序列TACPyAT box、anther box (TAGAAGTGACAGAAAT)、G-box (CACGTG)、box1元件(ATGTCACGTGCCATC)和box2元件(TGTGTTGAAGGTTTGCTA)．对克隆启动子所用的矮牵牛后代群体进行分析，130个单株中只含有PchsA-S的有13株，只含有PchsA-L的有20株，同时含有2个启动子的有97株．2个启动子在后代中发生了分离，但其分离比并不符合1∶2∶1．克隆启动子所用的矮牵牛有14条染色体，为二倍体．DNA印迹表明2个启动子在基因组中均是多拷贝．qRT-PCR分析显示：未经过紫外光处理的花中以及经过紫外光处理的花中，PchsA-L启动子驱动的chsA基因与PchsA-S启动子驱动的chsA基因表达都未见明显差异；在紫外光处理的幼苗叶片中表达量相应地比紫外光处理的花中的表达量增高；在紫外光处理的幼苗叶片中，PchsA-L启动子驱动的chsA基因比PchsA-S启动子驱动的chsA基因表达量显著增高；而未经过紫外光处理的幼苗叶片中，PchsA-L启动子驱动的chsA基因、PchsA-S启动子驱动的chsA基因都没有检测到明显的表达信号．结果表明：在矮牵牛中chsA基因存在2个独立的启动子PchsA-L和PchsA-S；启动子PchsA-L中182 bp类内含子特征的序列具有显著提高chsA基因在紫外光处理的幼苗叶片中表达量的功能．

摘要:甲状腺激素应答Spot14 (THRSP) 是甲状腺激素诱导的核内蛋白质，对动物脂肪生成具有重要的调控作用．为了探明中国地方猪品种(脂肪型)和引入品种(瘦肉型)胴体脂肪沉积之差异的遗传机理，提取脂肪型猪(皖南花猪、绩溪黑猪、定远猪，n=228)和瘦肉型猪(长白猪、大白猪、杜洛克及其杂种猪，n=92)的耳组织DNA，检测THRSP基因编码区的单核苷酸多态性(SNP)，分析其变异对mRNA折叠和蛋白质二级结构的影响以及在群体中的分布规律，研究其变异与猪产脂能力之间的关联性．结果发现，猪THRSP基因编码区的核苷酸序列与人和牛的同源性分别为86%和88%，存在2个SNPs位点(G123A和A308G)分别位于距CDS起点的123 bp和308 bp处，其中G123A为同义突变，而A308G导致THRSP蛋白质103位的赖氨酸变为精氨酸，引起了酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点由TKEE转变为TREE，并产生了2种类型的mRNA折叠和蛋白质二级结构，脂肪型猪群中123G和308A的频率分别为0.975 9和0.589 9，瘦肉型猪群的123G和308A频率分别为0.657 7和0.815 2,脂肪型猪123G308A和123G308G配子的总频率达到0.975 9，而瘦肉型猪的123A308A和123G308A配子的总频率为0.815 3.实验提示，THRSP基因编码区的G123A和A308G位点多态性与猪脂肪生成能力密切关联，对脂肪生成相关基因表达具有重要的调节作用．