摘要:在真核细胞中已发现两条主要降解途径，即自噬系统和蛋白酶体系统．长期以来，这两条降解途径一直被认作是完全独立的路径，然而最近的证据强烈提示，这两条主要降解途径之间相互联系．其中，发现干扰这两条途径的任一条可影响另一条途径的活性，抑制蛋白酶体可刺激自噬活性．同时发现泛素的作用比先前想象更广泛，不仅具有标记蛋白酶体降解蛋白质这一 “经典作用”，还涉及自噬-溶酶体途径降解底物泛素化，是这些主要降解途径的共同标签．这些降解系统分享某些底物和调节分子，显示协同作用，在某些背景下，显示补偿功能．降解系统之间的协同和补偿作用在许多细胞过程中显得至关重要．因此这些降解系统异常或联系失常不仅导致细胞功能的异常，而且也与多种重要疾病的发生和发展密切相关．对这些降解途径功能及其联系的深入了解可拓展人们对这些降解途径的认识，有助于对多种细胞分解代谢过程的深入理解，也有助于相关新药的研发．

摘要:痒是一种引起机体产生抓挠欲望的不愉快感觉．与疼痛一样，痒觉也是机体的一种自我防护反应，可以促使机体及时避免有害刺激，但持续较长时间的慢性痒往往是一种病理性特征，严重影响人的生活质量．目前已发现两条痒觉传导通路，组胺依赖的信号通路和组胺非依赖的信号通路．组胺、阿片类物质、大麻素、一些肽类物质及氯喹均可刺激相关受体诱导痒觉产生．痒觉产生的机制，有多种学说，比较有影响的是选择性学说和特异性学说．本文综述了近年来痒觉信号通路及其相关受体的研究进展．

摘要:染色质免疫沉淀-测序(ChIP-seq)是近年来新兴的将染色质免疫沉淀(ChIP)与深度测序技术相结合，在全基因组范围内分析DNA结合蛋白结合位点、组蛋白修饰、核小体定位和DNA甲基化的高通量技术．在新一代测序(NGS)技术的大力推动下，ChIP-seq提供了一种相对于ChIP-chip高分辨率、低噪音、高覆盖率的研究方法．随着测序成本的降低，ChIP-seq逐步成为研究基因调控和表观遗传机制的一种常用手段．本文就该技术的最近研究进展进行综述，并着重介绍ChIP-seq数据分析过程及该技术的实际应用情况.

摘要:在植物的生长发育过程中，植物激素发挥着重要的作用. 最新研究对油菜素内酯、赤霉素两类植物激素与光的信号通路共同调控植物的细胞伸长和光形态建成的分子机制给予了精确的阐述，这也为提高农作物产量提拱了理论基础.

摘要:内侧膝状体神经元接受来自离皮层系统的兴奋和抑制两种神经调节．听觉刺激诱发的内膝体神经元起始反应后会伴随着一段长时抑制．在可自由活动的大鼠上研究了内膝体神经元的听反应后抑制现象．利用植入电极阵列技术，记录了大鼠在睡眠过程中的脑电、肌电以及内膝体神经元胞外放电活动，发现在睡眠的快速眼动时期和非快速眼动时期内膝体神经元存在着听反应后抑制现象，并发现这种抑制更多地出现在非快速眼动睡眠期．在睡眠过程中，丘脑网状核听觉分区的失活会导致内膝体神经元的听反应后抑制消失或减弱．因此，我们推测丘脑网状核神经元参与了内膝体神经元在睡眠中的听反应后抑制，它在非快速眼动睡眠中对内膝体施加了更强的抑制作用．

摘要:Sp100是核颗粒ND10的组成蛋白，在哺乳动物细胞中广泛存在．Sp100参与多种细胞生理病理过程，如转录调控、细胞内抗病毒免疫等．利用酵母双杂交系统，我们发现了Sp100的互作蛋白HIV-1整合酶，免疫共沉淀实验进一步证实了Sp100与 HIV-1整合酶的互作，细胞内荧光共定位实验也证实了二者在细胞内部分共定位．此外，突变体实验表明，Sp100的C端300～480氨基酸和HIV-1的催化结构域是两个蛋白质的互作区域．利用siRNA降低细胞内Sp100的表达量，可以增加HIV-1整合酶介导的病毒的整合，反之，细胞内过表达Sp100则会降低HIV-1整合酶介导的病毒的整合．这是首次发现Sp100可以和HIV-1整合酶发生相互作用，并进而抑制病毒的整合．我们发现了Sp100作为HIV-1整合酶互作蛋白的新功能，并扩展了细胞防御病毒感染的相关研究．

摘要:探讨了人间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)移植对NOD/SCID小鼠放射性肠损伤的修复作用．将雄性NOD/SCID小鼠随机分为3组，每组6只，即A组为空白对照组，B组为模型组，C组为治疗组．B组和C组小鼠全腹接受5 Gy ⁶⁰Co γ射线单次照射，剂量率为100 cGy/min．照射后B组小鼠经尾静脉注射生理盐水，C组小鼠移植MSCs．于移植后第15天取小鼠空肠标本，通过免疫荧光方法检测MSCs在受损肠道的定植和分化情况．结果表明，治疗组小鼠的生存状况明显好于模型组小鼠，病理切片显示小肠黏膜得到修复，免疫荧光结果显示MSCs可定植于辐射损伤的肠道，并表达波形蛋白(vimentin)和α-SMA．MSCs移植入肠损伤的小鼠体内后可在受损肠道定植，并向间质细胞分化，参与辐射损伤的修复.

摘要:Bloom 综合症(BLM)解旋酶是RecQ家族DNA解旋酶中的一个重要成员，参与了DNA复制、修复、转录、重组以及端粒的维持等细胞代谢过程，在维持染色体的稳定性中具有重要的作用．BLM解旋酶的突变可导致Bloom综合症，患者遗传不稳定易患多种类型癌症．本研究运用荧光偏振技术研究BLM解旋酶催化核心(BLM^642～1290)与双链DNA(dsDNA)的相互作用，分析其相关特征参数，了解BLM^642～1290解旋酶与dsDNA的结合和解链特性．结果表明：BLM^642～1290解旋酶与dsDNA的结合和解链与dsDNA 3′端的单链DNA(ssDNA)长度有关；解旋酶优先结合于dsDNA底物的ssDNA末端，且每分子解旋酶可结合9.6 nt的ssDNA；dsDNA 3′端ssDNA的长度为9.6 nt时，解旋酶的解链效率达到最大且不再随其长度而变化．另外，BLM^642～1290解旋酶也能够结合和解链钝末端dsDNA，但其结合亲和力和解链效率低于有3′端ssDNA的dsDNA．推测BLM^642～1290解旋酶在与dsDNA底物结合和解链时是单体形式，可能以尺蠖的形式解开dsDNA．这些结果可为进一步研究BLM解旋酶的功能特征提供理论基础．

摘要:建立一种非抗体依赖的检测外源性蛋白多肽分子代谢动力学血清浓度及动态变化的新方法．链亲和素为捕获分子，加入待测生物素标记蛋白或合成肽，辣根过氧化物酶标记链亲和素为检测分子，构成链亲和素-生物素标记大分子-酶链亲和素的双夹心体系，并进行特异性、敏感性、准确性及稳定性评价．本检测体系灵敏度高，可达0.3125 μg/L，且可通过改变亲和素包被浓度调整检出敏感度与检测范围．准确性回收率为97.82%～107.92%，批内、批间变异系数分别< 5.76% 和< 8.42%，并成功应用在生物素标记人血清白蛋白(biotin-HSA)与生物素标记鸡卵黏蛋白(biotin-OVM)的小鼠血清浓度动态检测．本方法不依赖抗体与放射性核素，可望在外源性蛋白多肽大分子及其药物的体内定量检测和代谢动力学研究中广泛应用．

摘要:细胞内腺苷酸浓度变化是细胞能量代谢改变的感应器，建立高效液相色谱-串联质谱法检测细胞内腺苷酸浓度的方法有助于监测药物对细胞能量代谢的影响．用含有Na-EDTA的高氯酸溶液超声裂解细胞．采用超高效HSS T3色谱柱 (2.1 mm ×100 mm, 1.8 μm)，以8 mmol/L N, N-二甲基己胺(DMHA)水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱，采用正离子模式质谱检测，在多反应监测(MRM)模式下进行定性定量分析．结果表明，AMP、ADP和ATP分别在(0.1814～14.5164) μmol/L、(0.2342～18.7354) μmol/L和(0.2003～16.0260) μmol/L线性范围内具有良好的线性关系，其相关系数分别为0.9984、0.9964和0.9990．AMP、ADP和ATP的检出限(LOD，S/N>3)分别为1.9291、1.8794 和166.5 nmol/L，定量限(LOQ，S/N>10)为1.9632、1.9672和185.6 nmol/L，且加标回收率为81.8% ～107.8%，相对标准偏差小于7.55%．AMP、ADP和ATP的日内偏差(RSD)分别为6.16%、5.13%和7.66%，日间偏差(RSD)分别为6.36%、2.74%和6.77%．该方法快速、简单、灵敏，能满足细胞内AMP、ADP和ATP含量的检测要求．通过检测分析在不同浓度高良姜挥发油作用下人肺癌A549细胞内AMP、ADP和ATP含量变化，结果显示细胞总的腺苷酸水平和能荷呈浓度依赖性下降，且当浓度达到500 mg/L时ATP/TAN明显下降，而A549细胞中AMP/ATP比例水平呈浓度依赖性增加．这提示高良姜挥发油可通过影响细胞能量代谢抑制细胞增殖．

摘要:依靠质谱技术的蛋白质组学快速发展，寻求速度快、重复性好以及准确度高的定量方法是该领域的一项艰巨任务，定量蛋白质组学分支领域应运而生．其中，无标记定量方法以其样品制备简单、耗材费用低廉以及结果数据分析便捷等优点渐露锋芒．无标记定量方法通常分为信号强度法和谱图计数法两大类．本文在这两种无标记定量方法计算原理的基础上，针对各种常用的无标记定量方法及最新进展做一个较为全面的介绍，并将详细讨论两类方法的异同点，以及目前蛋白质组学中无标记定量方法所面临的主要挑战，希望能为这一领域的研究人员在选择无标记定量方法时提供一个合理的参考．