摘要:为分析支气管上皮癌变进程中的差异表达蛋白质，筛选肺鳞癌早期诊断标志物，以人支气管上皮癌变各阶段组织为研究对象，先采用激光捕获显微切割技术(LCM) 纯化人正常支气管上皮组织、鳞状化生、不典型增生、原位癌、浸润性肺鳞癌组织，再用同位素标记相对和绝对定量 (iTRAQ) 技术结合二维液相色谱串联质谱（2D LC-MS/MS）鉴定支气管上皮癌变进程中各阶段的差异表达蛋白质。结果共鉴定了1036个蛋白质，筛选出102个与人支气管上皮癌变相关的差异蛋白质，在这些差异蛋白质中，有的在支气管上皮癌变过程中进行性上调，有的在支气管上皮癌变过程中进行性下调，有的呈阶段特异性改变；功能分析表明，这些差异蛋白质涉及代谢、细胞凋亡、增殖、分化、信号传导、转录、翻译、细胞粘附、免疫反应与发育等。Western blotting 及免疫组织化学技术验证了其中 2个差异蛋白(S100A9和 CKB) 的表达，证实了定量蛋白质组学结果的可靠性。研究结果提示：这些差异表达蛋白质与支气管上皮癌变相关，并可成为肺鳞癌的早期诊断标志物，进一步研究差异蛋白的生物学功能，将有助于阐明支气管上皮的癌变机制，从而为肺鳞癌的早期诊断与发病机制研究提供新思路。

摘要:胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是肠道L细胞分泌的一种重要的肠促胰岛素.大量研究表明,除刺激胰岛素分泌外,GLP-1可通过促进胰岛β细胞增殖,抑制β细胞凋亡而增加胰岛β细胞量,本文就其相关分子信号转导机制进行综述.

摘要:胰岛素抵抗是Ⅱ型糖尿病的病理基础之一，近年来已成为Ⅱ型糖尿病研究的关键和热点．众多研究发现，机体内鞘脂类物质水平的改变直接影响胰岛素信号的强弱．神经酰胺和神经节苷脂GM3对胰岛素信号具有负向调控作用，介导胰岛素抵抗的形成，该调节效应依赖于细胞膜上微囊蛋白．1-磷酸鞘氨醇则通过氧化还原途径增强胰岛素信号．微囊蛋白功能性活动和1-磷酸鞘氨醇的介导作用均与钙信号相关，因此，可通过实时检测细胞外钙内流和细胞内钙瞬间变化，从离子通道水平进一步探索鞘脂类调节胰岛素信号的相关机制．本文综述了鞘脂类物质调控胰岛素信号的机制，干预鞘脂类水平和改善胰岛素抵抗的策略，将为鞘脂类物质在Ⅱ型糖尿病预防和治疗的研究及应用提供有力的帮助．

摘要:三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)具有介导细胞内脂质流出，维持细胞脂质稳态的功能．新生的ABCA1必须经过胞内运输和各种化学修饰等过程，最终成为具有功能的成熟转运体，才能行使其转运脂质的功能，因此，ABCA1在胞内的运输过程和正确质膜定位对其介导胆固醇流出的功能至关重要．目前ABCA1相关研究主要集中于脂质转运方面，并提出各种胆固醇流出机制的模型，如通道转运模型、蘑菇状突起模型和胞吞-胞吐转运模型等．最近研究显示，ABCA1还具有调节质膜脂筏结构、参与免疫和炎症调节等新功能．本文主要针对ABCA1的胞内运输过程以及各种功能做一综述，以期为动脉粥样硬化相关疾病提供新的治疗靶点和途径．

摘要:在细菌中已发现多种环二核苷酸如c-di-GMP、c-di-AMP和cGAMP等可作第二信使，但在哺乳动物中一直未鉴定成功。最新研究发现cGAMP在哺乳动物天然免疫信号通路中也发挥着第二信使作用。在DNA结合条件下cGAMP可由cGAMP合成酶（cGAS）催化生成，随后结合干扰素基因激活蛋白（STING）而诱导Ⅰ型干扰素依赖的天然免疫。这些研究为天然免疫信号通路提供了新的视野，有益于免疫治疗药物的开发。

摘要:抵抗素是2001年Steppan等发现的一种与胰岛素抵抗有密切联系的细胞因子．本研究探讨了成纤维细胞生长因子21(FGF-21)在抵抗素过表达导致胰岛素抵抗的肝细胞中的糖代谢调节作用．构建人抵抗素真核表达载体，转染HepG2细胞，利用流式细胞仪筛选出过表达抵抗素的HepG2模型细胞，分别用不同浓度的胰岛素和FGF-21刺激细胞，用GOD-POD法检测细胞的葡萄糖摄取情况，利用实时荧光定量PCR方法检测抵抗素转染后及FGF-21处理后细胞GLUT1、PPAR-γ mRNA表达的变化．PCR鉴定结果表明过表达抵抗素的HepG2模型细胞构建成功．GOD-POD法检测结果证明，模型细胞对胰岛素敏感性降低，但FGF-21仍能有效调节模型细胞的葡萄糖摄取，且呈现剂量依赖关系．实时荧光定量PCR方法检测发现，抵抗素转染后HepG2细胞GLUT1 mRNA表达增加，经FGF-21刺激后模型细胞与对照细胞相比GLUT1 mRNA的表达仍有上升趋势，PPAR-γ的变化不显著．上述结果表明，抵抗素过表达的肝细胞，对胰岛素敏感性降低，产生胰岛素抵抗，但FGF-21仍能有效调节其葡萄糖代谢．

摘要:为了观察Na⁺/H⁺ 交换蛋白1(NHE1)选择性抑制剂卡立泊来德(cariporide)对糖基化终末产物( advanced glycation end products，AGEs)所致大鼠颈动脉球囊损伤后新内膜形成的作用，以球囊损伤大鼠颈总动脉，取标本HE染色后进行形态学观察并计算内膜、中膜面积及内膜/中膜面积比．为探讨相关机制，原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞( vascular smooth muscle cell，VSMC)，[³H] thymidine 检测 VSMC增殖； RT-PCR及实时RT-PCR检测VSMC基质金属蛋白酶2( matrix metalloproteinases-2，MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinases-9，MMP-9)及环氧酶2(cyclooxygenase-2，COX-2) mRNA水平；Western blot检测核因子κB(NF-κB)的表达及抑制蛋白κBα(I-κBα)的降解．大鼠颈动脉球囊损伤后，cariporide(0.1，10 mg/kg)能显著抑制AGEs所致新内膜增生(P < 0.01)．细胞实验结果显示，cariporide 可以浓度依赖性地抑制AGEs 诱导VSMC中COX-2、MMP-2及MMP-9 mRNA 表达，同时显著抑制I-κBα降解及NF-κB表达．结果表明，cariporide 能显著抑制血管损伤后AGEs所致新内膜的形成，其机制与抑制NHE1活性从而抑制NF-κB活化，下调MMP-2、MMP-9及COX-2 mRNA有关．提示NHE1可能是AGEs致血管损伤信号通路中的重要组成部分．

摘要:血管的发生和发育不仅对胚胎形成中各器官的发育分化十分重要，并且对成体的创伤修复和生殖功能也具有重要意义．血管内皮细胞是形成心血管封闭管道系统的形态基础，体外多种细胞可经诱导分化产生出内皮祖/内皮细胞(endothelial progenitor/endothelial cells，EPCs/ECs)，但是存在一些不足．鉴于人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells，hESCs)诱导分化的全能性和长期增殖能力，为EPCs/ECs提供了新的来源．现有文献报道，hESCs诱导分化为EPCs/ECs的比例较低，为了提高该诱导分化效率，我们使用分阶段的二维诱导方法，首先将细胞接种在超纯层纤连蛋白(Matrigel)上，之后通过在不同阶段添加不同的因子，最终获得CD31⁺KDR⁺细胞的比例可以达到16%．进一步内皮诱导分化的结果显示，获得的EPCs/ECs的比例可以达到约32%，这些细胞具有在Matrigel上形成血管样结构的能力，可结合植物凝集素．实时定量PCR的结果显示，诱导分化所得的细胞表达众多内皮相关基因，并且免疫荧光的结果也表明部分细胞表达内皮细胞特异性表面标志CD31．

摘要:通过重组慢病毒系统感染人间充质干细胞(mesenchymal stromal cells，MSCs)，建立了能够稳定、高效表达锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的细胞株MnSOD-MSCs．从胎儿肝脏组织克隆MnSOD基因，构建重组慢病毒MnSOD的表达载体，感染MSCs．根据荧光表达进行流式分选，获得能够继续稳定传代的高表达MnSOD基因的MSCs，RT-PCR和Western blot结果证实细胞株中的MnSOD基因稳定高表达．用不同浓度的第三丁基过氧化氢(t-BHP)处理细胞，通过CCK-8法检测细胞的存活率，SA-β-gal染色观察细胞的衰老情况，流式细胞技术分析细胞的凋亡率，实时荧光定量PCR分析p53和p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)的表达．结果发现，MnSOD过表达可提高细胞的存活率，抑制细胞的凋亡，SA-β-gal染色阳性率降低，且p53和PUMA表达下调．这提示MnSOD过表达对t-BHP诱导的细胞凋亡具有保护作用．

摘要:淀粉蔗糖酶(amylosucrase, AS)是一种葡萄糖基转移酶(E.C. 2.4.1.4)，隶属于糖苷水解酶13家族．当体系中存在葡聚糖时，AS可以蔗糖为唯一底物催化合成直链葡聚糖．与AS相比，其他拥有合成直链淀粉样多糖的酶都需要利用昂贵的核苷酸激活糖来进行合成．这使得AS成为一种具有工业应用潜力的工业酶．尽管具有较大应用潜力，但是较弱的稳定性严重影响其在工业上的应用．本工作中，以NpAS和DgAS的晶体结构为模板，对氯酚节杆菌(Arthrobacter chlorophenolicus)中发现的一种新型AS(AcAS)结构进行了模建．通过对AcAS与其他AS结构进行详细的比较，推断出AcAS的工作机理．随后，利用高斯网络模型(GNM)对其功能型运动进行了分析．根据GNM的结果，发现AcAS可分为两个运动方向相异的部分．最后，利用迭代高斯网络对AcAS的去折叠性质进行了研究．这些结果对随后的淀粉蔗糖酶的工业开发有一定帮助．

摘要:对大鼠进行不同强度的游泳训练以建立动物模型，应用膜片钳技术分析训练1～4周以及对照组的大鼠血管平滑肌细胞大电导钾通道(BK通道)的门控．实验结果显示，BK通道的开放概率在游泳训练第2、3周时明显升高，到第4周趋于稳定；游泳训练后，通道对膜电位、胞内钙离子的敏感性显著增加，通道的平均开放时间常数增大，关闭时间常数减小．实验结果还显示，由游泳训练导致的被动牵张并不改变通道的电导．BK通道在被动牵张力作用下生物物理特性的变化，可能有缓解由于游泳训练而导致血压升高的作用，进而使机体保持正常的生理状态．