摘要:内质网相关蛋白质降解途径(ERAD)，即蛋白质分泌过程中错误折叠或未折叠的蛋白质在内质网中被识别并逆向运输到细胞质经聚泛素化后由蛋白酶体降解的过程．自从发现该途径后对其机制的阐明一直处于不断探索的阶段．近年来，对ERAD底物识别、逆向运输和泛素化新组分的发现以及新技术的应用，使得该途径的具体分子机制更加清晰．本文全面梳理并综述了内质网应激响应、ERAD降解过程与机理的最新进展，并对模式蛋白底物和最新研究方法进行了总结，以期展示该领域的研究概况．

摘要:蛋白质糖基化修饰的鉴定是蛋白质翻译后修饰分析中最具挑战性的任务之一，近几年尤其受到关注．快速发展的质谱技术为规模化的蛋白质糖基化修饰研究提供了有效的手段．与其他基于质谱技术的翻译后修饰鉴定相比，糖基化鉴定的难点在于糖链是大分子而且存在微观不均一性，另外糖链本身可以在串联质谱中碎裂且与肽段的碎裂规律不同，导致蛋白质组学的质谱解析方法和软件难以完整地鉴定肽段序列和糖链结构．完整N-糖肽的鉴定是糖基化分析的热点内容之一，针对N-糖肽的鉴定，近年来，人们开发了多种多样的质谱解析方法，其中包括用N-糖酰胺酶切除糖链后鉴定N-糖基化位点的方法、基于电子转运裂解的糖肽肽段鉴定、基于高能碰撞裂解与电子转运裂解联用或碰撞诱导裂解与三级谱联用的完整N-糖肽鉴定等等．本文对这些质谱解析方法进行了整理和综述，简要指出了目前完整糖肽鉴定软件存在的一些不足，展望了未来的发展方向．

摘要:子痫前期是一种非常严重的妊娠疾病，主要症状有高血压、蛋白尿、内皮功能障碍、肾小球血管内皮细胞增生以及滋养层细胞浸润不足等，动物模型是研究本病发病机理与开发诊治手段的主要工具．长期以来，针对子痫前期主要症状已经建立了多种动物模型，但不同的动物模型各有优缺点，至今仍没有一个理想的子痫前期动物模型，这也是子痫前期病因不明和缺乏有效治疗手段的主要原因之一．本文就已有的模型进行了归纳总结，旨在为不同研究需要而选择合适的模型，并为开发更为理想的子痫前期动物模型提供参考．

摘要:P-环NTP酶(GTP 酶和ATP酶)普遍存在于真核生物和原核生物中，参与调节不同的细胞进程．YchF和YihA是细菌中两种高度保守的NTP酶，但其生理功能仍然不清楚．之前的研究表明这两种NTP酶可以与核糖体或者核糖体亚基结合．我们检测了在不同核苷酸存在的情况下，大肠杆菌YchF和YihA蛋白与核糖体30S、50S、70S颗粒的结合情况，同时也探究了核糖体亚基的结合是否与NTP酶活性的激活有关．数据表明YchF与70S结合，YihA与50S结合．70S核糖体能同时激活YchF的ATP酶和GTP酶活性．然而YihA的GTP酶活性可以分别被50S和70S激活，并且70S呈现了8.8倍的激活效应．这些数据为进一步研究这两种保守的NTPase的生理功能奠定了基础．

摘要:研究显示，蛋白质异常修饰形成的寡聚体，与其多聚体、淀粉样纤维相比，具有更强的细胞毒性．这一发现被认为是蛋白质错误折叠和聚集研究领域中的重要进展．蛋白质的异常修饰如还原糖的非酶糖基化，是糖尿病最基本的病理特征．2型糖尿病患者尿液中的核糖浓度显著升高，表明糖尿病不仅与葡萄糖代谢紊乱相关，同时也与核糖代谢失调相关．以牛血清白蛋白(BSA)为研究对象，通过荧光分光光度计检测、原子力显微镜、透射电子显微镜观察以及分子排阻色谱分离，观察到核糖糖基化能够诱导BSA聚集，从单体、寡聚体逐渐形成多聚体．通过CCK-8 Kit、乳酸脱氢酶细胞活性检测、TUNEL染色、caspase-3活性检测以及流式细胞检测等方法，发现核糖糖基化的BSA单体对SH-SY5Y细胞(人神经母细胞瘤细胞系)具有明显的毒性，与此同时，糖化寡聚体和多聚体没有表现出显著的毒性．进一步研究发现，核糖糖基化的BSA单体通过与AGEs的受体RAGE相互作用，激活细胞内的MAPK通路，从而导致细胞凋亡．

摘要:慢性肉芽肿病(CGD)是一种罕见的遗传免疫缺陷综合症．CGD病人最常见为NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2，NOX2)功能缺失造成吞噬细胞内活性氧生成障碍，不能清除外源的细菌与真菌的感染．凝胶多糖curdlan属于1, 3-β-葡聚糖，是白色念珠菌细胞壁的主要成分．目前，作为吞噬细胞中主要的模式识别受体，凝集素dectin-1是否参与curdlan诱导巨噬细胞参与免疫炎症反应以及其分子机制不十分清楚．为了研究这一机制，我们采用luminol和Amplex Red法检测活性氧生成水平，ELISA检测炎症因子IL-1β水平以及免疫荧光法检测NF-κB信号通路的激活情况．结果表明，curdlan浓度依赖性上调巨噬细胞活性氧生成，NOX2缺失显著降低活性氧产生，dectin-1缺失部分降低活性氧的生成和部分阻断NF-κB信号通路的激活．NOX2 KO小鼠炎症因子IL-1β水平显著升高，Dectin-1缺失后NOX2 KO小鼠IL-1β水平降低； Dectin-1 KO小鼠的IL-1β水平与WT小鼠比无显著差异，与Dectin-1/NOX2 KO小鼠比差异显著．上述结果提示， curdlan刺激下机体通过巨噬细胞内的dectin-1受体诱导免疫应答，激活NF-KB信号通路释放炎症因子IL-1β，同时通过dectin-1受体激活NOX2释放活性氧清除病原，促进机体修复．在这一过程中dectin-1不是唯一参与的受体．

摘要:自噬与凋亡被认为是细胞程序性死亡的两种重要途径，二者的交互联系对阐明药物的抗肿瘤机理有重要价值．众多的研究表明，雷公藤甲素对多种肿瘤细胞都具有显著的抑制作用．细胞凋亡与自噬可被相同的因素所诱导，p53蛋白可以同时对二者起调控作用，在自噬与凋亡的交互作用(crosstalk)中扮演着重要角色．本文以HeLa细胞为模型，研究雷公藤甲素诱导HeLa细胞发生自噬和凋亡的机制，并通过抑制p53依赖的转录，研究雷公藤甲素诱导HeLa细胞p53依赖的自噬和凋亡交互联系．

摘要:肌卫星细胞在骨骼肌生长发育和出生后骨骼肌损伤修复中起着重要的作用，但是有关肌萎缩中肌卫星细胞的可塑性变化、作用及其机制尚不清楚．本研究采用小鼠尾悬吊模拟失重效应诱导失重肌萎缩，动态分析了失重肌萎缩发生过程中不同类型肌纤维的肌卫星细胞数量和增殖、分化潜能可塑性的改变，发现在失重肌萎缩过程中，处于安静状态的肌卫星细胞显著增多、激活增殖的肌卫星细胞显著减少，而具有成肌分化潜能的肌卫星细胞有持续减少趋势．此外，在失重肌萎缩比目鱼肌单根肌纤维移出的体外培养中，证明了失重肌萎缩肌纤维肌卫星细胞可塑性降低的特征性变化．进一步，通过对比分析Smad3基因敲除及其同窝野生型小鼠，在失重肌萎缩中肌卫星细胞可塑性的差异性变化，揭示了Smad3在调控失重肌萎缩肌卫星细胞可塑性变化中的关键作用．

摘要:在卵母细胞低温保存中，通常需要加载冷冻保护剂来抑制冰晶对细胞的损伤，但高浓度冷冻保护剂的加载会对细胞造成渗透损伤．为了减小细胞的渗透损伤，本文设计并制作了适合卵母细胞冷冻保护剂加载的微流体装置，研究了微流控线性加载30% (v/v)二甲基亚砜(Me₂SO)低温保护剂时细胞内保护剂浓度变化、细胞体积变化，以及对细胞存活率与发育率的影响，并与传统的加载方法(一步法、分步法)做了比较．结果表明：微流控法能够实现卵母细胞冷冻保护剂的连续线性加载，避免了卵母细胞体积的骤变，显著减小了细胞的渗透损伤，提高了细胞的存活率．其中细胞的最小渗透体积减小为0.86V₀，细胞的存活率达到92.8%，比一步法高33%，比两步法高16.3%，但与四步法之间无显著性差异．经孤雌激活后体外培养，细胞的卵裂率和囊胚率分别达到75.8%和27.4%，都显著高于一步法和分步法(P < 0.05)．因此，微流控线性加载低温保护剂能够显著减小细胞的渗透损伤，为卵母细胞低温保存技术提供新思路．

摘要:PM₁表面蛋白冠对其内吞及细胞毒性的影响

摘要:用余光感知图形的魅力