摘要:目的 利用透明质酸建立小鼠胎肝细胞3D培养体系。 方法 分离获得胚胎12-14天胎肝细胞，利用KM培养基进行初步2D肝干/祖细胞的筛选培养，并利用透明质酸及KM培养基配制水凝胶建立3D细胞培养体系。 结果 胎肝细胞在2D体系中呈现克隆状生长。分离培养获得的肝干/祖细胞克隆在透明质酸建立的3D培养体系保持增殖活性，并进一步获得肝细胞功能特性，表现为3D培养上清中白蛋白合成和尿素水平显著增加。Q-PCR结果显示随着3D培养时间的延长，其肝细胞干性标志如AFP、CK19、EpCAM、Prox1等表达水平都大幅度降低且接近成年小鼠肝脏表达水平。 结论 本研究成功建立基于透明质酸的小鼠胎肝细胞的3D无血清培养体系，并可促进小鼠胎肝细胞肝细胞功能进一步成熟。

摘要:泛素化是最具多样性的蛋白质翻译后修饰之一，广泛参与蛋白质降解、细胞信号转导、DNA损伤修复等重要的生物学过程. 其中，泛素的8个位点（M1、K6、K11、K27、K29、K33、K48、K63）都可以与另一个泛素分子的C末端结合，形成结构复杂的泛素链. 不同结构泛素链的功能不同. 由于缺乏检测泛素链的特异性工具，许多类型泛素链的功能尚未清楚. 已开发的泛素连接特异性抗体等亲和试剂为研究泛素链提供了重要的分析工具. 本文综述了目前已报道的几种泛素连接特异性抗体的开发以及应用，同时总结了其他可分析泛素链的特异性亲和工具，例如Affimer、基于UBD的荧光传感蛋白等. 同时，本文还对开发泛素连接特异性抗体所需抗原的获得方法进行了简单的介绍.

摘要:脑铁稳态对于维持脑的正常发育和控制细胞氧化应激水平具有重要作用. 大量研究已显示，脑铁稳态的失衡与阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的发病存在密切关系，但其机理尚需深入研究. 本文结合本实验室的研究结果，总结了脑铁代谢失衡参与AD病变的研究进展，重点讨论了脑铁增高与AD症状及细胞损伤的关系，及负责铁摄入、储存、释放和调控的几种铁代谢关键分子在AD中的表达变化，并展望了改善脑铁水平、调节铁代谢相关分子平衡、降低氧化应激等方法作为AD治疗策略的前景. 本文旨在为今后深入研究脑铁代谢及相关分子在AD病理过程中的作用，开发预防和治疗AD新药物提供参考.

摘要:识别其他生物体的运动对于个体的生存和社会交互都有极为重要的意义. 本文首先基于生物运动识别的行为学、心理物理学、脑损伤和精神障碍研究介绍了生物运动识别的一些特性和影响因素；然后基于神经影像学、脑损伤和神经电生理学研究从视觉系统背腹侧双通路加工的角度，梳理了其信息加工机制的进展；最后对生物运动识别信息加工神经机制的研究方向提出了一点建议，并指出研究过程中需要注意的问题.

摘要:抑郁症是当今社会上造成首要危害且病因和病理机制最为复杂的精神疾病之一，寻找抑郁症的客观生物学标志物一直是精神医学研究和临床实践的重点和难点，而结合人工智能技术的磁共振影像(magnetic resonance imaging,MRI）技术被认为是目前抑郁症等精神疾病中最有可能率先取得突破进展的客观生物学标志物. 然而，当前基于精神影像学的潜在抑郁症客观生物学标志物还未得到一致结论. 本文从精神影像学和以机器学习(machine learning,ML)与深度学习(deep learning, DL)等为代表的人工智能技术相结合的角度，首次从疾病诊断、预防和治疗等三大临床实践环节对抑郁症辅助诊疗的相关研究进行归纳分析，我们发现：a. 具有诊断价值的脑区主要集中在楔前叶、扣带回、顶下缘角回、脑岛、丘脑以及海马等；b. 具有预防价值的脑区主要集中在楔前叶、中央后回、背外侧前额叶、眶额叶、颞中回等；c. 具有预测治疗反应价值的脑区主要集中在楔前叶、扣带回、顶下缘角回、额中回、枕中回、枕下回、舌回等. 未来的研究可以通过多中心协作和数据变换提高样本量，同时将多元化的非影像学数据应用于数据挖掘，这将有利于提高人工智能模型的辅助分类能力，为探寻抑郁症的精神影像学客观生物学标志物及其临床应用提供科学证据和参考依据.

摘要:Tiki1基因是哈佛大学儿童医学院贺熹教授实验室发现的一个对蛙头部的诱导起到决定性作用的新基因，但Tiki1基因在小鼠等啮齿类动物中缺失，因此无法利用小鼠等小动物来研究其在哺乳动物中的作用. 本文利用CRISPR/Cas9系统结合体细胞克隆技术构建Tiki1基因修饰猪模型，研究Tiki1基因在猪发育中的作用. 我们利用贺熹教授团队提供的人Tiki1基因序列，在猪的基因组数据库中比对出与其同源性最高的一段序列设计2个靶位点（g1和g2）. 以设计的靶位点构建打靶质粒转染猪胎儿成纤维细胞，经细胞筛选、PCR扩增及测序共鉴定了52个单细胞克隆株. 最终选择靶位点g1为纯合双敲的5个单细胞克隆株和靶位点g2为纯合双敲的3个单细胞克隆株作为构建Tiki1基因敲除猪的核供体. 我们共计构建了720个重组胚胎，分别植入3头代孕母猪，其中有1头经B超检测成功怀孕并妊娠到期产下13头发育正常的克隆猪，经测序鉴定其中12头为Tiki1基因双敲除猪模型， Tiki1基因敲除克隆猪健康存活至今. 结果表明Tiki1基因对于猪早期发育的作用机理不同于蛙，其在猪早期发育的过程中的具体作用机理有待后续进一步的深入研究.

摘要:iNKT细胞是一类特殊的固有样T淋巴细胞，在感染、肿瘤、自身性免疫疾病和代谢类疾病中都发挥重要的调控作用. 揭示调控iNKT细胞发育、分化和功能的细胞分子机制，对于阐释iNKT细胞与疾病的关系以及寻求可能的治疗途径都具有重要的意义. 依托泊苷诱导蛋白2.4（Etoposide-induced protein 2.4，Ei24）可调控细胞生长、凋亡和自噬等多种生物学功能，但其对iNKT细胞的发育和功能的影响仍不清楚. 本研究利用Cre/loxP重组酶系统成功构建T细胞中Ei24特异性敲除小鼠. 敲除Ei24后，iNKT细胞在胸腺中的发育受到明显抑制，肝脏和脾脏等组织中的iNKT比例和数目明显减少. 进一步研究发现，Ei24主要影响iNKT1和iNKT17 2个亚群，对iNKT2的调控作用相对较小. 当腹腔注射iNKT细胞特异性活化抗原α-GC后，敲除Ei24后iNKT细胞的IFN-γ应答更低，但不影响iNKT细胞的IL-4应答. 以上结果表明，Ei24可以调控iNKT细胞的发育与功能.

摘要:蛋白质印迹技术（Western blot，WB）基于抗体的特异性了解蛋白质的表达特征. 该技术已经成为生命科学基础与应用研究的最常用技术之一. 但目前WB手工操作多、实验流程难规范、一般只能用于同一WB分析内不同样品中目标蛋白质丰度的定性或相对定量，难以在不同实验室间进行WB数据比较. 本文简要回顾了WB发展的历程，提出了升级版蛋白质印迹（WB 2.0）的概念，介绍了包括数字化、标准化、自动化、微量化、通量化以及基于内参的归一化建立数据库等为核心内容的设想. 展望了WB 2.0的应用前景，提出在WB 2.0技术大规模应用的基础上，逐步建立开放的蛋白质表达特征数据库，成为继基因组、转录组等数据库之后生命科学领域的又一支撑平台.

摘要:组蛋白甲基化修饰与基因的转录调控密切相关，其中果蝇的Ash1以及哺乳动物的同源蛋白Ash1L是催化组蛋白H3上36位赖氨酸进行单甲基化和双甲基化的甲基转移酶. 由于存在一个自抑制环区阻挡了底物的结合位点，Ash1/Ash1L本身的组蛋白甲基转移酶活性是很低的. 但与Mrg15结合后，Ash1/Ash1L从原来的自抑制态转变为活化态. 最近，Ash1L与Mrg15结合后复合物的晶体结构被成功解析出来，使之可以揭示Ash1L与Mrg15之间的特异相互作用以及Mrg15激活Ash1L的机理. 我们通过比较Ash1L/Mrg15复合物的两个晶体结构来讨论Ash1L分子中的天然无序区域在其活化过程中所起的重要调控作用.

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